【摘要】：目的:探索TET2對(duì)膀胱尿路上皮癌T24細(xì)胞增殖及侵襲行為的影響。材料與方法:以膀胱癌尿路上皮癌T24細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為7組:T24細(xì)胞組即空白組,抑制對(duì)照組(T24細(xì)胞+TET2-NC),TET2-519抑制組(T24細(xì)胞+TET2-homo-519),TET2-1417抑制組(T24細(xì)胞+TET2-homo-1417),TET2-3092抑制組(T24細(xì)胞+TET2-homo-3092),過表達(dá)對(duì)照組(T24細(xì)胞+空白質(zhì)粒),TET2過表達(dá)組(T24細(xì)胞+TET2過表達(dá)質(zhì)粒)。采用脂質(zhì)體Lipofectamine~(TM)2000完成轉(zhuǎn)染,采用蛋白免疫印跡法檢測(cè)各組T24細(xì)胞TET2蛋白表達(dá)情況。利用MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)定各組T24細(xì)胞增殖情況,采用Transwell實(shí)驗(yàn)觀察各組T24細(xì)胞侵襲能力的改變。選擇SPSS22.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1.使用熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染情況,當(dāng)轉(zhuǎn)染率大于80%表示轉(zhuǎn)染成功,可進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)。2.蛋白免疫印跡:TET2-519抑制組、TET2-1417抑制組、TET2-3092抑制組TET2的蛋白表達(dá)情況對(duì)比于抑制對(duì)照組均有不同程度下降,其中TET2-519抑制組相比較于抑制對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(p0.05)。TET2過表達(dá)組TET2蛋白表達(dá)對(duì)比TET2過表達(dá)對(duì)照組升高(p0.05)。3.MTT實(shí)驗(yàn):TET2-519抑制組細(xì)胞增值率為:17.18%±2%,與抑制對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。TET2過表達(dá)組細(xì)胞抑制率為16.82%±8%,與過表達(dá)對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4.Transwell實(shí)驗(yàn):TET2-519抑制組與抑制對(duì)照組相比T24細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)(p0.05)。TET2過表達(dá)組與過表達(dá)對(duì)照組對(duì)比T24細(xì)胞侵襲能力減弱(p0.05)。結(jié)論:TET2的表達(dá)上調(diào)可以抑制T24細(xì)胞的增殖及侵襲。
【圖文】：

圖 4.1.1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染情況（200×）疫印跡法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組 T24 細(xì)胞率大于 80%細(xì)胞，提取總蛋白。使用β-actin 作直至使得各組蛋白量基本相等。白免疫印跡法檢測(cè)干預(yù) TET2 基因表達(dá)后 T24 細(xì)圖 4.2.1，4.2.2 所示：TET2-519 抑制組、TET組 3 組 T24 細(xì)胞中的 TET2 蛋白表達(dá)與抑制對(duì)照以 TET2-519 抑制組下降為顯著，（p＜0.05），制組。過表達(dá)組 T24 細(xì)胞中 TET2 的蛋白表達(dá)比較（p＜0.05）。表明上調(diào) T24 細(xì)胞內(nèi) TET2 的表達(dá)

干預(yù) TET2 對(duì) T24 細(xì)胞增殖能力的影響轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)后，使用 MTT 測(cè)定法測(cè)定細(xì)胞增殖能力。記錄 OD 值，并計(jì)算細(xì)胞增殖率。結(jié)果如圖 4.3.1 所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：TET2 過表達(dá)組出現(xiàn)負(fù)，，說明 TET2 過表達(dá)具有抑制增殖作用，TET2 過表達(dá)組抑制率為：16.82%。TET2-519 抑制組增殖率為：17.18%±2%。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R737.14

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