本文關(guān)鍵詞：肝臟缺血與損傷對(duì)小型豬生理功能和組織再生的影響

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【摘要】：肝臟缺血再灌注是臨床上一種常見的病理生理現(xiàn)象,大多繼發(fā)于肝臟移植或復(fù)雜的肝臟外科手術(shù)中,而對(duì)于該損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究大多集中在嚙齒類小鼠、大鼠肝臟損傷模型上,應(yīng)用小型豬的報(bào)道很少。因此,本實(shí)驗(yàn)試圖應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)建立小型豬肝臟缺血與損傷模型,對(duì)圍術(shù)期生命體征、損傷后肝臟微環(huán)境的變化和再生能力進(jìn)行監(jiān)測與分析,探索手術(shù)對(duì)小型豬生理功能和肝組織再生能力的影響。為構(gòu)建合適的小型豬肝臟缺血與損傷模型提供科學(xué)依據(jù),亦可為肝臟移植、肝組織再生等科學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)選取25頭健康巴馬小型豬,隨機(jī)分為A、B、C、D、E5組,各組麻醉方法、氣腹和手術(shù)通路的建立方式相同,而根據(jù)手術(shù)處理方法不同,A組為假手術(shù)組、B組為左半肝切除組、C組為右半肝缺血30min合并左半肝切除組、D組為右半肝缺血60min合并左半肝切除組、E組為右半肝缺血90min合并左半肝切除組。在實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)重要生理指標(biāo)進(jìn)行全程連續(xù)檢測。各組分別于術(shù)前、術(shù)后即刻、術(shù)后1d、3d、7d、14d、30d采取靜脈血,檢測血清總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、總膽紅素、肝細(xì)胞生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子的變化。在術(shù)前、缺血后即刻、術(shù)后即刻、術(shù)后1d、3d、7d和術(shù)后1個(gè)月對(duì)各組小型豬進(jìn)行腹腔鏡下肝臟活組織檢查,進(jìn)行HE染色觀察組織病理學(xué)變化,同時(shí)檢測肝臟組織增殖細(xì)胞核抗原、Toll樣受體、核因子-κB、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6的表達(dá)變化。通過實(shí)驗(yàn),各組手術(shù)均順利完成。術(shù)中各組小型豬的生理指標(biāo)都有不同程度的改變,如心率的升高、呼吸末二氧化碳分壓升高、體溫下降等,除右半肝缺血90min合并左半肝切除組內(nèi)個(gè)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理指波動(dòng)范圍大以外,其余各組均未超出正常耐受范圍,并且在術(shù)后很快恢復(fù)到正常。損傷后小型豬肝臟功能的變化主要表現(xiàn)為,與術(shù)前相比,術(shù)后1d和3d血清AST變化差異極顯著(P0.01)。經(jīng)過缺血和切除手術(shù)的動(dòng)物剩余肝臟組織術(shù)后1d肝細(xì)胞變性和炎性浸潤嚴(yán)重,術(shù)后7d肝細(xì)胞明顯增生。術(shù)后各組血清中肝細(xì)胞生長因子呈先升高再降低的趨勢,在術(shù)后1d升至最高后逐漸降低。轉(zhuǎn)化生長因子呈先降低后升高的趨勢,在術(shù)后3d和14d變化差異顯著(0.01P0.05)。肝細(xì)胞PCNA表達(dá)水平于術(shù)后1d達(dá)到高峰,之后隨著時(shí)間的延長逐漸降低。肝臟組織Toll樣受體和NF-κB表達(dá)量在缺血再灌注后早期明顯升高,缺血后即刻和術(shù)后1d明顯升高,差異極顯著(P0.01),在術(shù)后3d呈降低趨勢,差異顯著(0.01P0.05),其他時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P0.05)。術(shù)后肝組織白細(xì)胞介素-6和腫瘤壞死因子的表達(dá)呈先升高后降低的趨勢,在術(shù)后1d迅速升高到最高值,術(shù)后3d、術(shù)后7d逐步降低,但白細(xì)胞介素-6的變化幅度較小。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出下列結(jié)論:1.應(yīng)用腹腔鏡手術(shù)技術(shù)成功建立了小型豬肝臟不同缺血時(shí)間合并部分切除損傷模型,各組手術(shù)均順利完成,證明了該實(shí)驗(yàn)方法是可行性。2.在手術(shù)過程中對(duì)小型豬呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)等生理指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測和評(píng)價(jià),并通過對(duì)術(shù)后肝臟組織學(xué)和血清學(xué)的檢測與分析,證明了該實(shí)驗(yàn)方法是安全的。3.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合性對(duì)比分析,最終確定了右半肝缺血60min合并左半肝切為損傷程度適中,肝組織再生明顯的小型豬肝臟缺血與損傷模型。
【關(guān)鍵詞】：小型豬 腹腔鏡 肝臟 缺血再灌注 肝組織再生
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R657.3
【目錄】：

