本文關(guān)鍵詞：腎草酸鈣及尿酸結(jié)石基質(zhì)蛋白的質(zhì)譜鑒定與分析

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【摘要】：目的:初步探討不同腎結(jié)石內(nèi)的蛋白質(zhì)組成差異,為后續(xù)進(jìn)一步探索結(jié)石內(nèi)蛋白質(zhì)在結(jié)石形成中的作用及其相關(guān)分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:收集2013年6月至2014年12月我院通過輸尿管鏡、經(jīng)皮腎鏡和腹腔鏡等手術(shù)方式取石術(shù)后臨床上尿路結(jié)石標(biāo)本共150例。經(jīng)三蒸水清洗20次、超凈工作臺晾干結(jié)石、充分碾磨結(jié)石標(biāo)本后,取微量(約500ug)結(jié)石粉末,采用結(jié)石紅外光譜分析儀分析結(jié)石組成成分;同時取1g結(jié)石粉末,加5ml RIPA蛋白裂解液溶解蛋白,經(jīng)冷凍干燥濃縮蛋白,通過凝膠電泳技術(shù)對樣品蛋白質(zhì)進(jìn)行分離及純化,并采用考馬斯亮藍(lán)染色鑒別蛋白分子量大小;通過膠內(nèi)酶解后再抽提出肽段,經(jīng)液相色譜電離串聯(lián)質(zhì)譜(LC-ESI-MS/MS)技術(shù)鑒定蛋白質(zhì)成份,并對質(zhì)譜結(jié)果進(jìn)行GO、Pathway初步的生物信息學(xué)分析。結(jié)果:1、在150例上尿路結(jié)石中,其中草酸鈣結(jié)石33例,尿酸結(jié)石12例,草酸鈣合并碳酸鈣結(jié)石66例,草酸鈣合并尿酸結(jié)石19例,草酸鈣合并磷酸鈣20例。2、SDS-PAGE電泳結(jié)果表:33例草酸鈣結(jié)石內(nèi)蛋白有3至4條蛋白帶,主要集中70-100KD,17-26 KD;12尿酸結(jié)石內(nèi)的蛋白質(zhì)有5-6條蛋白帶,主要集中70-100KD,30-40 KD,17-26 KD。3、蛋白質(zhì)譜結(jié)果:草酸鈣結(jié)石內(nèi)有88種蛋白,尿酸結(jié)石內(nèi)有283種蛋白;GO分析、pathway結(jié)果表明:結(jié)石內(nèi)以結(jié)合功蛋白為主,占草酸鈣結(jié)石蛋白總數(shù)的45.8%,占尿酸結(jié)石蛋白總數(shù)的44.34%。其中以S100A8、S100A9、纖維連接蛋白、角蛋白等炎癥相關(guān)蛋白最具功能研究意義。結(jié)論:1、不同結(jié)石成份,結(jié)石內(nèi)蛋白質(zhì)組成及含量不同。2、相同結(jié)石成份,結(jié)石內(nèi)蛋白質(zhì)組成及含量略有差異。3、草酸鈣結(jié)石內(nèi)有88種蛋白,尿酸結(jié)石內(nèi)含有283種蛋白
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R691.4

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：1274998