本文關(guān)鍵詞：毛細管電泳—電致化學(xué)發(fā)光在生物分析中的應(yīng)用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：毛細管電泳-電致化學(xué)發(fā)光(CE-ECL)是毛細管電泳(CE)和電致化學(xué)發(fā)光(ECL)結(jié)合的產(chǎn)物,兼具了兩者分離效率高和檢測靈敏度高的優(yōu)點。CE-ECL是一種很有發(fā)展?jié)摿Φ姆蛛x分析技術(shù)。本文將CE-ECL應(yīng)用于蛋白與藥物的相互作用和酶反應(yīng)的研究。第一章:概述了毛細管電泳-電致化學(xué)發(fā)光(CE-ECL)聯(lián)用技術(shù)及其在藥物分析、藥物與蛋白之間的作用分析、酶活性測定等方面的應(yīng)用。第二章:以表面修飾了包裹Ru(bpy)32+的二氧化硅納米粒子(Ru DS)-殼聚糖復(fù)合膜的石墨電極作為工作電極。阿齊霉素存在時,ECL信號明顯提高,基于此柱端檢測阿奇霉素的濃度。通過非線性回歸分析計算出阿奇霉素和人血清白蛋白(HSA)之間的結(jié)合常數(shù)為7.46×104 L/mol。華法林和酮洛芬作為特異性探針來研究阿奇霉素和人血清白蛋白(HSA)相互作用的機理,結(jié)果表明阿奇霉素與人血清白蛋白(HSA)在位點Ⅰ結(jié)合。第三章:基于二甲基乙醇胺對Ru(bpy)32+電致化學(xué)發(fā)光的增敏作用,建立了評估丁酰膽堿酯酶(BCh E)活性的新方法。本文對影響B(tài)Ch E活性的主要因素進行考察,其中包括:BCh E激活劑金屬鎂、鈣離子濃度;孵育p H值;孵育溫度和孵育時間;底物濃度。二甲基乙醇胺的檢出限為1.98×10-8 mol/L(S/N=3)。以鹽酸丁卡因為底物時,BCh E的米氏常數(shù)Km和最大反應(yīng)速率Vm分別為1.16×10-3 mol/L和2.71×10-7 mol/L/min。第四章:鹽酸奧布卡因滴眼液又稱倍諾喜,化學(xué)名稱為2-(二乙胺基)乙基-4-氨基-3-丁氧基苯甲酸酯鹽鹽酸鹽,主要應(yīng)用于眼科手術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的表面麻醉。本文研究了在日光或不同的p H值中滴眼液中鹽酸奧布卡因的含量隨時間的變化情況。以鹽酸奧布卡因作為水解底物,發(fā)現(xiàn)在丁酰膽堿酯酶存在下其水解成4-氨基-3-丁氧基安息香酸和二乙胺基乙醇。研究了鹽酸奧布卡因在丁酰膽堿酯酶存在下的藥物代謝動力學(xué)。以鹽酸奧布卡因為底物時,BCh E的米氏常數(shù)Km和最大反應(yīng)速率Vm分別為1.28×10-3 mol/L和3.3×10-6mol/L/min。
【關(guān)鍵詞】：毛細管電泳 電致化學(xué)發(fā)光 聯(lián)吡啶釕 阿奇霉素 人血清白蛋白 丁酰膽堿酯酶 鹽酸奧布卡因
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R917;O657
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 第1章 緒論11-18
• 1.1 毛細管電泳-電致化學(xué)發(fā)光聯(lián)用概述11
• 1.2 魯米諾發(fā)光體系11-12
• 1.3 Ru(bpy)_3~(2+)發(fā)光體系12-15
• 1.4 Ru(bpy)_3~(2+)的加入方式15
• 1.5 毛細管電泳-電致化學(xué)發(fā)光在藥物分析、生物分析領(lǐng)域的應(yīng)用15-16
• 1.6 展望16-18
• 第2章 包裹Ru(bpy)_3~(2+)的二氧化硅納米粒子探針研究阿奇霉素和人血清白蛋白的相互作用18-28
• 2.1 引言18-19
• 2.2 實驗部分19-20
• 2.2.1 儀器與試劑19
• 2.2.2 Ru(bpy)_3~(2+)修飾電極19-20
• 2.3 分析過程20-21
• 2.4 結(jié)果與討論21-27
• 2.4.1 RuDS修飾電極在阿奇霉素溶液中的ECL行為21
• 2.4.2 pH的優(yōu)化21-22
• 2.4.3 孵育和透析時間的優(yōu)化22-23
• 2.4.4 線性、檢出限和重現(xiàn)性23-24
• 2.4.5 阿奇霉素-HSA在生理條件下的結(jié)合參數(shù)24-26
• 2.4.6 阿奇霉素與HSA相互作用的結(jié)合位點26-27
• 2.5 結(jié)論27-28
• 第3章 毛細管電泳-電致化學(xué)發(fā)光方法表征丁酰膽堿酯酶活性28-38
• 3.1 引言28-29
• 3.2 實驗部分29-30
• 3.2.1 儀器與試劑29
• 3.2.2 CE-ECL分析29-30
• 3.2.3 酶促反應(yīng)過程30
• 3.2.4 樣品制備30
• 3.3 結(jié)果與討論30-35
• 3.3.1 線性、檢出限和重現(xiàn)性30-31
• 3.3.2 影響B(tài)ChE酶活性的主要因素31-34
• 3.3.3 米氏方程34-35
• 3.4 評估血漿膽堿酯酶活性的應(yīng)用35-37
• 3.5 結(jié)論37-38
• 第4章 鹽酸奧布卡因滴眼液的穩(wěn)定性及其代謝行為38-50
• 4.1 引言38-39
• 4.2 實驗部分39-41
• 4.2.1 試劑與儀器39-40
• 4.2.2 分離和檢測的優(yōu)化40
• 4.2.3 穩(wěn)定性試驗40
• 4.2.4 酶促反應(yīng)試驗40-41
• 4.3 結(jié)果與討論41-49
• 4.3.1 線性、檢出限和重現(xiàn)性41-42
• 4.3.2 穩(wěn)定性42-44
• 4.3.3 酶促反應(yīng)44-49
• 4.4 結(jié)論49-50
• 第5章 總結(jié)50-51
• 參考文獻51-66
• 致謝66-67
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文67

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本文編號：468076