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應(yīng)用SERS和免泵微流控芯片進(jìn)行前列腺癌標(biāo)記物的痕量檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2020-06-13 03:05
【摘要】:前列腺癌是源發(fā)于前列腺的一種惡性腫瘤,是男性最常見的惡性腫瘤之一。目前治療手段多以口服激素類小分子藥和化療為主。前列腺癌癥在早期階段,通過放射性粒子植入、根治性前列腺切除術(shù)、根治性外放射治療,可以進(jìn)行有效的治療和控制。一旦病情進(jìn)入晚期或者癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移后,基本無(wú)法治愈。在2016年的調(diào)查中,發(fā)現(xiàn)中國(guó)有12萬(wàn)新發(fā)前列腺癌患者。這個(gè)趨勢(shì)下,預(yù)計(jì)到2030年,中國(guó)新發(fā)前列腺癌患者人數(shù)將達(dá)到23.7萬(wàn)人,這一領(lǐng)域存在極大診斷與治療需求。由于表面增強(qiáng)拉曼(SERS)檢測(cè)技術(shù)能夠提供超靈敏的生物化學(xué)信息,得以讓研究人員得到更加準(zhǔn)確的分子信息,其已成為一種有前景光譜技術(shù)。針對(duì)目前前列腺癌早期篩查方法在不同程度上存在著需要大型儀器、操作步驟復(fù)雜、耗時(shí)較長(zhǎng)、成本高昂等問題,本課題研究了一種新的基于SERS的免泵微流控芯片的免疫分析技術(shù),用于快速分析前列腺抗體標(biāo)記物,來(lái)解決目前前列腺癌早期篩查中存在的問題。首先,以SERS探針為信號(hào)源,以微米磁珠為免疫反應(yīng)洗脫基底,對(duì)二者進(jìn)行對(duì)應(yīng)抗體的生物鉸鏈,與待測(cè)前列腺特異性抗原(Prostate Specific Antigen,PSA)共同組成免疫檢測(cè)的“三明治”夾心結(jié)構(gòu)。其次,在微流控芯片制備完成后,我們對(duì)微流控芯片進(jìn)行了親水性處理,它大大減小了微流控檢測(cè)系統(tǒng)的尺寸并提高了便攜性。親水性的作用下,使得PSA抗原標(biāo)記物和磁珠(MB)在芯片內(nèi)自動(dòng)流動(dòng),通過環(huán)形通道的作用,將試劑充分的混合,并通過芯片上的梯形通道加速了它們?cè)谡麄(gè)通道中的反應(yīng)。通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,這種基于芯片的免疫分析可以在5分鐘內(nèi)完成,無(wú)需人工孵化和重型注射泵。在對(duì)PSA抗原標(biāo)記物的痕量檢測(cè)中,信號(hào)從數(shù)百個(gè)磁珠免疫復(fù)合物中采集得到的總體平均信號(hào)。檢測(cè)限達(dá)到0.01 ng mL~(-1),低于臨床檢測(cè)參考值近2個(gè)數(shù)量級(jí)。它是鑒別前列腺癌和其他與前列腺有關(guān)疾病的一種有用的篩選試驗(yàn)。本項(xiàng)目的預(yù)期成果對(duì)于實(shí)現(xiàn)前列腺癌早期篩查和診斷的高特異性、快速準(zhǔn)確以及現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)具有十分重要的意義。
【圖文】:

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第一章 緒論第一章 緒論曼散射拉曼光譜是由印度科學(xué)家拉曼(C.V.Raman)于 1928 年首次在 CCL中發(fā)現(xiàn)的。他發(fā)現(xiàn)當(dāng)光與分子相互作用后,一部分光的波長(zhǎng)發(fā)生變對(duì)這些頻率的變化量進(jìn)行探究發(fā)現(xiàn),頻率的變化量只與分子的結(jié)這是對(duì)分子結(jié)構(gòu)研究的一大進(jìn)步。在 1930 年拉曼獲得了這一年度物理學(xué)獎(jiǎng),,這種效應(yīng)被命名為拉曼效應(yīng)(Raman 散射)。

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圖 1.2 拉曼散射原理示意圖Fig 1.2 Schematic diagram of Raman scattering principle.2 拉曼光譜拉曼光譜是一種散射光譜,基于拉曼散射效應(yīng),不同種類的原子團(tuán)結(jié)構(gòu)不同,導(dǎo)致振動(dòng)的方式是不同的,會(huì)散射出不同頻率的光。拉曼取決于散射物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)特性,因此,分析拉曼光譜是對(duì)與入射光不同的散射光譜進(jìn)行分析以得到分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)方面信息,并應(yīng)用于結(jié)構(gòu)研究的一種分析方法。拉曼光譜是研究生物大分子的有力手段,水的拉曼光譜很弱、譜圖又很簡(jiǎn)單,故拉曼光譜可以在接近自然狀態(tài)性狀態(tài)下來(lái)研究生物大分子的結(jié)構(gòu)及其變化[3]。有些生物大分子的拉曼散射很弱,拉曼光譜通常不夠靈敏,但利用或表面增強(qiáng)拉曼技術(shù)就可以大大加強(qiáng)拉曼光譜的靈敏度。表面增強(qiáng)拉譜學(xué)(Surface-Enhanced Raman Scattering,SERS)已成為拉曼光譜研究的一個(gè)領(lǐng)域。
【學(xué)位授予單位】:合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R737.25;O657.37

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2710540

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