本文選題：男性不育 + 精液��； 參考：《蘇州大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的：檢測精液中B7-H3的含量及其與精液參數(shù)之間的關系，及其對人類精子功能的影響。 方法：實驗共分三部分 1.選擇83例正常有生育能力的健康男性（年齡22-37歲）和176例不育癥（maleinfertiliy）患者（21-38歲），用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測精液中B7-H3的含量，用計算機輔助精液分析（Computer-assisted semenanalysis，CASA）檢測精液參數(shù)，并分析它們的相關性。 2.用流式細胞術（flow cytometry，F(xiàn)CM）和熒光顯微鏡兩種方法檢測精子表面是否存在B7-H3受體及其分布情況。 3.在體外通過用不同濃度的B7-H3與精子共孵育0-4小時后，運用CASA和異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標記的豌豆凝集素（Pisum sativumagglutinin，，PSA）熒光染色法檢測精子活力、精子獲能及精子頂體反應，觀察B7-H3對人類精子功能的影響。 結果： 1.健康人和不育癥患者血清B7-H3含量檢測結果分別為4.53±1.12ng/ml和4.49±1.92ng/ml，兩組之間差異無統(tǒng)計學意義(P=0.962)。但是，健康人精漿B7-H3的含量(16.67±7.71ng/ml)明顯高于不育癥患者的B7-H3的含量(7.79±4.27ng/ml,P0.0001)。我們進一步分析了所有標本B7-H3的含量和精液參數(shù)之間的關系。精子前向運動正常的精液標本的B7-H3的含量(11.53±6.36ng/ml)明顯高于那些精子前向運動降低的精液標本(5.52±3.39ng/ml，P0.0001)。此外B7-H3的含量還和精子的曲線速率(r=0.394, P=0.011)，直線速率(r=0.542, P=0.002)，平均路徑速率(r=0.498,P=0.003)成正相關關系。精子密度正常標本的B7-H3的含量(10.72±6.44ng/ml)明顯高于精子密度偏低的精液標本的B7-H3的含量(6.18±4.03ng/ml，P=0.0007)。 2.為了探索精漿B7-H3是否存在調(diào)節(jié)精子功能的可能性，我們檢測人類精子表面是否存在B7-H3受體。結果我們在健康人和不育癥患者精子表面均檢測到了B7-H3受體。并且在這幾類人的精子中B7-H3受體的表達率并無顯著統(tǒng)計學差異(P=0.976)。而受體分布主要集中在精子頂體后區(qū)，頸部，和中部。 3.將精子和不同濃度的B7-H3(0,5,10,25ng/ml)在CO2培養(yǎng)箱中共孵育4小時。用CASA系統(tǒng)在不同時間點檢測前向運動精子的百分率。孵育2小時后，與10ng/mlB7-H3孵育的弱精子癥患者精子活力的百分率由0小時時的精子活力(26.05±5.39%)增加到33.45±6.91%，增加有統(tǒng)計學意義(P=0.008)。與5ng/ml B7-H3孵育4小時后，健康人精子活力的百分率由70.35±11.71%增加到70.71±11.41%(P=0.872)，差異無統(tǒng)計學意義。同樣，與10ng/ml B7-H3孵育4小時的弱精子癥患者精子活力的百分率增加到45.76±8.72%(P=0.001)。與10ng/ml B7-H3孵育4小時的健康人的精子活力增加到75.46±8.77%，差異無統(tǒng)計學意義(P=0.087)。用10ng/ml B7-H3孵育的弱精子癥患者的精子活力比5ng/ml B7-H3孵育的弱精子癥患者的精子活力明顯升高(P=0.011)，這表明B7-H3能夠提高精子前向運動的百分率，并存在時間和劑量依賴關系。但是，用10ng/ml和25ng/ml B7-H3處理的弱精子癥患者的精子活力變化無統(tǒng)計學意義(P=0.897)。此外，B7-H3對精子的獲能及頂體反應無顯著影響。 結論：B7-H3能夠提高人類精子的活力，但對精子獲能及頂體反應無影響。
[Abstract]:Objective: to detect the content of B7-H3 in semen and its relationship with semen parameters and its effect on human sperm function.
Methods: the experiment was divided into three parts
1. 83 healthy male healthy men (age 22-37 years old) and 176 cases of maleinfertiliy (21-38 years old) were selected to detect the content of B7-H3 in semen by enzyme linked immunosorbent assay (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA), and the semen parameters were detected by computer assisted semen analysis (Computer-assisted semenanalysis, CASA). Count, and analyze their correlation.
2. to detect the presence of B7-H3 receptor on sperm surface and its distribution by two methods: flow cytometry (FCM) and fluorescence microscopy.
3. after incubating with different concentrations of B7-H3 and sperm for 0-4 hours in vitro, CASA and fluorescein isothiocyanate (FITC) labeled pea lectin (Pisum sativumagglutinin, PSA) fluorescein staining was used to detect sperm motility, sperm capacitation and acrosome reaction of sperm, and the effect of B7-H3 on human sperm function was observed. Ringing.
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本文編號：1931902