吡格列酮作用于人膀胱癌細(xì)胞及正常膀胱移行細(xì)胞后相關(guān)指標(biāo)的研究
發(fā)布時間:2020-04-10 02:25
【摘要】:目的:探討PPAR-γ激動劑吡格列酮對正常膀胱移行細(xì)胞SV-HUC-1及膀胱癌細(xì)胞5637的增殖、凋亡、侵襲、遷移能力及兩者PPAR-γ、β-catenin、AP-1表達(dá)的影響。材料和方法:培養(yǎng)后的正常膀胱移行細(xì)胞SV-HUC-1及膀胱癌細(xì)胞5637分別用吡格列酮對照組(0μM)和實(shí)驗(yàn)組(10μM,20μM,40μM)處理24h、48h和72h。MTT及流式細(xì)胞學(xué)分別檢測細(xì)胞的增殖抑制及凋亡情況。實(shí)時定量PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))檢測PPAR-γmRNA在兩種細(xì)胞中的表達(dá)情況。免疫印跡法(Western blot)檢測β-catenin、AP-1的蛋白表達(dá)情況。Transwell實(shí)驗(yàn)檢測不同濃度吡格列酮對膀胱癌細(xì)胞5637遷移及侵襲力的影響。依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果探討PPAR-γ激動劑吡格列酮對正常膀胱移行細(xì)胞和膀胱癌細(xì)胞增殖、遷移及各相關(guān)因子表達(dá)變化的影響。結(jié)果:(1)經(jīng)過PPAR-γ激動劑吡格列酮處理后的正常膀胱移行細(xì)胞SV-HUC-1于24h、48h、72h時相對于對照組增殖明顯受抑制,48h后正常膀胱移行細(xì)胞SV-HUC-1凋亡率隨著吡格列酮濃度增加而上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),膀胱癌細(xì)胞5637未見明顯變化。(2)RT-PCR檢測正常膀胱移行細(xì)胞SV-HUC-1及膀胱癌細(xì)胞5637的PPAR-γmRNA隨著吡格列酮濃度的增加其表達(dá)均相應(yīng)增加,且PPAR-γ在膀胱癌細(xì)胞5637中表達(dá)較少(P0.05)。(3)Western blot法檢測正常膀胱移行細(xì)胞SV-HUC-1中,隨著吡格列酮濃度的增加AP-1及β-catenin的蛋白表達(dá)未見明顯變化,膀胱癌細(xì)胞5637中β-catenin、AP-1較正常膀胱細(xì)胞表達(dá)水平較高,且隨著吡格列酮濃度增加有下降趨勢(P0.05)。(4)隨著吡格列酮濃度增加膀胱癌細(xì)胞的Transwell小室孔穿過的數(shù)目未見明顯變化。結(jié)論:1.PPAR-γ激動劑吡格列酮可促進(jìn)正常膀胱細(xì)胞細(xì)胞凋亡并對其增殖起抑制作用,對膀胱癌細(xì)胞無增殖抑制及凋亡作用。2.PPAR-γ在膀胱癌細(xì)胞中較正常膀胱細(xì)胞表達(dá)量少。3.AP-1、β-catenin在膀胱癌細(xì)胞中較正常膀胱細(xì)胞表達(dá)量高,PPAR-γ激動劑吡格列酮可抑制AP-1、β-catenin的表達(dá)。4.PPAR-γ激動劑吡格列酮不影響膀胱癌細(xì)胞的侵襲及遷移力。
【圖文】:
48h后不同濃度PIO處理后的正常膀胱細(xì)胞較對照組凋亡變化情況
72h后經(jīng)不同濃度PIO處理后的膀胱癌細(xì)胞及正常膀胱細(xì)胞PPAR-γmRNA表達(dá)情況
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R737.14
本文編號:2621616
【圖文】:
48h后不同濃度PIO處理后的正常膀胱細(xì)胞較對照組凋亡變化情況
72h后經(jīng)不同濃度PIO處理后的膀胱癌細(xì)胞及正常膀胱細(xì)胞PPAR-γmRNA表達(dá)情況
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R737.14
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前1條
1 許斌;華立新;;膀胱癌流行病學(xué)進(jìn)展[J];國際泌尿系統(tǒng)雜志;2007年04期
,本文編號:2621616
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