【摘要】：環(huán)孢素A(CsA)是一種重要的免疫抑制藥物,因其具有良好免疫抑制作用,被廣泛應用于臨床。CsA的治療效果受其主要副作用,即腎毒性作用的限制。CsA導致的急性或慢性腎毒性損傷,都會使腎功能減退以及組織病理學和超微結(jié)構損傷改變。間充質(zhì)干細胞(MSC)移植可以預防或減輕毒性藥物引起的腎損傷,但MSCs對CsA導致的慢性腎毒性損傷的治療效果及作用機制尚不清楚。MSCs來源于不同的組織和器官,包括脂肪組織,骨髓,臍帶血,以及實體器官如肺臟,心臟等。MSCs是一種多能細胞,具有增殖和分化成成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞的能力。它的修復、再生和免疫調(diào)節(jié)特性使它成為細胞治療和組織再生的良好候選。越來越多的基礎實驗和臨床試驗證明了 MSCs治療各種疾病的安全性、可行性和有效性。MSC治療的主要缺點是其靶向歸巢能力及早期在炎癥、缺血缺氧等損傷的微環(huán)境下的存活能力,這些明顯降低了 MSCs的治療效果。應用預處理或改良的MSCs是提高MSCs遷移能力、歸巢能力和促進組織修復能力的新策略。我們用促紅細胞生成素(EPO)預處理骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs),研究其對環(huán)孢素A(CsA)誘導的大鼠慢性腎毒性損傷的治療作用。以不同濃度的EPO(10、100、500、1000 IU/ml)預處理BMSCs,孵育24、48 h,我們用MTT實驗檢測其增殖率,微絲微管染色觀察細胞骨架形態(tài),劃痕和遷移實驗檢測其修復遷移能力,Western blot檢測CXCR4表達,確定最佳預處理條件。為了研究EPO預處理的BMSCs療效,我們通過CsA誘導建立了體外HK2毒性損傷的模型和體內(nèi)大鼠慢性腎毒性損傷纖維化模型。我們發(fā)現(xiàn),500 IU/ml濃度的EPO加入BMSCs的培養(yǎng)液中,共培養(yǎng)48 h,能誘導其增殖率顯著升高,細胞骨架沿細胞長軸呈平行狀重新排列,在劃痕試驗中能明顯修復劃痕距離,遷移實驗中透過濾過膜明顯向下室受損的HK2細胞遷移。在CsA誘導建立的體外HK2毒性損傷的模型中,顯著降低HK2細胞的凋亡率。通過Western blot和RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn),在EPO-BMSCs治療組中,顯著降低IL-1β或TGF-β1表達,促進HO-1、VEGF和E-cadherin的表達,顯著增加抗凋亡因子Bcl-2的水平,而凋亡因子caspase-3的水平明顯降低。在建立的CsA誘導的大鼠慢性腎毒性損傷的動物模型中,EPO-BMSCs對腎功能的改善能力明顯高于BMSCs。在腎臟病理表現(xiàn)上,EPO-BMSCs的治療作用也明顯好于BMSCs,EPO-BMSCs能明顯減少腎臟間質(zhì)淋巴細胞浸潤、腎小管腫脹、壞死以及腎間質(zhì)纖維化病理改變。我們證實,在BMSCs輸注前用500 IU/ml EPO進行預處理48h,顯著提高了 BMSCs的歸巢能力和治療修復能力;能顯著抑制HK2細胞在CsA毒性損傷中的凋亡;并且一次性的EPO-BMSCs的輸注治療顯著改善了 CsA誘導的慢性毒性腎損傷大鼠的腎功能,促進了大鼠慢性毒性纖維化的損傷修復。
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R692
【圖文】：

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【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 徐璐;廖德懷;陳正;馬俊杰;李光輝;方佳麗;杜楊春;畢文浩;潘光輝;;腎移植中經(jīng)移植腎動脈輸注骨髓間充質(zhì)干細胞3例報告[J];中國組織工程研究與臨床康復;2010年53期

相關博士學位論文 前2條

1 王宜青;SDF-1/CXCR4軸以及MCP-1/CCR2軸對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞遷移及歸巢的影響[D];蘇州大學;2014年

2 陳正;BM-MSC誘導移植免疫耐受和修復慢性移植腎損傷的初步研究[D];中南大學;2013年

本文編號：2726596