本文關(guān)鍵詞：小型豬復(fù)合麻醉劑及其頡頏劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)AMPK的影響

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【摘要】：本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接懶⌒拓i復(fù)合麻醉劑(XFM)及其頡頏劑對(duì)大鼠不同腦區(qū)AMPK的影響,明確AMPKα1 mRNA、AMPKα2 mRNA、AMPK蛋白和p-AMPK蛋白在麻醉和催醒過程中的變化趨勢,探討XFM及其頡頏劑在麻醉過程中的的相互作用機(jī)制,為臨床麻醉及科學(xué)研究提供依據(jù)。將90只SD大鼠隨機(jī)分為三組:XFM麻醉組(M組)(n=30)、小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑組(W組)(n=30)、XFM與頡頏劑交互組(MW組)(n=30)。其中M組又分為5個(gè)亞組,分別為:C1組(腹腔內(nèi)注射與XFM等體積的0.9%NaCl)、M1組(腹腔注射XFM后10min)、M2組(腹腔注射XFM后20min)、M3組(腹腔注射XFM后40min)、M4組(腹腔注射XFM后1h);W組也分為5個(gè)亞組,分別為:C2組(腹腔內(nèi)注射與頡頏劑等體積0.9%NaCl)、W1組(腹腔注射頡頏劑后10min)、W2組(腹腔注射頡頏劑后20min)、W3組(腹腔注射頡頏劑后40min)、W4組(腹腔注射頡頏劑后1h);MW組也分為5個(gè)亞組,分別為:C3組(腹腔內(nèi)注射與XFM等體積的0.9%NaCl 10min后,注射與頡頏劑等體積的0.9%NaCl)、MW1組(腹腔注射XFM 10min后,注射其頡頏劑10min)、MW2組(腹腔注射XFM 10min后,注射其頡頏劑20min)、MW3組(腹腔注射XFM 10min后,注射其頡頏劑40min)、MW4組(腹腔注射XFM 10min后,注射其頡頏劑1h)。各組別到達(dá)預(yù)定時(shí)間后迅速處死并取腦,將大鼠大腦皮層、小腦、丘腦、腦干及海馬這五個(gè)腦區(qū)分離開,用RT-PCR技術(shù)測定各腦區(qū)AMPKα1和AMPKα2基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量,WB測定各腦區(qū)AMPK蛋白和p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:1.XFM能使大鼠各腦區(qū)內(nèi)AMPKα1 m RNA和AMPKα2 m RNA的相對(duì)表達(dá)量顯著升高;小腦、海馬、丘腦和腦干內(nèi)p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著升高,且m RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)的變化較為一致。2.小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑能使大鼠各腦區(qū)內(nèi)AMPKα2 m RNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低;大腦皮層和腦干內(nèi)AMPKα1 m RNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低,而丘腦內(nèi)則顯著升高;小腦、海馬和腦干內(nèi)p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著降低。3.小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑催醒XFM麻醉的大鼠后,能使大鼠大腦皮層和腦干內(nèi)AMPKα1mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低,小腦、海馬和丘腦中則顯著升高;大腦皮層和海馬內(nèi)AMPKα2mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著升高,小腦、丘腦和腦干中則顯著降低;小腦、海馬和腦干內(nèi)p-AMPK蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著降低。綜上所述,XFM對(duì)AMPKα1 m RNA、AMPKα2 m RNA和p-AMPK蛋白具有一定的激活作用,與小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑對(duì)其的作用相反,但在催醒過程中頡頏劑并不能完全逆轉(zhuǎn)麻醉劑對(duì)AMPKα2 m RNA和p-AMPK蛋白的激活,提示全麻機(jī)理研究的復(fù)雜性和多位點(diǎn)性。
【關(guān)鍵詞】：小型豬 麻醉 XFM 小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑 AMPK
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S859.7
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 引言11-19
• 1.1 全麻機(jī)制相關(guān)學(xué)說11-12
• 1.1.1 脂質(zhì)學(xué)說11
• 1.1.2 蛋白質(zhì)學(xué)說11-12
• 1.1.3 基因?qū)W說12
• 1.2 全麻與中樞神經(jīng)系統(tǒng)12-14
• 1.3 XFM及其頡頏劑的研究進(jìn)展14-15
• 1.3.1 XFM的研究進(jìn)展14-15
