發(fā)布時間：2017-07-31 20:08

  本文關鍵詞：黃芪解毒湯干預乳腺癌細胞凋亡及影響Notch信號轉導通路活性的實驗研究

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【摘要】：目的：探討黃芪解毒湯體外干預人乳腺癌細胞MCF-7凋亡及對Notchl.Jagl基因和Cycl inDl蛋白表達影響,揭示本方抑制乳腺癌復發(fā)轉移的作用機制。 方法：首先制備含藥血清,12只雌性SD大鼠隨機分為黃芪解毒湯含藥血清組、阿霉素含藥血清組、參一膠囊含藥血清組、生理鹽水血清組。并分別以等量黃芪解毒湯濃縮液、阿霉素溶液、參一膠囊溶液、生理鹽水予大鼠灌胃3天,每天兩次。于第四天第7次灌胃后,水合氯醛麻醉,腹主動脈取血后制備含藥血清。以含藥血清干預人乳腺癌細胞MCF-7,并以MTT檢測不同含藥血清對細胞抑制的影響,流式細胞儀檢測其在體外實驗中對MCF-7乳腺癌細胞凋亡的影響,RT-PCR檢測Notchl及Jag1基因,Western-blot檢測CyclinDl蛋白表達的影響。以實驗探究黃芪解毒湯防治乳腺癌的機理。 結果： 1.MTT：與生理鹽水血清組比較,加入含藥血清的組別均具有一定誘導MCF-7細胞凋亡的作用,除5%濃度外含藥血清組的OD值與其生理鹽水血清組比較差異均有統(tǒng)計性意義(P0.05),且阿霉素組抑制率最高,其次為黃芪解毒湯組,最后為參一膠囊組； 2.流式細胞儀測細胞凋亡：含藥血清的組別均具有一定誘導MCF-7細胞凋亡的作用其與生理鹽水組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),且阿霉素組凋亡率最高,其次為黃芪解毒湯組,最后為參一膠囊組； 3.RT-PCR檢測Notchl及Jag1基因表達：生理鹽水血清組相比,被含藥血清干預的細胞中Notchl及Jag1基因表達明顯降低且有統(tǒng)計學意義(P0.05),且阿霉素組表達最低,其次為黃芪解毒湯組,最后為參一膠囊組； 4.West ern-blot檢測CyclinDl蛋白表達：與生理鹽水血清組相比,含藥血清干預后的細胞中CyclinDl蛋白表達減少,且阿霉素組表達最低,其次為黃芪解毒湯組,最后為參一膠囊組。 結論： 1.黃芪解毒湯可誘導人乳腺癌細胞MCF-7凋亡；2.黃芪解毒湯可顯著降低人乳腺癌細胞MCF-7Notchl. Jagl基因的表達： 3.黃芪解毒湯可顯著降低人乳腺癌細胞MCF一7CyclinDl蛋白表達； 為黃芪解毒湯在乳腺癌術后治療中的作用提供實驗依據(jù)。
【關鍵詞】：MCF-7 Notch1 Jag1 CyclinD1 血清 黃芪解毒湯
【學位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 中英文縮寫索引10-11
• 引言11-13
• 第一部分 黃芪解毒湯對人乳腺癌MCF-7細胞凋亡的研究13-20
• 1 材料13-14
• 1.1 實驗動物13
• 1.2 細胞株13
• 1.3 主要試劑及其配制13
• 1.4 實驗設備13
• 1.5 實驗藥物13-14
• 2 實驗方法14-16
• 2.1 藥物濃縮液配制14
• 2.2 含藥血清的制備14
• 2.3 細胞培養(yǎng)、傳代、凍存、細胞懸液制備及細胞計數(shù)14-15
• 2.4 MTT比色法檢測藥物對MCF-7細胞增殖的影響15-16
• 2.5 流式細胞儀檢測MCF-7細胞凋亡16
• 3 統(tǒng)計學處理16
• 4 結果與分析16-20
• 4.1 MTT結果16-18
• 4.2 流式細胞法檢測含藥血清對乳腺癌MCF-7細胞凋亡的影響18-20
• 第二部分 黃芪解毒湯對人乳腺癌MCF-7細胞Notch1及Jag1基因表達的影響20-28
• 1 材料20
• 1.1 實驗動物20
• 1.2 細胞株20
• 1.3 主要試劑及其配制20
• 1.4 實驗設備20
• 2 實驗方法20-23
• 2.1 細胞培養(yǎng)及含藥血清的制備20
• 2.2 RT-PCR檢測Notch1及Jag1基因表達20-23
• 3 統(tǒng)計學處理23
• 4 結果與分析23-28
• 第三部分 黃芪解毒湯對人乳腺癌MCF-7細胞CyclinD1周期蛋白表達的影響28-32
• 1 材料28-29
• 1.1 實驗動物28
• 1.2 細胞株28
• 1.3 主要試劑及其配制28-29
• 1.4 實驗設備29
• 2 實驗方法29-30
• 2.1 細胞培養(yǎng)及含藥血清的制備29
• 2.2 Western-blot檢測CyclinD1蛋白表達29-30
• 3 統(tǒng)計學處理30
• 4 結果與分析30-32
• 第四部分 討論32-38
• 1 古代醫(yī)學對乳腺癌的認識及治療32-33
• 1.1 古代醫(yī)學對乳腺癌認識32
• 1.2 中醫(yī)中藥對乳腺癌的治療進展32
• 1.3 中醫(yī)干預乳腺癌實驗研究進展32-33
• 2 現(xiàn)代醫(yī)學對乳腺癌的認識及治療33-34
• 2.1 現(xiàn)代醫(yī)學對乳腺癌認識33
• 2.2 現(xiàn)代醫(yī)學對乳腺癌的治療33-34
• 3 Notch信號通路與乳腺癌34-35
• 3.1 Notch信號通路34
• 3.2 Notch信號通路與乳腺癌的關系34-35
• 4 黃芪解毒湯的組方依據(jù)35
• 5 方藥組成與配伍意義35-36
• 5.1 黃芪解毒湯方藥組成36
• 5.2 配伍意義36
• 6 實驗結果及展望36-38
• 第五部分 結論38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻40-44
• 附錄A 圖片44-46
• 附錄B 綜述46-56
• 參考文獻54-56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：600907