本文關(guān)鍵詞： 高鈣尿 高遷移率族蛋白-1 白介素-6 損傷　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:觀察不同濃度鈣離子刺激下人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)表達(dá)白介素-6(IL-6)和高遷移率族蛋白-1(HMGB1)的水平。方法:在體外培養(yǎng)HK-2。在DMEM-F12培養(yǎng)基中加入可溶的二水氯化鈣晶體(CaCl2·2H2O),配成不同濃度氯化鈣溶液(2.5 mM,5 mM,10mM)作為藥物組,刺激HK-2細(xì)胞6小時(shí)。實(shí)驗(yàn)分四個(gè)組:a.正常對照組(無血清DMEM-F12培養(yǎng)基);b.鈣離子I組(2.5 mM CaCl2+DMEM-F12培養(yǎng)基);c.鈣離子II組(5 mM Ca Cl2+DMEM-F12培養(yǎng)基);d.鈣離子III組(10 mM CaCl2+DMEM-F12培養(yǎng)基)。共同孵育6小時(shí)后,分別采用CCK-8試劑法檢測細(xì)胞增殖情況,微板法測定各組細(xì)胞上清液中LDH活性,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Elisa)檢測各組細(xì)胞上清液中白介素-6的含量,Western blot法檢測人腎小管上皮細(xì)胞中HMGB1的表達(dá)情況。結(jié)果:CCK-8法在酶標(biāo)儀(450nm處)測定a組、b組、c組、d組的OD值分別為1.111±0.063、1.020±0.048、0.981±0.076、0.856±0.075,其中b組、c組、d組OD值分別與a組OD值相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);d組OD值分別與b組、c組OD值相比差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);而b組和c組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。微板法測定a組、b組、c組、d組細(xì)胞上清液中LDH活性分別是(28.79±11.12)U/L、(50.93±11.72)U/L、(75.61±12.30)U/L、(211.32±10.40)U/L。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,b組、c組、d組分別與a組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);d組分別與b組、c組相比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.01);b組和c組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。Elisa結(jié)果提示,白介素-6在a組、b組、c組、d組上清液白介素-6含量分別為(299.92±14.13)pg/ml、(421.63±20.56)pg/ml、(439.23±14.95)pg/ml、(464.77±24.95)pg/ml。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,b組、c組、d組分別與a組(對照組)比較均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.01);d組與b組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);c組與d組、b組分別比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。Western blot檢測發(fā)現(xiàn),HMGB1蛋白在b、c、d組的相對表達(dá)量明顯高于a組,相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);c組、d組分別與b組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.01);d組和c組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。結(jié)論:在高鈣離子刺激下,HK-2高表達(dá)IL-6和HMGB1,伴細(xì)胞損傷出現(xiàn)。這些炎性因子可能參與了腎結(jié)石的形成過程。
[Abstract]:Objective : To observe the levels of interleukin - 6 ( IL - 6 ) and high - mobility group protein - 1 in human renal tubular epithelial cells ( HK - 2 ) stimulated by different concentrations of calcium ions . Methods : To culture HK - 2 cells in vitro . Results : The levels of LDH in the supernatant of group A , b , c and d were ( 28.79 鹵 11.12 ) U / L , ( 75.61 鹵 12.30 ) U / L , ( 244.77 鹵 14.95 ) pg / ml , ( 244.77 鹵 14.95 ) pg / ml , ( 249.23 鹵 14.95 ) pg / ml , ( 244.77 鹵 10.40 ) U / L , respectively .

【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R692.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 王揚(yáng);黎承楊;孫春;鄧耀良;曾國華;王翔;陶芝偉;關(guān)曉峰;;高鈣離子誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)MCP-1和HMGB1[J];中國病理生理雜志;2016年04期

2 嚴(yán)一杰;黎承楊;鄧耀良;曾國華;陶芝偉;劉云龍;孫春;王揚(yáng);;體外誘導(dǎo)人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞成骨分化[J];中國病理生理雜志;2015年12期

3 陶芝偉;鄧耀良;;巨噬細(xì)胞在腎鈣化斑介導(dǎo)草酸鈣結(jié)石形成中的調(diào)控作用研究進(jìn)展[J];中華泌尿外科雜志;2015年10期

4 黎承楊;鄧耀良;;特發(fā)性高鈣尿癥的研究現(xiàn)狀[J];國際泌尿系統(tǒng)雜志;2007年03期

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本文編號：1501206