• 1.3.2 小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑的研究進(jìn)展15
• 1.4 AMPK研究進(jìn)展15-17
• 1.4.1 AMPK的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及組織分布15-16
• 1.4.2 AMPK的活性調(diào)節(jié)16-17
• 1.5 麻醉與AMPK的關(guān)系17-18
• 1.6 研究目的與意義18-19
• 2 材料與方法19-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料19-21
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物19
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑19-20
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器20
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑的配制20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法21-30
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組與樣品采集21-22
• 2.2.2 各腦區(qū)樣品中AMPK m RNA含量的測定22-25
• 2.2.3 不同腦區(qū)AMPK、p-AMPK蛋白含量的測定25-30
• 3 結(jié)果30-52
• 3.1 大鼠各腦區(qū)AMPK m RNA含量測定結(jié)果30-42
• 3.1.1 總RNA的鑒定結(jié)果30
• 3.1.2 Real Time PCR擴(kuò)增曲線結(jié)果30-31
• 3.1.3 Real Time PCR熔解曲線結(jié)果31-32
• 3.1.4 Real Time PCR產(chǎn)物凝膠電泳結(jié)果32-33
• 3.1.5 XFM對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPKα1 mRNA表達(dá)影響的測定結(jié)果33-34
• 3.1.6 小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPKα1 mRNA表達(dá)影響的測定結(jié)果34-36
• 3.1.7 頡頏劑催醒XFM麻醉對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPKα1 m RNA表達(dá)影響的測定結(jié)果36-37
• 3.1.8 XFM對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPKα2 mRNA表達(dá)影響的測定結(jié)果37-39
• 3.1.9 小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPKα2 mRNA表達(dá)影響的測定結(jié)果39-40
• 3.1.10 頡頏劑催醒XFM麻醉對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPKα2 mRNA表達(dá)影響的測定結(jié)果40-42
• 3.2 XFM及其頡頏劑對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPK蛋白表達(dá)的影響42-47
• 3.2.1 XFM對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPK蛋白表達(dá)影響的測定結(jié)果42-44
• 3.2.2 小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPK蛋白含量測定結(jié)果44-45
• 3.2.3 頡頏劑催醒XFM麻醉對(duì)大鼠各腦區(qū)AMPK蛋白含量測定結(jié)果45-47
• 3.3 XFM及其頡頏劑對(duì)大鼠各腦區(qū)p-AMPK蛋白表達(dá)的影響47-52
• 3.3.1 XFM對(duì)大鼠各腦區(qū)p-AMPK蛋白表達(dá)影響的測定結(jié)果47-48
• 3.3.2 小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑對(duì)大鼠各腦區(qū)p-AMPK蛋白表達(dá)影響的測定結(jié)果48-50
• 3.3.3 頡頏劑催醒XFM麻醉對(duì)大鼠各腦區(qū)p-AMPK蛋白表達(dá)影響的測定結(jié)果50-52
• 4 討論52-56
• 4.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)依據(jù)52-53
• 4.1.1 AMPK的選取52
• 4.1.2 腦區(qū)的選取52-53
• 4.2 實(shí)驗(yàn)的影響因素53
• 4.3 AMPK在麻醉與催醒過程中的機(jī)制探討53-55
• 4.3.1 XFM及其頡頏劑對(duì)AMPKα1 mRNA和AMPKα2 m RNA表達(dá)的影響53-54
• 4.3.2 XFM及其頡頏劑對(duì)p-AMPK蛋白表達(dá)的影響54-55
• 4.4 全麻機(jī)理研究的復(fù)雜性55-56
• 5 結(jié)論56-57
• 致謝57-58
• 參考文獻(xiàn)58-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文65

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