【摘要】：目的:探討大黃酸(RH)減緩IgA腎病腎間質纖維化的作用及與TGF-β1/Smad信號通路的關系。實驗方法:將5周SPF級SD雌性大鼠隨機分為四組,即正常對照組、IgA腎病模型組、RH治療組和RH預防組(n=7)。通過BSA+LPS+CCl4方法構建IgA腎病模型,對模型鼠在不同時間灌胃給藥大黃酸建立大黃酸預防組和治療組。10周末處死動物取材,在動物處死前1天收集24小時尿液做尿沉渣紅細胞計數和24小時尿蛋白量的檢測;動物處死后分別取血液和腎組織,用酶聯免疫吸附試驗方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)檢測血清中IgA濃度,免疫熒光法檢測腎小球IgA的沉積,蘇木素-伊紅(HE)染色觀察各組大鼠腎臟組織的病理變化,免疫組織化學二步法觀察各組腎臟組織TGF-β1、Smad3、α-SMA、FN的陽性蛋白表達并采用圖像分析儀進行圖像分析,實時熒光定量PCR檢測各組大鼠腎臟組織中TGF-β1、Smad3、α-SMA、FN mRNA的表達。結果:1.在正常對照組中,尿液檢測未見鏡下血尿;與正常對照組相比,IgA腎病模型組尿液檢測見鏡下血尿,尿沉渣紅細胞數增加(P0.01);與IgA腎病模型組相比,RH治療組和RH預防組尿沉渣紅細胞數均減少,其中RH預防組與IgA腎病模型組相比,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。2.與正常對照組相比,IgA腎病模型組24小時尿蛋白量顯著增加(P0.01);與IgA腎病模型組相比,RH治療組和RH預防組24小時尿蛋白量均減少(分別為P0.05,P0.01)。3.正常對照組大鼠腎小球系膜區(qū)未見IgA沉積,IgA腎病模型組大鼠腎小球系膜區(qū)可見較強綠色熒光,呈不連續(xù)顆粒狀沉積(P0.01)。RH治療組和RH預防組大鼠腎小球系膜區(qū)綠色熒光均有不同程度減弱(P0.01),且RH預防組大鼠腎小球系膜區(qū)綠色熒光減弱更顯著。4.與正常對照組相比,IgA腎病模型組血清IgA濃度明顯增加(P0.01)。與IgA腎病模型組相比,RH治療組和RH預防組血清IgA濃度降低,RH預防組與IgA腎病模型組相比,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。5.正常對照組腎皮質組織結構清晰,腎小囊腔無擴張,系膜細胞及基質無增生,腎間質、腎小管無明顯變化。IgAN模型組可見腎小囊腔擴張,腎小球變小,腎小球系膜細胞及基質中至重度增生,纖維化明顯,腎小管腫脹,管腔狹窄。與IgA腎病模型組相比,RH治療組RH預防組和均有不同程度的改善,腎小囊擴張減小,腎小球系膜細胞及基質輕度增生,腎小管腫脹減輕。6.免疫組化結果顯示,與正常對照組相比,IgA腎病模型組腎臟TGF-β1、Smad3、FN和α-SMA的陽性蛋白表達均顯著增加(P0.01);與IgA腎病模型組相比,RH治療組和RH預防組腎臟TGF-β1、Smad3、FN和α-SMA的陽性蛋白表達均減少(P0.01)。7.實時熒光定量PCR結果顯示,與正常對照組相比,IgA腎病模型組腎臟TGF-β1、Smad3、FN、α-SMA的mRNA表達均顯著增加(P0.01);與IgA腎病模型組相比,RH治療組腎臟TGF-β1、Smad3、FN、α-SMA的mRNA表達均減少(P0.05),RH預防組腎臟TGF-β1、Smad3、FN、α-SMA的mRNA表達均減少(分別為P0.01,P0.01,P0.05,P0.05)。結論:RH能減輕IgA腎病大鼠腎間質纖維化,可能是通過調控TGF-β1/Smad信號通路,發(fā)揮其抗纖維化的作用。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R692
【圖文】：

同程度減弱（P<0.01），且 RH 預防組減弱的更明顯（見表表 6 腎小球 IgA 沉積的分級情況± + ++ +++ 7型組 5 2 4 3 3 4gA 濃度檢測對照組相比，IgA 腎病模型組血清 IgA 濃度明顯增加（P<型組相比，RH 治療組和 RH 預防組血清 IgA 濃度降低，R模型組相比，有顯著統(tǒng)計學差異（P<0.01）（見圖 1）。

質中至重度增生，纖維化明顯，腎小管腫脹，管腔狹窄組均有不同程度的改善，腎小囊擴張、腎小管腫脹及腎小情況均減輕（照片 2）。 TGF-β1、Smad3、α-SMA、FN 免疫陽性蛋白織 TGF-β1 免疫陽性蛋白的檢測對照組中，TGF-β1 在腎小管中少量表達，腎小球中未見模型組中，其在腎小管中大量表達，腎小球中未見明顯 處理組中，其在腎小管的表達減少，腎小球未見明顯表達儀分析 TGF-β1 陽性蛋白的 IOD 值，與正常組比較，IgA蛋白的 IOD 顯著增加（P<0.01）；與 IgA 腎病模型組比 預防組 TGF-β1 陽性蛋白的 IOD 均顯著減少（P<0.01）（

【參考文獻】

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本文編號：2726318