有氧運動與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究
發(fā)布時間:2017-06-21 11:11
本文關(guān)鍵詞:有氧運動與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究目的:本課題選用阻塞性黃疸模型小鼠為實驗對象,以黑果枸杞多糖或有氧運動的干預(yù)方式,探討NF-κB信號通路在小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的機理及闡述運動聯(lián)合黑果枸杞多糖改善肝損傷的效果,為阻塞性黃疸的輔助療法提供一種新的可行性實驗基礎(chǔ)和新的理論方向。研究方法:50只KM小鼠隨機分為5組:假手術(shù)組10只(B組)、模型組10只(M組)、枸杞組10只(G組)、有氧運動組10只(Y組)、枸杞+運動組10只(G+Y組)。其中除假手術(shù)組外都以總膽管懸掛至腹壁48小時構(gòu)建小鼠阻塞性黃疸的模型。枸杞組、枸杞+運動組小鼠于膽總管結(jié)扎術(shù)后2天進行黑果枸杞多糖灌胃,每天固定時間點,劑量為0.3 ml/次進行灌胃1次,共6W。有氧運動組、枸杞+運動組小鼠進行坡度為0%、速度為10m/min無負重訓(xùn)練,每天30min、每周不連續(xù)訓(xùn)練6天、保持6周的跑臺的運動方案。干預(yù)結(jié)束后小鼠取材前一天晚上禁食處理,取材前先進行稱重,麻醉完全后分離出肝臟組織,應(yīng)用蘇木精 伊紅染色對比小鼠肝臟組織形態(tài)及結(jié)構(gòu)的病理改變;免疫組化法檢測肝臟組織NF-κB P65、NF-α的表達;Realtime-PCR技術(shù)檢測肝組織中核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IκB激酶IKK-α,NF-κB的抑制蛋白IκB-α表達;血液生化檢測血清總膽紅素(TBIL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量。研究結(jié)果:1.血清學(xué)結(jié)果:枸杞+運動組TBIL、ALT、AST含量較模型組顯著降低(P0.01),枸杞組、有氧運動組的含量較模型組也有所下降(P0.05)。2.HE染色顯示:假手術(shù)組小鼠肝細胞索呈放射狀排列;模型組小鼠的肝細胞發(fā)生萎縮,肝索斷裂,核固縮等,間質(zhì)可見紅細胞堆積;有氧運動組、枸杞組可見肝小葉結(jié)構(gòu)不規(guī)則,肝索排列欠整齊,局部可見變性的脂肪細胞;枸杞+運動組效果最為顯著,肝小葉完整,無變形及壞死現(xiàn)象。3.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:NF-κB P65、TNF-α在假手術(shù)組小鼠肝組織中幾乎不表達較模型組顯著性降低(P0.01);枸杞+運動組較枸杞組、有氧運動組、枸杞+運動組低(P0.01)。4.Real-time PCR結(jié)果顯示:三個干預(yù)組與模型組比較,NF-κB、TNF-α、IKK-αmRNA表達明顯增加(P0.01),枸杞+運動組表達量高與枸杞組和有氧運動組(P0.01),IκB-α的表達成相反趨勢。TNF-α和NF-kBP65的表達成正相關(guān),和IκB-α的表達成負相關(guān)。結(jié)論:1.長時間有氧運動和黑果枸杞多糖對小鼠阻塞性黃疸有干預(yù)作用,能改善肝損傷小鼠的免疫功能,對阻塞性黃疸小鼠的肝細胞具有修復(fù)作用。2.適量的有氧運動與黑果枸杞多糖對小鼠阻塞性黃疸有顯著地治療作用,其作用機制可能是通過抑制TNF-α介導(dǎo)的NF-κB信號通路發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。
【關(guān)鍵詞】:黑果枸杞多糖 有氧運動 阻塞性黃疸致肝損傷 NF-κB TNF-α
【學(xué)位授予單位】:湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:G804.2;R285.5
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-11
- 1 前言11-14
- 2 材料與方法14-23
- 2.1 實驗動物14
- 2.2 主要試劑14-16
- 2.3 主要儀器16
- 2.4 實驗方法16-23
- 2.4.1 實驗技術(shù)路線圖16-17
- 2.4.2 實驗對象分組及模型的構(gòu)建17-18
- 2.4.3 黑果枸杞多糖的提取與含量測定18-19
- 2.4.4 運動方案19
- 2.4.5 給藥方案19
- 2.4.6 樣品采集與處理19-20
- 2.4.7 血清指標(biāo)檢測20
- 2.4.8 病理學(xué)觀察20
- 2.4.9 免疫組織化學(xué)染色20-21
- 2.4.10 Realtime-PCR程序21
- 2.4.11 Realtime-PCR技術(shù)檢測NF-k B、TNF-α、IKK-α、IκB-αmRNA表達21-22
- 2.4.12 PCR數(shù)據(jù)統(tǒng)計22
- 2.4.13 質(zhì)量控制22
- 2.4.14 統(tǒng)計學(xué)分析22-23
- 3 實驗結(jié)果23-30
- 3.1 一般情況23
- 3.2 血清指標(biāo)23-24
- 3.3 肝臟形態(tài)學(xué)觀察24-25
- 3.4 各組小鼠肝臟NF-κBp65、TNF-α 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果25-27
- 3.5 各組小鼠肝臟NF-kB、TNF-α、IKK-α、IκB-α 檢測結(jié)果27-30
- 4 討論30-34
- 4.1 KM小鼠阻塞性黃疸模型30
- 4.2 阻塞性黃疸與NF-kB信號通路相關(guān)因子30-31
- 4.3 有氧運動與黑果枸杞多糖的干預(yù)效應(yīng)31-32
- 4.4 有待進一步研究的問題32-34
- 5 結(jié)論34-35
- 參考文獻35-38
- 綜述38-47
- 參考文獻45-47
- 縮略詞表47-48
- 科研情況48-49
- 致謝49
【相似文獻】
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 郭音;有氧運動與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究[D];湖南師范大學(xué);2016年
2 呂曉鵬;黑果枸杞多糖的分離純化與結(jié)構(gòu)表征研究[D];西北大學(xué);2012年
本文關(guān)鍵詞:有氧運動與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:468473
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