【摘要】：目的觀察腎損傷分子-1(KIM-1)對(duì)腎小管上皮細(xì)胞缺氧損傷時(shí)增殖及凋亡的影響,證實(shí)KIM-1對(duì)腎缺氧損傷的保護(hù)作用。方法以人近端腎小管上皮細(xì)胞HK-2為研究對(duì)象,用pcDNA-hKIM-1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HK-2細(xì)胞,獲得穩(wěn)定表達(dá)KIM-1的pcDNA-hKIM-1-HK2細(xì)胞株。觀察pcDNA-hKIM-1-HK2細(xì)胞(A組)和KIM-1抗體預(yù)處理pcDNA-hKIM-1-HK2細(xì)胞(C組)在缺氧損傷后細(xì)胞活力、凋亡指標(biāo)及凋亡相關(guān)信號(hào)分子表達(dá),以未轉(zhuǎn)染缺氧HK-2細(xì)胞(B組)作為對(duì)照。結(jié)果 A組細(xì)胞活力指數(shù)高于B組(0.427±0.046 vs.0.210±0.036,P0.05),細(xì)胞凋亡數(shù)量及流式細(xì)胞儀檢測(cè)的缺氧早、晚期凋亡指數(shù)明顯低于B組(P0.05)。A組細(xì)胞缺氧時(shí)磷酸化ERK、磷酸化Akt表達(dá)較C組明顯升高(P0.05)。結(jié)論 KIM-1對(duì)腎小管上皮細(xì)胞缺氧損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制與激活PI3K-Akt/PKB和ERK信號(hào)通路抑制凋亡有關(guān)。
【圖文】：

胞ＫＩＭ－１表達(dá)結(jié)果３組細(xì)胞缺氧損傷后培養(yǎng)基中可溶性ＫＩＭ－１表達(dá)檢測(cè)結(jié)果見圖１。Ａ組細(xì)胞ＫＩＭ－１濃度［（１３０．８８±２３．９２）ｎｇ／Ｌ］與Ｂ組細(xì)胞［（１９．７８±４．６０）ｎｇ／Ｌ］比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｔ＝１３．６８１，Ｐ＝０．００２），而Ｃ組細(xì)胞ＫＩＭ－１濃度［（１７．２０±３．７４）ｎｇ／Ｌ］與Ｂ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｔ＝０．４０７，Ｐ＝０．７５３）。ａ：Ｐ＜０．０５，與Ｂ組比較。圖１ＨＫ２細(xì)胞缺氧損傷后的可溶性ＫＩＭ－１濃度檢測(cè)２．２ＭＴＴ法檢測(cè)細(xì)胞活力結(jié)果３組細(xì)胞缺氧損傷后細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果見圖２。Ａ組細(xì)胞活性指數(shù)（０．４２７±０．０４６）與Ｂ組（０．２１０±０．０３６）比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｔ＝９．４２３，Ｐ＝０．０１１），而Ｃ組細(xì)胞活性指數(shù)（０．１９８±０．０１５）與Ｂ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｔ＝０．４１３，Ｐ＝０．７２０）。ａ：Ｐ＜０．０５，與Ｂ組比較。圖２ＨＫ２細(xì)胞缺氧損傷后的細(xì)胞活力檢測(cè)（ＭＴＴ法）２．４流式細(xì)胞儀細(xì)胞凋亡檢測(cè)３組細(xì)胞缺氧后流式細(xì)胞儀凋亡檢測(cè)結(jié)果見圖３。結(jié)果顯示：Ａ組細(xì)胞缺氧損傷后的早期凋亡量、晚期凋亡量及凋亡總量分別為（２．８４±０．２５）％、（５．２９±１．２７）％及（８．１３±１．４４）％，明顯低于Ｂ組ＨＫ２細(xì)胞（ｔ＝２０．２８０，７．９５８，２５．３０１；Ｐ＝０．００２，０．０１５，０．００２）。而Ｃ組細(xì)胞凋亡量［（１８．５５±６．３８１）

０．０５，與Ｂ組比較。圖１ＨＫ２細(xì)胞缺氧損傷后的可溶性ＫＩＭ－１濃度檢測(cè)２．２ＭＴＴ法檢測(cè)細(xì)胞活力結(jié)果３組細(xì)胞缺氧損傷后細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果見圖２。Ａ組細(xì)胞活性指數(shù)（０．４２７±０．０４６）與Ｂ組（０．２１０±０．０３６）比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｔ＝９．４２３，Ｐ＝０．０１１），而Ｃ組細(xì)胞活性指數(shù)（０．１９８±０．０１５）與Ｂ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｔ＝０．４１３，Ｐ＝０．７２０）。ａ：Ｐ＜０．０５，與Ｂ組比較。圖２ＨＫ２細(xì)胞缺氧損傷后的細(xì)胞活力檢測(cè)（ＭＴＴ法）２．４流式細(xì)胞儀細(xì)胞凋亡檢測(cè)３組細(xì)胞缺氧后流式細(xì)胞儀凋亡檢測(cè)結(jié)果見圖３。結(jié)果顯示：Ａ組細(xì)胞缺氧損傷后的早期凋亡量、晚期凋亡量及凋亡總量分別為（２．８４±０．２５）％、（５．２９±１．２７）％及（８．１３±１．４４）％，明顯低于Ｂ組ＨＫ２細(xì)胞（ｔ＝２０．２８０，７．９５８，，２５．３０１；Ｐ＝０．００２，０．０１５，０．００２）。而Ｃ組細(xì)胞凋亡量［（１８．５５±６．３８１）％、（２６．８４±６．６５１）％、（４５．３９±６．３７７％）］與Ｂ組細(xì)胞相似（ｔ＝３．８５１，２．８０７，４．７２５；Ｐ＝０．０６１，０．１０７，０．０５２）。Ａ：參照；Ｂ：Ａ組；Ｃ：Ｃ組；Ｄ：Ｂ組。圖３ＨＫ２細(xì)胞缺氧損傷后的凋亡檢測(cè)（流式細(xì)胞術(shù)）２．５凋亡相關(guān)信號(hào)分子表達(dá)３組細(xì)胞缺氧損傷后的凋亡相關(guān)信號(hào)分子檢測(cè)結(jié)果見圖４。３組細(xì)胞ＥＲＫ、Ａｋｔ及磷酸化ｐ３８，磷酸化ＪＮＫ
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所泌尿外科;
【基金】：第三軍醫(yī)大學(xué)青年人才創(chuàng)新基金資助(2010XQN30)
【分類號(hào)】：R692

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2521699