厄貝沙坦對DN大鼠腎臟miR-192表達及其腎保護作用的影響研究

發(fā)布時間：2020-05-18 06:30

【摘要】：目的:觀察厄貝沙坦對鏈脲佐菌素(STZ)誘導的糖尿病腎病(DN)大鼠腎臟miR-192、TGF-β1、Zeb1、Collagen I表達的影響,探討其治療DN的可能機制。方法:1.實驗分組及構建DN大鼠模型:將10周齡的雄性Wistar大鼠隨機分為三組:正常對照組,DN模型組,厄貝沙坦治療組。鏈脲佐菌素STZ(28mg/kg)建立DN大鼠模型。治療組每天給予厄貝沙坦50mg/kg灌胃;正常組和模型組以等量生理鹽水灌胃。2.主要檢測指標和檢測方法:于22周齡處死各組大鼠,檢測大鼠體質量、隨機血糖、24h尿白蛋白、血肌酐、尿素氮水平。大鼠腎臟組織進行HE、Masson染色,在光鏡下觀察腎組織的形態(tài)學改變。提取腎臟總miRNA,應用實時熒光定量PCR檢測miR-192在大鼠腎組織中的表達,計算其相對表達量。通過蛋白免疫印跡法、免疫組化法檢測大鼠腎組織TGF-β1、Zeb1、Collagen I蛋白的表達。結果:1.厄貝沙坦對DN大鼠腎臟損害的保護作用與正常組比較,模型組大鼠體質量、隨機血糖、血肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率顯著增高(均P0.05);與模型組比較,厄貝沙坦治療組大鼠尿白蛋白排泄率顯著降低(P0.05),厄貝沙坦治療可以改善DN大鼠的蛋白尿水平。2.腎組織病理HE、Masson染色結果正常對照組大鼠腎組織未見到糖尿病腎病的病理形態(tài)改變;DN模型組大鼠腎小球分葉狀,系膜區(qū)增寬,系膜基質增加,小管上皮細胞可見顆粒和空泡樣變性;與模型組相比,厄貝沙坦治療組大鼠腎組織病理改變有所改善。3.qRT-PCR檢測結果(1)與正常對照組相比,DN模型組miR-192 mRNA在DN大鼠腎臟的表達下調(P0.05);(2)與DN模型組相比,厄貝沙坦組miR-192mRNA表達上調(P0.05)。4.大鼠腎組織TGF-β1、ZEB1、Collagen I蛋白表達WB、免疫組化結果顯示,與正常組大鼠相比,DN模型組腎組織的TGF-β1、ZEB1、Collagen I蛋白表達量明顯增加(P0.05);與模型組相比較,厄貝沙坦治療可以減少TGF-β1、ZEB1、Collagen I蛋白的表達,具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:本研究通過實驗研究DN動物模型,提示miR-192參與了DN的發(fā)生與發(fā)展,再次證明厄貝沙坦具有治療DN和保護腎臟的作用;厄貝沙坦對DN的治療機制可能與上調miR-192的表達,減少其信號通路中TGF-β1、Zeb1的表達,從而減少Collagen I在腎組織的沉積,改善DN的纖維化狀態(tài),改善腎臟病理有關。從分子水平的層次上為厄貝沙坦運用于DN的臨床治療提供了新的實驗和理論依據(jù)。
【圖文】：