發(fā)布時(shí)間：2017-08-13 00:21

  本文關(guān)鍵詞：益精方對(duì)腺嘌呤法大鼠睪丸支持細(xì)胞緊密連接蛋白及調(diào)控因子影響的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的:觀察益精方對(duì)腺嘌呤法誘導(dǎo)的不育癥模型大鼠睪丸支持細(xì)胞緊密連接蛋白及動(dòng)力學(xué)調(diào)控因子的表達(dá)水平的影響,從緊密連接狀態(tài)來(lái)探討男性不育的機(jī)理。材料與方法:選用48只健康的Wistar雄性大鼠,SPF級(jí),2月齡,體重180g左右,按隨機(jī)數(shù)字表法平均分為4組:空白組,模型組,復(fù)方玄駒膠囊組和益精方組。造模期間,除空白組外,其余三組均以腺嘌呤1 m L/(100g·d)的劑量灌胃,連續(xù)灌胃12天即造模結(jié)束;從第13天開(kāi)始,空白組及模型組用生理鹽水灌胃,復(fù)方玄駒組和益精方組分別以復(fù)方玄駒膠囊水溶液及益精方湯劑灌胃,每天一次,連續(xù)20天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后麻醉大鼠,無(wú)菌條件下于腹主動(dòng)脈取血10m L,摘取睪丸和附睪,采用計(jì)算機(jī)精子分析系統(tǒng)計(jì)數(shù)精子密度和精子活動(dòng)率;采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)對(duì)各組大鼠血清中睪酮(T)的含量進(jìn)行檢測(cè);采用免疫組化技術(shù)測(cè)定大鼠睪丸組織中JAMS蛋白,ZOS蛋白的表達(dá);采用RT-PCR技術(shù)測(cè)定TGF—β3、Ca2+-ATP酶、PKA的m RNA情況表達(dá)。結(jié)果:1.與空白組比較,模型組動(dòng)物精子活動(dòng)率、密度及血清睪酮T均明顯下降(P0.01);與模型組比較,益精方組及復(fù)方玄駒膠囊組精子活動(dòng)率、密度及血清睪酮T均有明顯提高(P0.01)。2.與空白組比較,模型組JAMS和ZOS蛋白水平明顯下降(P0.01);與模型組比較,益精方組JAMS和ZOS蛋白水平升高(P0.05),復(fù)方玄駒膠囊組升高不明顯(P0.05)。3.與空白組比較,模型組中TGF-β3及TGF-β3 mRNA的表達(dá)升高(P0.01);與模型組比較,益精方組中TGF-β3及TGF-β3 m RNA的表達(dá)有所下降(P0.05),復(fù)方玄駒膠囊組下降不明顯(P0.05)。4.與空白組比較,模型組中Ca2+-ATP酶m RNA、PKAm RNA的表達(dá)均降低(P0.01)。與模型組比較,益精方組中Ca2+-ATP酶m RNA、PKAm RNA的表達(dá)均有所提高(P0.05),復(fù)方玄駒膠囊組提高不明顯(P0.05)。結(jié)論:1.腺嘌呤能夠降低精子的密度和活力及血清睪酮T的水平,導(dǎo)致大鼠睪丸生殖能力降低;同時(shí)使JAMS,ZOS蛋白的表達(dá)減少,TGF-β3及TGF-β3 m RNA的表達(dá)升高及Ca2+-ATP酶m RNA、PKAm RNA的表達(dá)降低,說(shuō)明腺嘌呤能夠破壞緊密連接平衡狀態(tài),使血睪屏障通透性增高,導(dǎo)致生精障礙。2.益精方能夠提高腺嘌呤法誘導(dǎo)的腎陽(yáng)虛模型大鼠的精子密度、精子活動(dòng)率和血清睪酮T濃度,使JAMS和ZOS蛋白表達(dá)的水平增多;同時(shí)對(duì)TGF-β3及TGF-β3m RNA的高表達(dá)具有明顯的抑制作用,對(duì)Ca2+-ATP酶m RNA、PKAm RNA的低表達(dá)具有明顯的拮抗作用,證明了益精方能夠改善腺嘌呤損傷的大鼠睪丸支持細(xì)胞緊密連接功能,恢復(fù)大鼠的生殖能力。
【關(guān)鍵詞】：益精方 腺嘌呤 TJ BTB TGF-β3
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R285.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 英文縮略語(yǔ)8-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-20
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-27
• 討論27-33
• 小結(jié)33-34
• 結(jié)論34-35
• 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 附錄 綜述41-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 個(gè)人簡(jiǎn)介53-54
• 在學(xué)期間科研成績(jī)54-55
• 致謝55

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