發(fā)布時間：2017-09-21 18:47

  本文關(guān)鍵詞：電針對高血壓前期大鼠T淋巴細胞亞群及TLR4信號通路影響的研究

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【摘要】：目的:本實驗通過8%NACL高鹽飼養(yǎng)建立大鼠高血壓前期模型,然后電針刺激DAHL鹽敏感大鼠“足三里”、“曲池”穴,觀察DAHL鹽敏感大鼠血壓、外周血中CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞百分比及脾臟巨噬細胞中TLR4信號通路中TOLL樣受體4(TOLL-LIKE RECEPTOR 4,TLR4)、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TNF-RECEPTOR ASSOCIATION FACTOR6,TRAF-6)、轉(zhuǎn)錄激活因子蛋白1(ACTIVATOR PROTEIN-1,AP-1)M RNA的表達,評價針刺調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)對低度炎癥反應(yīng)高血壓前期血壓的影響,并進一步探討針刺“足三里”、“曲池”穴的降壓機制及高血壓前期與機體免疫功能低下的關(guān)系。材料與方法:10只7周齡雄性DAHL鹽抵抗大鼠(DAHL SALT RESISTANT RATS,DR)設(shè)為正常對照組;將30只7周齡雄性DAHL鹽敏感大鼠(DAHL SALT SENSITIVE RATS,DS)采用隨機數(shù)字表法分為3組,每組10只,分別是模型組(每日僅捆綁15MIN)、針刺組(捆綁大鼠后針刺雙側(cè)“曲池”穴、“足三里”穴3-5MM,采用疏密波,頻率2HZ,電針刺激20MIN,以針柄輕微微震顫為適中,每日1次,每周6次)、非經(jīng)非穴組(捆綁大鼠后針刺雙側(cè)“足三里旁開1-2MM”、“上臂內(nèi)前緣三角肌和二頭肌交接處”3-5MM,采用疏密波,頻率2HZ,電針刺激20MIN,以針柄輕微微震顫為適中,每日1次,每周6次)。首先8%NACL高鹽飼養(yǎng)并采用智能無創(chuàng)血壓計每天監(jiān)測大鼠血壓,1周后升高至高血壓前期水平。停止高鹽改為普通飼料飼養(yǎng),連續(xù)電針治療4周,并用智能無創(chuàng)血壓計每周測量大鼠血壓,觀察四組大鼠尾動脈收縮壓,當(dāng)血壓降至正常水平時,停止針刺。治療結(jié)束后進行取材,收集各組大鼠血液2ML,抽入含有乙二酸四乙酸(ETHYLENEDIAMINETETRAACETIC ACID DISODIUM SALT,EDTA)的抗凝采血管中,上下顛倒8-10次,6小時內(nèi)采用流式技術(shù)上機處理;另采用10%水合氯醛腹腔麻醉(3ML/KG體重)大鼠并將其捆綁,并用0.5%碘伏涂抹,用剪刀劃開皮膚,剪開腹膜并充分暴露脾臟,取脾臟組織約50MG加入1M L TRIZOL試劑于EP管內(nèi),于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?提取脾組織總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后分別加入相應(yīng)引物,擴增大鼠TLR4、TRAF-6及AP-1基因,內(nèi)參設(shè)為β-ACTIN。用實時定量PCR方法檢測脾臟中TLR4、TRAF-6、AP-1M RNA的表達。數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析,組間兩兩比較采用LSD法分析,結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,P0.05被認(rèn)為有顯著性差異。結(jié)果:1針刺對DAHL鹽敏感大鼠尾動脈收縮壓的影響觀察發(fā)現(xiàn)針刺治療前,模型組、針刺組、非經(jīng)非穴組大鼠血壓均高于正常組,有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),而模型組、針刺組、非經(jīng)非穴組三組之間比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);治療1周后,與模型組相比,針刺組和非經(jīng)非穴組大鼠尾動脈收縮壓均下降,并有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),但非經(jīng)非穴組與針刺組沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);治療2周后,與模型組相比,針刺組和非經(jīng)非穴組大鼠收縮壓顯著下降,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),與非經(jīng)非穴組相比,針刺組療效更顯著,降壓效果更好,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);治療3周后,大鼠尾動脈收縮壓持續(xù)下降,與模型組相比,針刺組和非經(jīng)非穴組具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),與非經(jīng)非穴組相比,針刺組療效更顯著,降壓效果更好,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);治療4周后,針刺組、非經(jīng)非穴組的大鼠尾動脈收縮壓達到一定的穩(wěn)定期,與模型組相比具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),與非經(jīng)非穴組相比,針刺組療效更顯著,降壓效果更好,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2針刺對DAHL鹽敏感大鼠外周血T淋巴細胞亞群的影響與模型組相比,針刺組CD4+T淋巴細胞百分比明顯下降(P0.05),非經(jīng)非穴組CD4+T淋巴細胞百分比也有所下降(P0.05),正常組和模型組的T淋巴細胞百分比沒有明顯差異(P0.05);與模型組相比,針刺穴位后CD8+T淋巴細胞百分比降低(P0.05),且針刺組和非經(jīng)非穴組CD8+T淋巴細胞百分比皆比正常組有所下降(P0.05)。3針刺對DAHL鹽敏感大鼠脾臟TLR4信號通路的影響TLR4M RNA與模型組相比,針刺組和非經(jīng)非穴組基因表達顯著降低(P0.01),且四組間有明顯的差異(P0.01);TRAF-6M RNA與模型組相比,針刺組和正常組基因表達顯著下降(P0.05),但模型組和非經(jīng)非穴組沒有顯著差異(P0.05);AP-1的M RNA與模型組相比,針刺組和非經(jīng)非穴組基因表達顯著降低(P0.01),且四組間存在明顯的差異(P0.01)。結(jié)論:1針刺對DAHL鹽敏感大鼠具有降壓作用,可使高血壓前期的血壓恢復(fù)至正常水平。2高血壓前期大鼠體內(nèi)存在淋巴細胞激活的炎癥狀態(tài),針刺可改善脾氣虛所致的低度炎性高血壓前期大鼠的免疫功能紊亂程度。
【關(guān)鍵詞】：高血壓前期 脾虛證 電針 T淋巴細胞亞群 TLR4信號通路
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R245
【目錄】：

• 中文論著摘要4-7
• 英文論著摘要7-10
• 英文縮略語10-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-21
• 實驗材料14-15
• 實驗方法15-21
• 實驗結(jié)果21-25
• 討論25-33
• 結(jié)論33-34
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價34-35
• 參考文獻35-40
• 綜述40-50
• 參考文獻46-50
• 在學(xué)期間科研成績50-51
• 致謝51-52
• 個人簡歷52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 童明宏;邵俊;陳燕紅;邢穎;;CD3~+、CD4~+、CD8~+T細胞水平在胃癌患者外周血中的變化[J];檢驗醫(yī)學(xué);2012年06期

2 馮俊;王愛玲;楊春;王靜;余元勛;;高血壓病患者外周血單核細胞Toll樣受體4的表達[J];中華高血壓雜志;2007年12期

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本文編號：896280