本文選題：蛋白結(jié)合毒素 + 硫酸吲哚酚　； 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年09期

【摘要】：目的研究蛋白結(jié)合硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)對(duì)單核細(xì)胞趨化功能的影響及其可能機(jī)制。方法以4%人血白蛋白(human serum albumin,HSA)結(jié)合游離的IS制備蛋白結(jié)合IS,高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)其蛋白結(jié)合率。CCK-8法檢測(cè)人單核細(xì)胞(THP-1)經(jīng)不同濃度的游離IS和蛋白結(jié)合IS分別作用24 h后細(xì)胞增殖能力的變化。200μmol/L游離IS和蛋白結(jié)合IS分別孵育THP-1細(xì)胞24 h后,Transwell小室法檢測(cè)THP-1細(xì)胞趨化能力;ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)濃度;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)THP-1細(xì)胞上CC類趨化因子受體2(CCR2)的表達(dá)水平。結(jié)果成功制備蛋白結(jié)合IS,其蛋白結(jié)合率約為90%;蛋白結(jié)合IS和游離IS均可抑制THP-1細(xì)胞增殖,且蛋白結(jié)合IS對(duì)THP-1細(xì)胞的增殖抑制作用具有濃度依賴性(P0.05);蛋白結(jié)合IS和游離IS均可增強(qiáng)THP-1細(xì)胞的趨化活性(P0.05);蛋白結(jié)合IS和游離IS均可使THP-1細(xì)胞的MCP-1和CCR2表達(dá)上調(diào)(P0.05)。結(jié)論蛋白結(jié)合IS同游離IS一樣,可通過(guò)上調(diào)MCP-1及CCR2的表達(dá)增強(qiáng)單核細(xì)胞的趨化功能。
[Abstract]:Objective to study the effect of protein binding indoxyl sulfate (indoxyl sulfate) on the chemotaxis of monocytes and its possible mechanism. Methods Human serum albumin (HSA) combined with free is protein was used to bind ISs. The protein binding rate of HPLCwas determined by HPLC. CCK-8 was used to detect the binding rate of human monocytes to different concentrations of free is and protein-binding is. After 24 h incubation of THP-1 cells with 200 渭 mol/L free is and protein binding is, the chemotaxis of THP-1 cells was detected by transwell chamber assay and the concentration of monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the supernatant was detected by Elisa. The expression of CCR2 on THP-1 cells was detected by flow cytometry. Results the protein binding rate was about 90%, and both protein binding is and free is could inhibit the proliferation of THP-1 cells. The inhibitory effect of protein-binding is on the proliferation of THP-1 cells was concentration-dependent, protein-binding is and free is could enhance the chemotaxis activity of THP-1 cells, and protein binding is and free is could up-regulate the expression of MCP-1 and CCR2 in THP-1 cells. Conclusion protein binding is can enhance the chemotaxis function of monocytes by up-regulating the expression of MCP-1 and CCR2.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院腎內(nèi)科;
【分類號(hào)】：R692

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本文編號(hào)：1988443