【摘要】：研究背景活性氧(reactive oxygen species, ROS)可引起精子線粒體損傷,使ATP生成降低,而導(dǎo)致精子活力下降,其造成精子活力下降的機(jī)制：一,ROS可引起線粒體膜脂質(zhì)過氧化損傷,使線粒體內(nèi)與ATP生成相關(guān)的酶活性改變,影響能量產(chǎn)生；二,ROS可造成線粒體脫落,數(shù)量減少,進(jìn)而使能量合成相應(yīng)降低；三,ROS可使mtDNA發(fā)生損傷,mtDNA突變將破壞其編碼蛋白的合成,而這些蛋白是線粒體氧化磷酸化所必需的；四,ROS可誘導(dǎo)線粒體內(nèi)Ca2+的釋放,從而降低線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential, MMP)并增加線粒體內(nèi)膜通透性,進(jìn)而導(dǎo)致膜損傷,抑制線粒體合成三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)；五,精子活力依賴于線粒體功能的完整性,磷脂是線粒體鞘的重要組成部分,一旦磷脂中的脂肪酸被活性氧氧化,精子活力將被損害�？寡趸委熓轻槍τ谔匕l(fā)性男性不育癥的一種常用的經(jīng)驗性治療方法。盡管一些研究認(rèn)為,抗氧化藥物如維生素C、維生素E、左卡尼丁、谷胱甘肽等治療特發(fā)性男性不育癥是沒有臨床療效的或者這種療效仍然值得商榷。但是近期ROSS等作了薈萃分析,分析了17個臨床實驗,其中包括1655個實驗對象,目標(biāo)人群均為特發(fā)性不育男性,干預(yù)條件為抗氧化藥物治療,治療周期為3到6個月不等,其中82%的實驗結(jié)果為精液質(zhì)量得到改善,其中63%的實驗表現(xiàn)為精子活力的改善,33%的實驗結(jié)果表現(xiàn)為精子濃度的改善,而只有17%的實驗的結(jié)果表現(xiàn)為精子形態(tài)的改善。線粒體包含兩層質(zhì)膜,外層質(zhì)膜能夠允許大量電子流向內(nèi)膜空間,高度內(nèi)陷的內(nèi)膜具有很大的面積可以供應(yīng)線粒體氧化磷酸化,在氧化磷酸化過程中,質(zhì)子從線粒體內(nèi)泵向線粒體外,形成電化學(xué)梯度,稱之為MMP。MMP是精子功能完整性的重要標(biāo)志之一,正常的MMP也是線粒體產(chǎn)生ATP的一個重要前提條件,有文獻(xiàn)表明,弱精子癥患者的精液中線粒體功能被破壞的精子的比例較正常人高；有學(xué)者通過用H202與精子孵育,人工誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,可以降低精子活力和MMP,降低精子線粒體ATP的產(chǎn)生,表明過度的氧化應(yīng)激對線粒體功能或MMP是有害的。另有學(xué)者表明,精子中ATP的含量越多,其精子活力也越高。Ferramosca研究表明,高水平的ROS可以解耦連線粒體的氧化磷酸化和ATP的合成,這也許是高水平ROS可以降低精子活力的一個原因。他莫昔芬(tamoxifen, TAM)是選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(selective estrogen receptor modulators, SERMs)的一種,目前在泌尿外科和男科中常被作為一種經(jīng)驗性治療藥物用于治療特發(fā)性男性不育癥。目前已知TAM治療特發(fā)性男性不育癥的藥理機(jī)制是：一,他莫昔芬具有抗雌激素作用,可抑制下丘腦、垂體的雌激素受體,阻止正常的“反饋性抑制”,促使促性腺激素釋放激素(gonadotropin-releasing hormone, GnRH)和卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)和黃體生成素(luteinizing hormone, L H)從垂體釋放出來,從而促進(jìn)精子生成；二,TAM可增加Leydig細(xì)胞對LH的敏感性,促進(jìn)Leydig細(xì)胞產(chǎn)生睪酮(testosterone, T),再作用于生精細(xì)胞,促進(jìn)生精細(xì)胞產(chǎn)生精子；三,TAM可干預(yù)外源性雌激素對男性患者的毒副作用,研究證明不育癥患者較正常男性.精液中有更高的外源性雌激素。有文獻(xiàn)表明,服用TAM治療后,可以使精子濃度升高,但是對精子活力和精子形態(tài)并無改善作用,但有薈萃分析表明,TAM治療可以提高精子活力。關(guān)于TAM是否能夠改善精子活力,目前還未能得到醫(yī)學(xué)界的一致肯定。然而目前已有一些文獻(xiàn)表明,TAM具有一定的抗氧化作用,所以我們猜想TAM可以通過抗氧化作用改善線粒體功能,從而為精子運(yùn)動提供更多的能量。Barkay等發(fā)現(xiàn),非甾體抗炎藥可以提高精漿中卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、黃體生成素(luteinizing hormone, LH)、環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)的水平,這有助于生精小管上皮的發(fā)育,可以提高精子濃度和活力；1995年,有研究表明,吲哚美辛治療特發(fā)性不育癥,可以顯著改善精子活力,這可能是由于它阻礙前列腺素的對生精功能的毒副作用,同時它提高精液中cAMP水平,這反過來可以改善精子活力和生育能力�？紤]到吲哚美辛不具有抗氧化性,并且過往常常被男科醫(yī)生將它作為經(jīng)驗性藥物用于治療特發(fā)性不育癥,本研究將吲哚美辛用作臨床對照組的治療藥物�？紤]到倫理因素和給患者提高有效治療的義務(wù),我們沒有使用安慰劑作為對照。目的1.探索他莫昔芬治療少弱精子癥患者過程中對精子質(zhì)量,特別是精子活力的影響。2.探索他莫昔芬在治療少弱精子癥患者過程中對患者血清及精液氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響。3.探索他莫昔芬在治療少弱精子癥患者過程中對精子線粒體功能的影響。