【摘要】：目的:采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)從腎癌中篩選出多種差異蛋白,從中選擇SERPINA1,進(jìn)而探討SERPINA1在各種類型腎癌(主要是腎透明細(xì)胞癌)中的表達(dá)情況及相關(guān)臨床意義。方法:1、液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)構(gòu)建腎癌的差異蛋白表達(dá)譜:(1)收集腎癌標(biāo)本,這些腎癌標(biāo)本必須是經(jīng)病理明確診斷的、在手術(shù)中切除得到的腎癌標(biāo)本,將上述標(biāo)本制備成多肽混合物。(2)采用分離系統(tǒng)為液相色譜、檢測(cè)系統(tǒng)為質(zhì)譜的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)上述標(biāo)本中的蛋白,構(gòu)建腎癌的差異蛋白表達(dá)譜;(3)對(duì)在腎癌中多種高表達(dá)的蛋白進(jìn)行篩選,同時(shí)查閱相關(guān)資料,從中選取SERPINA1作為目的蛋白來(lái)進(jìn)行研究和闡述。選取36例患者手術(shù)中切除得到的腎癌組織及相對(duì)應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本,這些腎癌患者在術(shù)前均未接受放療、化療等任何治療手段。2、通過(guò)免疫印跡(Western Blot)的方法證實(shí)SERPINA1在相應(yīng)組織中的表達(dá)情況;3、免疫組織化學(xué)方法驗(yàn)證SERPINA1在腎癌組織中的表達(dá)情況:經(jīng)病理明確診斷為透明細(xì)胞腎癌的患者,取其癌組織切片,經(jīng)石蠟封片保存,采用免疫組織化學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法分別檢測(cè)SERPINA1在患病組(陽(yáng)性組)和對(duì)照組(陰性組)中的表達(dá)情況,染色后,通過(guò)顯微鏡下觀察患病組及對(duì)照組,明確SERPINA1的表達(dá)情況,進(jìn)一步了解SERPINA1與腎癌患者臨床病理之間的聯(lián)系。結(jié)果:1.通過(guò)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),我們?cè)谀I癌組織中得到41個(gè)差異蛋白,其中,有36個(gè)蛋白為上調(diào)表達(dá),5個(gè)蛋白為下調(diào)表達(dá),我們的目標(biāo)蛋白SERPINA1為其中一個(gè)上調(diào)表達(dá)蛋白。2.通過(guò)免疫印跡實(shí)驗(yàn)可證明:相比于癌旁組織,在腎癌組織中,SERPINA1的表達(dá)量明顯升高。3.在我們選擇的11例腎癌患者的免疫組化實(shí)驗(yàn)中,腎癌患者組織切片經(jīng)染色后相比于陰性對(duì)照明顯表達(dá)。結(jié)論:1.SERPINA1在腎癌組織中的表達(dá)量較癌旁組織明顯升高。2.SERPINA1在腎癌患者癌組織中呈高表達(dá)。
【圖文】：

圖 2. 1由圖可知 SERPINA1 可分泌 SEC16B、CNIH1、CNIH2、CHIHCastro[6]等人的研究表明，人類 CNIH 補(bǔ)充了酵母中 Erv14p 的缺失免疫熒光實(shí)驗(yàn)表明[7]人和果蠅的蛋白質(zhì)主要定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)中與未成熟相關(guān)。tgf -蛋白首先作為 I 型跨膜蛋白合成，具有細(xì)胞EGF 核心區(qū)域，這是受體結(jié)合和激活所必需的。從 ER 轉(zhuǎn)運(yùn)后，外被移除，在高爾基體的分泌通路中產(chǎn)生一種可溶性形式。CNIH 過(guò)達(dá)導(dǎo)致 tgf -蛋白保留在 ER 中。Castro[6]等人研究的結(jié)論是，，cornich蛋白是 tgf -蛋白選擇性轉(zhuǎn)運(yùn)和成熟所必需的。CNIH1 高表達(dá)于肝臟十二指腸、腎臟等多種器官。Utku[8]等人通過(guò) Northern blot 分析

圖 4.1 腎癌組織中 SERPINA1 陽(yáng)性表達(dá)（10圖 4.2 腎癌組織中 SERPINA1 陰性對(duì)照（10化實(shí)驗(yàn)可知，加入 SERPINA1 抗體
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R737.11

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本文編號(hào)：2704853