本文關(guān)鍵詞：海兔素對(duì)酒精性肝損傷大鼠小腸黏膜屏障的保護(hù)作用研究

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【摘要】：目的研究海兔素(Aplysin)對(duì)酒精性肝損傷大鼠血漿中D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)、腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)和炎性因子(TNF-α、TGF-β)及腸組織中叉頭樣轉(zhuǎn)錄因子O4(FOXO4)等的影響,以初步探討海兔素對(duì)酒精性肝損傷大鼠腸黏膜損傷的保護(hù)作用及初步作用機(jī)制。方法1.動(dòng)物分組及模型建立:兩月齡健康雄性Wistar大鼠60只,按體重隨機(jī)分為4組,每組15只。酒精模型組給予56℃白酒灌胃,第1周5.5ml/(kg?bw?d),第2周7.5 ml/(kg?bw?d),第3周8.0ml/(kg?bw?d),第4周9.0 ml/(kg?bw?d),第5周至第8周11ml/(kg?bw?d);海兔素低、高劑量組首先分別給予Aplysin100、150mg/(kg?bw?d)灌胃,1 h后再給予與模型組相同劑量的酒精灌胃;空白對(duì)照組灌胃給予10ml/(kg?bw?d)生理鹽水,實(shí)驗(yàn)共持續(xù)8周。大鼠末次灌胃后,禁食12h,按體重給予3%戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉,腹主動(dòng)脈取血及小腸組織。2.透射電鏡觀察大鼠小腸超微結(jié)構(gòu)變化。3.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測大鼠血漿中FABP2、TNF-α、TGF-β、D-LA及DAO濃度。4.免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測小腸組織中FOXO4的表達(dá)情況,計(jì)算其陽性表達(dá)率。結(jié)果1.透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn),空白對(duì)照組小腸上皮柱狀細(xì)胞排列整齊、緊密,微絨毛豐富,緊密連接結(jié)構(gòu)清晰完整;酒精模型組大鼠小腸上皮細(xì)胞表面微絨毛排列稀疏,細(xì)胞間緊密連接腫大,海兔素高、低劑量組小腸上皮柱狀細(xì)胞及微絨毛排列情況較酒精模型組得到不同程度改善,緊密連接腫脹減輕;2.酒精模型組大鼠血漿中D-LA、DAO和FABP2的濃度顯著增加(P0.05),而海兔素干預(yù)后,可有效抑制酒精誘導(dǎo)的血漿D-LA、DAO和FABP2的濃度升高(P0.05);3.免疫組化結(jié)果顯示,酒精模型組小腸組織FOXO4表達(dá)水平明顯降低,較空白對(duì)照組OD值降低約50%(P0.05);海兔素低、高劑量組FOXO4的表達(dá)水平顯著增高,OD值均顯著高于模型組(P0.05)。4.酒精模型組大鼠血漿中炎性因子TNF-α、TGF-β濃度均較空白對(duì)照組顯著升(P0.05),而海兔素低、高劑量組血漿中TNF-α、TGF-β濃度均較酒精模型組明顯降低(P0.05)。結(jié)論1.通過對(duì)小腸組織超微結(jié)構(gòu)的觀察、血漿中D-LA、DAO及FABP2水平的檢測,初步驗(yàn)證了海兔素對(duì)酒精性肝損傷大鼠腸黏膜屏障具有一定的保護(hù)作用;2.海兔素對(duì)酒精性肝損傷大鼠的小腸黏膜屏障的保護(hù)作用機(jī)制可能與海兔素調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)相關(guān)蛋白FOXO4的表達(dá),減少炎性因子TNF-α、TGF-β的釋放有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：海兔素 ALD 腸黏膜屏障損傷 FOXO4
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R575
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 材料與方法9-15
• 1.1 主要儀器9
• 1.2 主要試劑9-10
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物10
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法10-14
• 1.4.1 動(dòng)物干預(yù)及分組10-11
• 1.4.2 標(biāo)本收集及處理11
• 1.4.3 指標(biāo)檢測11-14
• 1.4.3.1 小腸超微結(jié)構(gòu)病理觀察-透射電鏡法11-12
• 1.4.3.2 ELISA實(shí)驗(yàn)檢測海兔素對(duì)大鼠血漿中DAO、D-LA、FABP2、TNF-α和TGF-β水平的影響12-13
• 1.4.3.3 免疫組化法檢測海兔素對(duì)大鼠小腸中FOXO4表達(dá)的影響13-14
• 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析14-15
• 結(jié)果15-19
• 2.1 小腸組織超微結(jié)構(gòu)觀察15-16
• 2.2 海兔素對(duì)大鼠血漿中DAO、D-LA和FABP2水平的影響16
• 2.3 海兔素對(duì)大鼠血漿中TNF-α和TGF-β水平的影響16-17
• 2.4 海兔素對(duì)大鼠小腸組織中FOXO4表達(dá)的影響17-19
• 討論19-22
• 結(jié)論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-26
• 綜述26-43
• 綜述參考文獻(xiàn)34-43
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
• 縮略詞對(duì)照表44-45
• 致謝45-46

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