方法研究對象為2014年4月——2015年1月就診于我院生殖醫(yī)學(xué)中心門診的120例少弱精子癥患者,本實驗采用前瞻性、隨機(jī)、臨床對照、試驗性研究,120例少弱精子癥患者隨機(jī)分為實驗組,口服TAM治療3個月(lOmg, bid);和臨床對照組,口服吲哚美辛治療3個月(25mg, bid)。觀察TAM治療特發(fā)性少弱精子癥的臨床療效,用分光光度比色法在治療前后檢測血清及精漿中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、總抗氧化能力(total antioxidant capacity, TAC)、線粒體琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase, SDH)的變化；采用生物熒光發(fā)光法檢測在治療前后檢測精子ATP含量的變化；采用流式細(xì)胞技術(shù)在治療前后檢測精子MMP和精子細(xì)胞內(nèi)ROS水平的變化。結(jié)果1.一般情況在治療期間,14個患者因為各自不同的原因退出了實驗,5個患者要求轉(zhuǎn)為IVF治療,5個患者失訪。剩余96個患者完成了3個月的隨訪,并納入進(jìn)行實驗分析,其中41名為服用吲哚美辛的臨床對照組,55名為服用TAM的實驗組；就診于我院生殖中心門診的男性不育患者,年齡20--40歲,不育病史在1-10年,臨床對照組年齡(28.41±4.62)歲,病程(4.79±1.95)年,研究組年齡(27.88-3.38)歲,病程(4.65±2.10)年,2組一般資料相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),具有可比性。2.用藥前后精液參數(shù)的變化用藥前,臨床對照組、研究組之間在精液參數(shù)方面無顯著性差異(P0.05)。用藥治療3個月后,臨床對照組前向活率從(21.53±5.20)%升高到(24.78±5.86)%,P0.05,精子總活率從(31.48±8.31)%升高到(36.78±10.47)%,P0.05；研究組精精子總數(shù)從(29.68±9.13)×106 spz升高到(41.27±8.33)×106spz, P0.001,精子濃度從(10.34±2.13)×106 spz/ml升高到(14.67+3.92)×106spz/ml,,P0.001,前向活率從(19.17±7.17)%升高到(24.73±6.53)%,,P0.001,精子總活率從(30.67±7.53)%升高到(35.72±10.20)%,P0.01。兩組間比較,用藥后,研究組精子總數(shù)和精子濃度與臨床對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(41,27±8.33)×106 spz vs. (32.90±8.48)×106 spz, P0.001; (14.67±3.92)×106 spz/ml vs.(10.76±3.07)×106 spz/ml,P0.001]。3.用藥前后血清及精液中氧化應(yīng)激指標(biāo)的變化用藥前,臨床對照組、試驗組之間血清和精漿MDA、血清和精漿TAC及精子ROS無顯著性差異(P0.05)。用藥后,臨床對照組的血清MDA和精漿MDA、血清TAC和精漿TAC及精子ROS無顯著性變化(P0.05)；研究組血清TAC和精漿TAC較用用藥前有明顯提高[(8.14±3.01)×U/ml vs. (12.31±2.89)×U/ml,P0.001; (11.74±3.57)×U/ml vs. (15.47±3.88)×U/ml, P0.001],精子ROS含量明顯下降[(3.27±1.08)% vs.(2.27±0.95)%,P0.001]；兩組間比較,用藥后,研究組血清TAC和精漿TAC較臨床對照組提高明顯[(12.31±2.89×U/ml vs. (8.75±2.63)×U/ml, P0.001; (15.39±4.21)×U/ml vs.(12.12±4.07)×U/ml,P0.05],精子ROS含量較臨床對照組下降明顯[(2.27±20.95)%vs.(2.85±0.96)%,P0.05]。4用藥前后精子線粒體SDH活性的變化用藥前,臨床對照組、試驗組之間精子線粒體SDH活性無顯著性差異(P0.05)。用藥后,臨床對照組精子線粒體SDH活性無明顯改善(P0.05),研究組精子線粒體SDH活性有明顯升高[(5.92±1.51)×U/106 spz vs. (6.66±1.61)×U/106 spz,P0.05]。兩組間對比,用藥后,研究組較對照組有明顯升高[(6.66±1.61)×U/106 spz vs.(5.70±1.49)xU/106 spz,P0.05]。5.用藥前后精子ATP含量的變化用藥前,臨床對照組、試驗組之間精子ATP含量無顯著性差異(P0.05)。用藥后,臨床對照組精子ATP含量有明顯改善[(68.37±12.02)×pmol/106 spz vs. (77.81±14.08)×pmol/106 spz, P0.001],研究組精子ATP有明顯改善[(69.37±14.78)×pmol/106 spz vs. (81.44±11.77)xpmol/106 spz,P0.001];兩組間比較,用藥后,精子ATP含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.用藥前后精子MMP的變化流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)果顯示,用藥前,臨床對照組、試驗組之間精子MMP無顯著性差異(P0.05)。用藥后,臨床對照組精子MMP有明顯改善[(34.84±5.60)%vs.(40.88±8.34)%,P0.001],研究組精子MMP有明顯改善[(36.00±6.17)%vs.(42.53±5.99)%,P0.001]；兩組間比較,用藥后,精子MMP差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論TAM不僅可以通過內(nèi)分泌相關(guān)機(jī)制提高精子濃度,而且還可以通過抗氧化作用改善精子線粒體的功能,使線粒體ATP生成增加,進(jìn)而提高精子活力。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R698.2

