黃芪注射液對(duì)香煙煙霧暴露COPD大鼠肺ICAM-1表達(dá)的影響
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【摘要】:背景和目的慢性阻塞性肺病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease, COPD)是一種常見的慢性呼吸系統(tǒng)病變,近年來,COPD的發(fā)病率和死亡率逐年升高。目前,尚缺乏有效的臨床干預(yù)手段。研究表明,黃芪可以提高機(jī)體免疫力,黃芪注射液已應(yīng)用于心腦血管病的臨床輔助治療。本研究擬通過觀察黃芪注射液干預(yù)的COPD大鼠肺呼吸功能參數(shù)指標(biāo)、組織形態(tài)學(xué)改變、ICAM-1在蛋白水平和mRNA水平表達(dá)的變化,探討黃芪注射液對(duì)COPD大鼠肺的保護(hù)作用及其對(duì)COPD大鼠肺ICAM-1表達(dá)的影響,為黃芪注射液在COPD臨床治療中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法1.動(dòng)物的分組選擇SD大鼠30只,隨機(jī)分為3組(10只/組):COPD組、黃芪組和對(duì)照組。2.動(dòng)物的處理和用藥:COPD組動(dòng)物的處理:10大鼠每日香煙煙霧暴露2次(30 min/次),持續(xù)暴露80d,制備COPD大鼠模型。黃芪組動(dòng)物的處理和用藥:用COPD組動(dòng)物相同方法制備COPD大鼠模型,期間,自第41d開始腹腔注射黃芪注射液(劑量:40mg·kg-1體重,1次/天)。正常對(duì)照組動(dòng)物的處理:10大鼠正常對(duì)照組飼養(yǎng),不做任何處理。3.各組大鼠呼吸功能的測(cè)定:第81d,分別用4%水合氯醛(10ml.kg-1)腹腔注射麻醉各組大鼠,仰臥位固定,用BL-420生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)記錄呼吸曲線30min。4.各組大鼠動(dòng)脈血氧分壓、動(dòng)脈血二氧化碳分壓的檢測(cè):取各組大鼠左心室血液,通過血?dú)夥治鰞x檢測(cè)各組大鼠的動(dòng)脈血氧分壓、動(dòng)脈血二氧化碳分壓。5.取肺組織標(biāo)本,HE染色結(jié)合光學(xué)顯微鏡觀察各組大鼠肺組織形態(tài)學(xué)的變化;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠肺組織勻漿中ICAM-1的含量;免疫組化SP法觀察各組大鼠肺組織ICAM-1蛋白水平表達(dá)的變化;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)觀察肺組織中ICAM-1 mRNA水平表達(dá)的變化。結(jié)果1.呼吸功能相關(guān)指標(biāo)的比較各組大鼠呼吸幅度的比較結(jié)果顯示:COPD組大鼠低于黃芪組大鼠(t=11.216,P=0.000),黃芪組大鼠低于對(duì)照組大鼠(t=10.104,P=0.000)。各組大鼠呼吸頻率的比較結(jié)果顯示:COPD組大鼠高于黃芪組大鼠(t=11.672,P=0.000),黃芪組大鼠與對(duì)照組大鼠相比無差異(t=3.925,P=0.000)。各組大鼠動(dòng)脈血氧分壓的比較結(jié)果顯示:COPD組大鼠低于黃芪組大鼠(t=9.337,P=0.000),黃芪組大鼠低于對(duì)照組大鼠(t=13.263,P=0.000)。各組大鼠動(dòng)脈血二氧化碳分壓的比較結(jié)果顯示:COPD組大鼠高于黃芪組大鼠(t=-16.112,P=0.000),黃芪組大鼠高于對(duì)照組大鼠(t=12.053,P=0.000)。2.HE染色結(jié)果顯示:對(duì)照組大鼠:支氣管、肺組織結(jié)構(gòu)清晰,支氣管粘膜上皮完整,肺泡大小均勻,肺泡間隔正常。COPD組大鼠:可見間質(zhì)增生,支氣管管腔狹窄,炎細(xì)胞浸潤、粘液性分泌物,肺泡腔擴(kuò)大,肺泡間隔變寬或中斷,甚至肺大泡。黃芪組大鼠:肺組織病理改變可見間質(zhì)增生但較COPD組大鼠輕,肺泡腔擴(kuò)大等表現(xiàn),肺泡間隔尚正常。3. ELISA結(jié)果顯示:黃芪組大鼠肺組織勻漿中ICAM-1含量低于COPD組大鼠比(t=15.233,P=0.000),對(duì)照組大鼠低于黃芪組大鼠(t=-12.108,P=0.000)。4.免疫組化染色結(jié)果顯示:黃芪組大鼠肺組織細(xì)胞ICAM-1表達(dá)低于COPD組大鼠(2=8.72,P=0.000),對(duì)照組大鼠低于黃芪組大鼠(x2=7.93,P=0.000)。5. RT-PCR結(jié)果顯示:黃芪組大鼠肺組織中ICAM-1 mRNA的表達(dá)與COPD組大鼠相比顯著降低(t=-18.022,P=-0.000),與對(duì)照組大鼠相比顯著增高(t=14.125,P=0.000)。結(jié)論黃芪注射液可以減少COPD大鼠肺ICAM-1的表達(dá),改善肺通氣和肺換氣,對(duì)呼吸功能具有保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】:黃芪注射液 香煙煙霧暴露 慢性阻塞性肺病 細(xì)胞粘附分子-1 呼吸功能
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R285.5
【目錄】:
- 摘要5-8
- Abstract8-11
- 前言11-12
- 1 材料與方法12-20
- 2 結(jié)果20-26
- 3 討論26-30
- 4 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-38
- 綜述:慢性阻塞性肺病發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展38-45
- 參考文獻(xiàn)42-45
- 附錄45-46
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況46-47
- 致謝47-48
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷48
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