IgA腎病(IgAN)是全世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的腎小球腎炎,是引起腎衰竭的重要病因。IgAN臨床表現(xiàn)多樣,其發(fā)病機(jī)制至今仍不完全清楚。半乳糖缺失的糖基化IgA1(Gd-IgA1)是唯一能與Ig G或IgA1結(jié)合形成免疫復(fù)合物的成分。Gd-IgA1可以自身積聚或與Ig G或抗Gd-IgA1的抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物沉積在腎小球系膜區(qū)。這些沉積的免疫復(fù)合物可以活化系膜細(xì)胞,促進(jìn)其增殖和分泌細(xì)胞外基質(zhì),釋放細(xì)胞因子和炎癥趨化因子,從而引起腎臟損傷。因此,含有Gd-IgA1的免疫復(fù)合物形成是IgAN發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵因素之一。IgA1的糖基化修飾與半乳糖基轉(zhuǎn)移酶(C1Gal T1)和唾液酸轉(zhuǎn)移酶(ST6GALNAC2)密切相關(guān)。IgAN是由多基因和環(huán)境因素共同發(fā)揮作用的復(fù)雜性疾病。表觀遺傳學(xué)通過(guò)調(diào)節(jié)基因和環(huán)境的相互作用從而影響著人類的疾病。組蛋白乙酰化修飾是最早發(fā)現(xiàn)的組蛋白修飾方式,其在IgAN的發(fā)病機(jī)制中的作用尚不清楚。本課題擬通過(guò)體內(nèi)及體外研究探討IgA1糖基化異常及組蛋白乙�；揎棶惓Ｔ贗gAN發(fā)病過(guò)程中的作用。研究發(fā)現(xiàn)IgAN組較健康對(duì)照組血漿IgA和Gd-IgA1水平均顯著升高(均P0.0001)。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn):IgAN患者血漿Gd-IgA1水平與24h尿蛋白定量呈正相關(guān)(r=0.479,P0.001)。IgAN組外周單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)C1GALT1 m RNA的表達(dá)量是健康對(duì)照組的0.38±0.07倍(P0.01),ST6GALNAC2的m RNA表達(dá)量是健康對(duì)照組的2.31±0.48倍(P0.05)。與健康對(duì)照組比較,IgAN組外周血PBMC的組蛋白H3乙酰化水平顯著升高(P0.05),H4乙�；斤@著升高(P0.01)。IgAN組PBMC的組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶P300、CREBBP m RNA的表達(dá)明顯升高,分別是健康對(duì)照組的2.81±0.39倍和2.44±0.27倍(均P0.01);組蛋白去乙�；窰DAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC7和HDAC8 m RNA的表達(dá)量分別是健康對(duì)照組的2.20±0.18倍(P0.001)、0.44±0.08倍(P0.05)、0.98±0.18倍(P0.05)、1.02±0.21倍(P0.05)和1.47±0.25倍(P0.05)。IgAN患者PBMC中C1GALT1基因啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H3、H4乙酰化程度較健康對(duì)照組顯著降低,分別為健康對(duì)照組的0.43±0.20倍(P0.05)和0.62±0.11倍(P0.01);ST6GALNAC2基因啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H3、H4乙酰化程度均顯著升高,分別為健康對(duì)照組3.42±1.32倍(P0.05)和2.07±0.29倍(P0.05)。腎臟組織免疫熒光顯示:IgAN患者腎組織中HDAC1明顯上調(diào)而H3Ac蛋白顯著減少,呈低乙酰化狀態(tài)。體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn):IgAN患者血漿中的MCP-1、TNF-α(均P0.01)蛋白表達(dá)水平升高。IgAN患者PBMC的MCP-1,TNF-α,NF-κB,IL-1β和IL-6的m RNA表達(dá)均顯著升高,分別為健康對(duì)照組的3.52±0.89倍(P0.05)、4.16±0.55倍(P0.001)、1.80±0.35倍(P0.05)、1.41±0.49(P0.05)和2.56±0.22倍(P0.01)。進(jìn)一步應(yīng)用人炎癥因子蛋白芯片觀察不同IgA1[健康對(duì)照者來(lái)源的單體IgA1(N-IgA1)、健康對(duì)照者來(lái)源的聚合體IgA1(N-a IgA1)、IgAN患者來(lái)源的單體IgA1(P-IgA1)和IgAN患者來(lái)源的聚合體IgA1(P-a IgA1)]及PBS對(duì)照組(control組,即加入同體積的0.01mol/L PBS)對(duì)體外培養(yǎng)的人系膜細(xì)胞(HMC)炎癥因子表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):P-a IgA1組細(xì)胞上清液IL-6s R、TNF-α、RANTES、TIMP-1、TIMP-2和TNF RII顯著上調(diào);P-a IgA1能夠顯著促進(jìn)HMC的增殖。應(yīng)用Western blot法發(fā)現(xiàn)不同IgA1均可上調(diào)HMC HDAC1蛋白表達(dá),尤以P-a IgA1組最為明顯。用HDAC1抑制劑丙戊酸鈉(VPA)干預(yù)可以減少上述炎癥因子的表達(dá),抑制P-a IgA1引起的HMC的增殖。研究發(fā)現(xiàn)P-a IgA1能夠顯著促進(jìn)HMC合成細(xì)胞外基質(zhì),上調(diào)纖溶酶原激活物抑制劑(PAI-1)的表達(dá);VPA能夠下調(diào)HDAC1的表達(dá),上調(diào)H3Ac的表達(dá),提高系膜細(xì)胞乙�；�,顯著減少細(xì)胞外基質(zhì)的合成,上述研究結(jié)果顯示IgAN患者存在組蛋白乙酰化修飾異常;組蛋白乙�；揎梾⑴c了IgA1糖基化過(guò)程;P-a IgA1作用于系膜細(xì)胞具有促炎癥和促纖維化作用,而HDAC的抑制劑VPA可以抑制P-a IgA1刺激系膜細(xì)胞所產(chǎn)生的炎癥和促纖維化作用。該研究結(jié)果豐富了IgAN的發(fā)病機(jī)制,可為IgAN的治療提供新的思路。



本文編號(hào)：1607015