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長鏈非編碼RNA00704在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)和生物學(xué)功能研究

發(fā)布時間:2020-05-22 09:30
【摘要】:目的:了解長鏈非編碼RNA-00704在腎透明細(xì)胞癌癌旁組織和癌組織中的相對表達(dá)情況,同時進(jìn)一步掌握其在腎透明細(xì)胞癌中的異常表達(dá)對患者預(yù)后的影響和其對腫瘤生物學(xué)行為的影響。方法:在TCGA數(shù)據(jù)庫中,我們檢索并收集了腎癌的數(shù)據(jù)集后做初步預(yù)處理,隨后用graphpad prism軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,包括lnc RNA在腎透明細(xì)胞癌組織和正常癌旁組織表達(dá)有無差異和Lnc RNA-00704的表達(dá)情況與腎透明細(xì)胞癌臨床及病理相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系,并用log-rank方法分析Lnc RNA-00704的表達(dá)情況與患者的總生存期及無進(jìn)展生存期之間的關(guān)系,繪制Kaplan-meier生存曲線表示。收集40對腎透明細(xì)胞癌的臨床組織樣本,用qrt-PCR技術(shù)檢測其在腎透明細(xì)胞癌和癌旁組織中的相對表達(dá)情況,和收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行對比驗證;培養(yǎng)四種腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系786-O,ACHN,OS-RC-2,A498及正常腎小管上皮細(xì)胞HK-2,同樣的方法檢測檢測其相對表達(dá)水平,進(jìn)一步驗證數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)分析結(jié)果;構(gòu)建出sh RNA載體,沉默Lnc RNA-00704的表達(dá)基因,對比沉默前后腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系A(chǔ)CHN,786-O的增殖、遷移及侵襲能力,了解Lnc RNA-00704對腫瘤生物學(xué)行為的影響。結(jié)果:1.lnc RNA-00704在cc RCC中相對高表達(dá);Lnc RNA的表達(dá)水平與年齡、復(fù)發(fā)無相關(guān)性,與患者性別、cc RCC的病理分級、TNM分期和轉(zhuǎn)移具有明顯的相關(guān)性;lnc RNA-00704高表達(dá)組患者的預(yù)后劣于低表達(dá)組。2.沉默Lnc RNA-00704后,細(xì)胞功能學(xué)實驗顯示腎透明細(xì)胞癌(786-0、ACHN)的增殖、遷移及侵襲能力受到了顯著抑制。結(jié)論:1、lnc RNA-00704在腎透明細(xì)胞癌組織中相對高表達(dá),并且其在腎透明細(xì)胞癌中的相對高表達(dá)與患者的年齡、性別和復(fù)發(fā)無關(guān),但是與患者TMN分級、病理分期相關(guān)和轉(zhuǎn)移相關(guān),并且,其在腫瘤中的相對高表達(dá)與患者的預(yù)后呈明顯的負(fù)相關(guān),這提示lnc RNA-00704可能是腎透明細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展的一個促進(jìn)因素。2、當(dāng)lnc RNA-00704的表達(dá)被沉默以后,腎透明細(xì)胞癌的增殖、遷移和侵襲能力受到了明顯的抑制,這提示lnc RNA或許可以作為腎透明細(xì)胞癌靶向治療的一個靶點,為腫瘤治療新方案的探索提供依據(jù)。
【圖文】:

資料,數(shù)據(jù)庫,腎透明細(xì)胞癌,t檢驗


t檢驗分析TCGA數(shù)據(jù)庫資料,如上圖所示,lncRNA在腎透明細(xì)胞癌中相對高表

數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),腎透明細(xì)胞癌,檢驗分析,表達(dá)水平


如圖所示,分析TCGA數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),lncRNA-00704的表達(dá)水平與年齡(P=0.7768)、復(fù)發(fā)(P=0.1587)無明顯相關(guān)性
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R737.11

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