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 王慧蘭;徐霞;鄭志群;;二甲雙胍對多囊卵巢綜合征大鼠的排卵及對卵巢中IL-6、TNF-α表達(dá)的影響[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2013年05期

2 何涓;宋鑫;;雌激素與非小細(xì)胞肺癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中國肺癌雜志;2015年05期

3 郭里;周經(jīng)委;姚兵;;選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑抗氧化作用的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2015年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 陳誠;PCOS不孕患者行IVF的治療結(jié)局的研究[D];浙江大學(xué);2015年

2 譚楨;新橙皮苷對RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞分化和去卵巢小鼠骨質(zhì)疏松的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前4條

1 史夢倩;多囊卵巢綜合征中高雄激素血癥的鑒別診斷及處理[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

2 周健;性激素與原發(fā)性尿路結(jié)石形成關(guān)系的研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2014年

3 周沛然;1、SOST基因和DKK1基因多態(tài)性與阿侖膦酸鈉治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥療效的關(guān)聯(lián)研究 2、Bruck綜合征、腎上腺腦白質(zhì)營養(yǎng)不良基因突變研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

4 王慧蘭;核因子κB、TNF-a、IL-6在PCOS大鼠模型中的表達(dá)及二甲雙胍的干預(yù)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

，

本文編號：2417223