本文關(guān)鍵詞：Sonic hedgehog信號(hào)通路在脂多糖所致小鼠急性肺損傷中的表達(dá)變化及意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討Sonic hedgehog (SHH)信號(hào)通路中的相關(guān)分子SHH、PTC、GLI1在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)所致的小鼠急性肺損傷(acute lung jinjury, ALI)中的表達(dá)變化及意義,為臨床上急性肺損傷的治療提供新的思路。方法：選擇5-7周齡、體質(zhì)量20-25g的雄性BALB/c小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,并隨機(jī)分為對(duì)照組(腹腔注射等量生理鹽水)、LPS處理組(5mg/kg LPS腹腔注射)、環(huán)巴胺處理組(5mg/kg LPS腹腔注射后30min腹腔注射環(huán)巴胺50mg/kg)。分別于給藥后6h、12h、24h,戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后留取標(biāo)本,肉眼觀察肺組織大體改變,4%多聚甲醛固定后切片并HE染色觀察肺組織病理學(xué)改變,并做出病理?yè)p傷評(píng)分；取一肺葉60℃48h烘干后,測(cè)定肺組織濕干質(zhì)量比值(wet mass/dry mass, W/D);熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)不同處理組肺組織腫瘤壞死因子-α (turner necrosis factor-alpha, TNF-α)、SHH、PTC及下游轉(zhuǎn)錄因子GLI1的mRNA表達(dá)；Western blot檢測(cè)各處理組肺組織核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)、SHH和GLIl的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果：對(duì)照組肺組織光鏡下可見(jiàn)肺泡腔清晰、無(wú)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn),病理?yè)p傷評(píng)分很低；LPS處理組肺組織肺泡充血水腫、肺泡隔明顯增厚,肺間質(zhì)廣泛炎性細(xì)胞浸潤(rùn),肺組織病理?yè)p傷評(píng)分明顯高于對(duì)照組(P0.01)；環(huán)巴胺處理組肺泡腔大范圍消失、肺組織大片實(shí)變、彌漫炎性細(xì)胞浸潤(rùn),各時(shí)間點(diǎn)肺組織病理?yè)p傷評(píng)分均較LPS處理組高(P0.05)。對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)的W/D均較低,LPS處理組各時(shí)間點(diǎn)的W/D均較對(duì)照組高(6h、12h時(shí)P0.01,24h時(shí)P0.05),而環(huán)巴胺處理組的W/D在各時(shí)間點(diǎn)均高于LPS處理組(P0.05)。對(duì)照組TNF-α mRNA的表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)均較低,LPS處理組TNF-α mRNA的表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)均明顯高于對(duì)照組(P0.01),環(huán)巴胺處理組在12h、24h時(shí)TNF-αmRNA的表達(dá)較LPS處理組高(P0.05)。對(duì)照組NF-κB蛋白的表達(dá)很低,LPS處理組NF-κB的蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組(6h、12h,P0.01；24h,P0.05),而環(huán)巴胺處理組NF-κB的蛋白表達(dá)較LPS處理組更高(P0.01)。對(duì)照組SHH.PTC.GLI1的mRNA表達(dá)水平均較低。LPS處理組在6h時(shí)SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)水平與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P0.05),而在12h、24h時(shí)SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)均明顯高于對(duì)照組(P0.01),且與時(shí)間呈正相關(guān)(P0.01)。環(huán)巴胺處理組在6h時(shí)SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)與LPS處理組相比無(wú)明顯差異(P0.05),12h時(shí)SHH、PTC、GLI1的InRNA表達(dá)均較LPS處理組降低(P0.05),24h時(shí)其表達(dá)較LPS處理組明顯下降(SHH P0.01,PTC P0.05, GLI1P0.01)。對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)的SHH、GLI1蛋白表達(dá)均較低。與對(duì)照組相比,LPS處理組在6h、12h、24 h的SHH、GLI1蛋白表達(dá)水平均明顯升高(SHH 6h P0.05,12h.24h P0.01；GLIl各時(shí)間點(diǎn)P0.01),且與時(shí)間呈正相關(guān)(P0.01)。環(huán)巴胺處理組SHH. GLI1的蛋白表達(dá)水平均較LPS處理組降低(SHH P0.01, GLI1 P0.05)。結(jié)論：1.對(duì)照組SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)及SHH、GLI1的蛋白表達(dá)量均很低,SHH信號(hào)通路處于抑制狀態(tài),而LPS處理后12h、24h時(shí)SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)量及6h、12h、24h時(shí)SHH、GLI1的蛋白表達(dá)量均明顯高于對(duì)照組,提示在LPS所致的急性肺損傷中存在SHH信號(hào)通路的激活,表達(dá)量明顯增加。2.給予SHH信號(hào)通路的抑制劑環(huán)巴胺干預(yù)后,12h、24h時(shí)SHH、PTC、GLI1的mRNA表達(dá)量及SHH、GLI1的蛋白表達(dá)量均較單獨(dú)LPS處理組下降,提示SHH信號(hào)通路的表達(dá)受到抑制,而此時(shí),環(huán)巴胺處理組的肺組織病理?yè)p傷評(píng)分、W/D、TNF-α mRNA和NF-κB蛋白的表達(dá)卻較單獨(dú)LPS處理SHH信號(hào)通路激活時(shí)更高,即SHH信號(hào)通路受抑制時(shí)的肺組織損傷程度較SHH信號(hào)通路激活時(shí)重,說(shuō)明SHH信號(hào)通路受抑制可加重肺組織的損傷程度,提示SHH信號(hào)通路的激活可減輕肺組織損傷、參與肺組織損傷后修復(fù)過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】：Sonic hedgehog信號(hào)通路 急性肺損傷 脂多糖 環(huán)巴胺
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R563
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號(hào)說(shuō)明11-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-23
• 結(jié)果23-31
• 討論31-34
• 結(jié)論34-35
• 創(chuàng)新點(diǎn)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 文獻(xiàn)綜述41-55
• 參考文獻(xiàn)47-55
• 致謝55-56
• 發(fā)表學(xué)術(shù)論文目錄56-57
• 附件57

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 涂自智,肖衛(wèi)民,劉梅冬,尢家

本文編號(hào)：422699