• 摘要8-10
• 英文摘要10-12
• 1 引言12-19
• 1.1 腹腔鏡微創(chuàng)外科簡介12-14
• 1.1.1 腹腔鏡微創(chuàng)外科發(fā)展歷史12-13
• 1.1.2 腹腔鏡微創(chuàng)外科的綜合評(píng)價(jià)13-14
• 1.1.3 腹腔鏡微創(chuàng)外科發(fā)展趨勢14
• 1.2 缺血再灌注損傷概述14-16
• 1.2.1 缺血再灌注損傷的誘因14-15
• 1.2.2 臨床上常見的缺血再灌注損傷15-16
• 1.3 相關(guān)因子與缺血再灌注損傷16-18
• 1.3.1 Toll樣受體（TLRs）16-17
• 1.3.2 核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）17
• 1.3.3 腫瘤壞死因子（TNF-α）17-18
• 1.4 目的與意義18-19
• 2 材料與方法19-30
• 2.1 材料19-21
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物19
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)器材19-20
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法21-30
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備21
• 2.2.2 麻醉與保定21
• 2.2.3 手術(shù)操作21-24
• 2.2.4 術(shù)后護(hù)理24
• 2.2.5 標(biāo)本采集24-25
• 2.2.6 腹腔鏡手術(shù)的安全性監(jiān)測25
• 2.2.7 肝臟環(huán)境變化的監(jiān)測25-29
• 2.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法29-30
• 3 結(jié)果與分析30-52
• 3.1 小型豬腹腔鏡手術(shù)結(jié)果及安全性監(jiān)測30-37
• 3.1.1 手術(shù)結(jié)果30
• 3.1.2 術(shù)中生理指標(biāo)的監(jiān)測結(jié)果30-37
• 3.2 小型豬腹腔鏡手術(shù)后肝臟酶譜的變化37-41
• 3.2.1 總蛋白（TP）38-39
• 3.2.2 谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）39-40
• 3.2.3 谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）40
• 3.2.4 總膽紅素（TBIL）40-41
• 3.3 肝臟組織學(xué)變化41-44
• 3.4 小型豬腹腔鏡手術(shù)后血清生長因子的變化44-46
• 3.4.1 肝細(xì)胞生長因子（HGF）44-45
• 3.4.2 轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β1）45-46
• 3.5 肝組織PCNA蛋白表達(dá)的變化46-48
• 3.6 TLR與NF-κB基因表達(dá)的變化48-49
• 3.7 術(shù)后肝臟組織炎性因子的變化49-52
• 3.7.1 白細(xì)胞介素-6（IL-6）50-51
• 3.7.2 腫瘤壞死因子（TNF-α）51-52
• 4 討論52-56
• 4.1 腹腔鏡建立手術(shù)模型方法的選擇52-53
• 4.1.1 腹腔鏡下肝臟血流阻斷的方法52
• 4.1.2 肝臟血流阻斷時(shí)長的選擇52-53
• 4.2 手術(shù)的安全性評(píng)價(jià)53
• 4.3 不同缺血時(shí)間對(duì)肝臟功能的影響53
• 4.4 不同缺血時(shí)間對(duì)肝臟再生的影響53-56
• 4.4.1 不同缺血時(shí)間對(duì)血清生長因子的影響53-55
• 4.4.2 不同缺血時(shí)間對(duì)肝組織PCNA蛋白表達(dá)的影響55
• 4.4.3 不同缺血時(shí)間對(duì)TLR/NF-κB基因表達(dá)和肝組織炎性因子的影響55-56
• 5 結(jié)論56-57
• 致謝57-58
• 參考文獻(xiàn)58-64
• 附錄64-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文65

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 何志紅;李曉玲;何松青;李淑群;王桂林;;自制肝門阻斷帶在腹腔鏡肝切除術(shù)中的應(yīng)用體會(huì)[J];腹腔鏡外科雜志;2013年08期

2 曹月敏;腹腔鏡手術(shù)的歷史、現(xiàn)狀與展望[J];河北醫(yī)藥;2002年05期

3 崔翔宇;李占清;;Toll樣受體4在心肌缺血再灌注損傷中的研究進(jìn)展[J];河北聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年02期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 汪文;肝臟缺血再灌注損傷中氧自由基的產(chǎn)生及膠毒霉素的抑制作用[D];同濟(jì)大學(xué);2005年

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本文編號(hào)：632809