本文關(guān)鍵詞：Sonic hedgehog信號通路在脂多糖所致小鼠急性肺損傷中的表達(dá)變化及意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討Sonic hedgehog (SHH)信號通路中的相關(guān)分子SHH、PTC、GLI1在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)所致的小鼠急性肺損傷(acute lung jinjury, ALI)中的表達(dá)變化及意義,為臨床上急性肺損傷的治療提供新的思路。方法：選擇5-7周齡、體質(zhì)量20-25g的雄性BALB/c小鼠作為實驗動物,并隨機(jī)分為對照組(腹腔注射等量生理鹽水)、LPS處理組(5mg/kg LPS腹腔注射)、環(huán)巴胺處理組(5mg/kg LPS腹腔注射后30min腹腔注射環(huán)巴胺50mg/kg)。分別于給藥后6h、12h、24h,戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后留取標(biāo)本,肉眼觀察肺組織大體改變,4%多聚甲醛固定后切片并HE染色觀察肺組織病理學(xué)改變,并做出病理損傷評分；取一肺葉60℃48h烘干后,測定肺組織濕干質(zhì)量比值(wet mass/dry mass, W/D);熒光實時定量PCR檢測不同處理組肺組織腫瘤壞死因子-α (turner necrosis factor-alpha, TNF-α)、SHH、PTC及下游轉(zhuǎn)錄因子GLI1的mRNA表達(dá)；Western blot檢測各處理組肺組織核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)、SHH和GLIl的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果：對照組肺組織光鏡下可見肺泡腔清晰、無明顯炎性細(xì)胞浸潤,病理損傷評分很低；LPS處理組肺組織肺泡充血水腫、肺泡隔明顯增厚,肺間質(zhì)廣泛炎性細(xì)胞浸潤,肺組織病理損傷評分明顯高于對照組(P0.01)；環(huán)巴胺處理組肺泡腔大范圍消失、肺組織大片實變、彌漫炎性細(xì)胞浸潤,各時間點(diǎn)肺組織病理損傷評分均較LPS處理組高(P0.05)。對照組在各時間點(diǎn)的W/D均較低,LPS處理組各時間點(diǎn)的W/D均較對照組高(6h、12h時P0.01,24h時P0.05),而環(huán)巴胺處理組的W/D在各時間點(diǎn)均高于LPS處理組(P0.05)。對照組TNF-α mRNA的表達(dá)在各時間點(diǎn)均較低,LPS處理組TNF-α mRNA的表達(dá)在各時間點(diǎn)均明顯高于對照組(P0.01),環(huán)巴胺處理組在12h、24h時TNF-αmRNA的表達(dá)較LPS處理組高(P0.05)。對照組NF-κB蛋白的表達(dá)很低,LPS處理組NF-κB的蛋白表達(dá)明顯高于對照組(6h、12h,P0.01；24h,P0.05),而環(huán)巴胺處理組NF-κB的蛋白表達(dá)較LPS處理組更高(P0.01)。對照組SHH.PTC.GLI1的mRNA表達(dá)水平均較低。LPS處理組在6h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)水平與對照組無明顯差異(P0.05),而在12h、24h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)均明顯高于對照組(P0.01),且與時間呈正相關(guān)(P0.01)。環(huán)巴胺處理組在6h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)與LPS處理組相比無明顯差異(P0.05),12h時SHH、PTC、GLI1的InRNA表達(dá)均較LPS處理組降低(P0.05),24h時其表達(dá)較LPS處理組明顯下降(SHH P0.01,PTC P0.05, GLI1P0.01)。對照組各時間點(diǎn)的SHH、GLI1蛋白表達(dá)均較低。與對照組相比,LPS處理組在6h、12h、24 h的SHH、GLI1蛋白表達(dá)水平均明顯升高(SHH 6h P0.05,12h.24h P0.01；GLIl各時間點(diǎn)P0.01),且與時間呈正相關(guān)(P0.01)。環(huán)巴胺處理組SHH. GLI1的蛋白表達(dá)水平均較LPS處理組降低(SHH P0.01, GLI1 P0.05)。結(jié)論：1.對照組SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)及SHH、GLI1的蛋白表達(dá)量均很低,SHH信號通路處于抑制狀態(tài),而LPS處理后12h、24h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)量及6h、12h、24h時SHH、GLI1的蛋白表達(dá)量均明顯高于對照組,提示在LPS所致的急性肺損傷中存在SHH信號通路的激活,表達(dá)量明顯增加。2.給予SHH信號通路的抑制劑環(huán)巴胺干預(yù)后,12h、24h時SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)量及SHH、GLI1的蛋白表達(dá)量均較單獨(dú)LPS處理組下降,提示SHH信號通路的表達(dá)受到抑制,而此時,環(huán)巴胺處理組的肺組織病理損傷評分、W/D、TNF-α mRNA和NF-κB蛋白的表達(dá)卻較單獨(dú)LPS處理SHH信號通路激活時更高,即SHH信號通路受抑制時的肺組織損傷程度較SHH信號通路激活時重,說明SHH信號通路受抑制可加重肺組織的損傷程度,提示SHH信號通路的激活可減輕肺組織損傷、參與肺組織損傷后修復(fù)過程。
【關(guān)鍵詞】：Sonic hedgehog信號通路 急性肺損傷 脂多糖 環(huán)巴胺
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號說明11-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-23
• 結(jié)果23-31
• 討論31-34
• 結(jié)論34-35
• 創(chuàng)新點(diǎn)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 文獻(xiàn)綜述41-55
• 參考文獻(xiàn)47-55
• 致謝55-56
• 發(fā)表學(xué)術(shù)論文目錄56-57
• 附件57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 涂自智,肖衛(wèi)民,劉梅冬,尢家

本文編號：422699