本文關(guān)鍵詞：碘伏沖洗對(duì)中樞神經(jīng)細(xì)胞毒性的基礎(chǔ)研究

  更多相關(guān)文章： 碘伏 細(xì)胞毒性 細(xì)胞凋亡 顱內(nèi)感染

【摘要】：目的本基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)研究擬通過大鼠的體內(nèi)試驗(yàn),探索不同濃度的碘伏對(duì)腦組織的細(xì)胞毒性,以及稀釋后的碘伏在預(yù)防及治療顱內(nèi)感染中應(yīng)用的安全性。方法使用60只健康的雄性Wistar大鼠,凈重300±10g,將60只大鼠隨機(jī)分為3組,每組20只,分別標(biāo)記為0.05%碘伏組、0.025%碘伏組及鹽水對(duì)照組。用10%水合氯醛對(duì)三組大鼠行腹腔麻醉后,行右額開顱(模擬人右額開顱),剪開顱骨,在顯微鏡下分別剪開各層腦膜,將各組大鼠腦組織暴露出來,面積約1.5cm×1.5cm,分別用濃度為0.05%碘伏、0.025%碘伏及生理鹽水反復(fù)沖洗大鼠腦皮層表面5分鐘,再用鹽水反復(fù)沖洗腦表面5分鐘,用骨臘將骨窗封閉,行切口縫合。將三組Wistar大鼠置于同等條件及環(huán)境下飼養(yǎng)14天后,用4%多聚甲醛溶液將三組大鼠的腦組織行灌注,制成蠟塊,將蠟塊水平橫切制成石蠟切片,并行HE染色后,在光鏡下觀察腦皮層神經(jīng)細(xì)胞的變化;用免疫組化染色方法檢測(cè)Caspase-3及Cleaved-PARP的表達(dá)情況;行TUNEL檢測(cè)法觀察大鼠神經(jīng)細(xì)胞的凋亡狀況,對(duì)上述各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,研究兩種不同濃度的碘伏行腦皮層表面沖洗對(duì)大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞毒性。結(jié)果用濃度0.05%的碘伏對(duì)大鼠腦皮層表面沖洗后14天,可見神經(jīng)元細(xì)胞排列紊亂無序,神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量減少,間質(zhì)水腫,可見部分神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)生凋亡,甚至變性、壞死;用濃度0.025%碘伏沖洗大鼠腦皮層表面后14天,可見神經(jīng)細(xì)胞排列稍紊亂,紋理明顯,神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量稍減少,間質(zhì)水腫較輕微,可見少數(shù)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,未見明顯的神經(jīng)元細(xì)胞變性、壞死;在大鼠腦組織表面用生理鹽水沖洗后14天,鏡下可見大鼠神經(jīng)元細(xì)胞整齊有序的排列,無明顯間質(zhì)水腫,未見神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死,極少數(shù)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡。用兩種不同濃度的碘伏沖洗大鼠腦皮層表面后14天,其Caspase-3和Cleaved-PARP的陽性表達(dá)率均高于生理鹽水組。濃度0.05%碘伏組中大鼠腦組織Caspase-3和Cleaved-PARP表達(dá)的陽性率與生理鹽水組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),0.025%碘伏組Caspase-3蛋白、Cleaved-PARP陽性表達(dá)同生理鹽水組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。應(yīng)用TUNEL檢測(cè)法觀察三組大鼠腦皮層組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況,可見腦細(xì)胞間質(zhì)水腫,膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞腫脹,發(fā)生凋亡的細(xì)胞主要是神經(jīng)元細(xì)胞,集中在沖洗區(qū),凋亡細(xì)胞在免疫熒光顯微鏡下呈現(xiàn)明顯的綠色熒光,統(tǒng)計(jì)各組中TUNEL細(xì)胞的陽性率,并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析總結(jié):TUNEL細(xì)胞陽性率:0.05%碘伏組0.025%碘伏組生理鹽水組(P0.05)。結(jié)論分別用0.05%、0.025%碘伏及生理鹽水對(duì)Wistar大鼠腦皮層表面行沖洗后14天,濃度0.05%碘伏可造成大鼠神經(jīng)元細(xì)胞間質(zhì)水腫,部分細(xì)胞發(fā)生變性、壞死,部分神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)生凋亡,這會(huì)對(duì)大鼠腦組織帶來一定的損傷,甚至影響中樞神經(jīng)功能;濃度0.025%碘伏對(duì)大鼠腦皮層細(xì)胞的損傷較0.05%碘伏較輕微,在神經(jīng)外科治療中,可將濃度0.025%碘伏用于顱內(nèi)感染的預(yù)防及治療,濃度為0.05%的碘伏對(duì)腦神經(jīng)細(xì)胞的損傷較重,可用于治療嚴(yán)重的顱內(nèi)感染,如腦膿腫等。由于本次實(shí)驗(yàn)僅進(jìn)行了兩組碘伏濃度的研究,且觀察時(shí)間14天,其他濃度的碘伏溶液對(duì)腦組織的損傷及遠(yuǎn)期影響仍需繼續(xù)研究探索。
【關(guān)鍵詞】：碘伏 細(xì)胞毒性 細(xì)胞凋亡 顱內(nèi)感染
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R741
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-14
• 第1章 臨床研究14-37
• 1.1 材料與方法14-21
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-20
• 1.1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
• 1.2 結(jié)果21-27
• 1.2.1 光鏡下觀察經(jīng)HE染色的大鼠腦皮層細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化21-22
• 1.2.2 免疫組化染色檢測(cè)各組切片中Caspase-3 和Cleaved-PARP表達(dá)情況22-26
• 1.2.3 TUNEL法檢測(cè) 0.05%碘伏組、0.025%碘伏組及生理鹽水組中大鼠腦沖洗區(qū)細(xì)胞的凋亡情況26-27
• 1.3 討論27-33
• 1.3.1 碘伏的理化性質(zhì)及其應(yīng)用27-29
• 1.3.2 碘伏引起大鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的機(jī)制29-33
• 1.4 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 第2章 綜述37-49
• 2.1 碘伏37-46
• 2.1.1 碘伏的種類37-38
• 2.1.2 碘伏的理化性質(zhì)38
• 2.1.3 碘伏的殺菌機(jī)制38-39
• 2.1.4 碘伏的殺菌效果39
• 2.1.5 碘伏的細(xì)胞毒性39-40
• 2.1.6 碘伏消毒劑在臨床上的應(yīng)用40-41
• 2.1.7 碘伏在預(yù)防及治療顱內(nèi)感染中的應(yīng)用41-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 結(jié)論49-50
• 致謝50-51
• 導(dǎo)師簡介51-52
• 作者簡介52-53
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集53

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