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解脲脲原體感染對大鼠生殖細(xì)胞的影響及干預(yù)治療的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-04 02:07

  本文關(guān)鍵詞:解脲脲原體感染對大鼠生殖細(xì)胞的影響及干預(yù)治療的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討解脲脲原體(Ureaplasma urealyticum,UU)對生殖細(xì)胞的影響及抗生素治療對解脲脲原體感染的作用。為探討UU導(dǎo)致男性不育的機(jī)制提供依據(jù)及為臨床治療男性不育提供新思路。方法:(1)選用清潔級成年SD大鼠,隨機(jī)分為對照組、7天組、14天組和治療組,對照組24只大鼠,其余各組12只。7天組、14天組和治療組每只大鼠經(jīng)膀胱注射0.6ml的107CCU/ml UU菌液,對照組給予等體積的UU液體培養(yǎng)基。治療組于注射后第七天給予美滿霉素灌胃治療。對照組和7天組于注射后7天,對照組、14天組和治療組于注射后14天,分別用20%烏拉坦麻醉大鼠后打開腹腔,獲取血液及睪丸組織進(jìn)行研究。(2)用電子天平稱取大鼠左右側(cè)睪丸的重量。(3)提取各組睪丸組織DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增UU特異性的脲酶基因片段,瓊脂糖電泳檢測。(4)各組睪丸組織用Bouin’s固定液固定16~18小時(shí),HE染色觀察睪丸組織病理變化;TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡;免疫組化法檢測凋亡蛋白Bak、Bax、Fas L。(5)用化學(xué)發(fā)光法檢測各組大鼠血漿及睪丸間質(zhì)液中睪酮水平。(6)各組睪丸組織用2%戊二醛固定2小時(shí)以上,透射電鏡觀察睪丸生精細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:(1)UU感染后,在7天組、14天組和治療組大鼠的睪丸組織中檢測到UU特異性脲酶基因片段,而對照組未見。(2)UU感染7天組大鼠的睪丸重量稍低于其它各組,然而各組間睪丸的重量并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)HE染色顯示7天組和14天組大鼠的睪丸組織呈炎癥性病理變化,曲細(xì)精管生精細(xì)胞層次和數(shù)量減少,基底膜破壞,炎細(xì)胞浸潤,成熟精子減少,但14天組睪丸組織炎癥性病變較7天組輕,而治療組睪丸組織結(jié)構(gòu)接近正常。(4)UU感染后,7天組大鼠睪丸間質(zhì)液中睪酮水平明顯低于其它各組(P0.01),14天組、治療組和對照組之間睪酮水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)UU感染后,7天組和14天組大鼠血漿中睪酮水平明顯低于對照組和治療組(P0.01),14天組血漿中睪酮水平高于7天組(P0.05)。(6)TUNEL法檢測發(fā)現(xiàn),7天組、14天組和治療組大鼠生精細(xì)胞凋亡率較對照組明顯升高(P0.01);與治療組相比,7天組和14天組生精細(xì)胞凋亡率均明顯升高(P0.01),且7天組生精細(xì)胞凋亡率明顯高于14天組(P0.01)。(7)透射電鏡檢測發(fā)現(xiàn),UU感染7天組和14天組生精細(xì)胞的細(xì)胞核染色質(zhì)出現(xiàn)濃縮、聚集化等凋亡表現(xiàn),7天組生精細(xì)胞核膜皺縮,細(xì)胞核破裂,14天組細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮、聚集化有減輕的趨勢。治療組生精細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)較為完整。(8)免疫組化檢測大鼠睪丸組織的凋亡蛋白Bak、Bax、Fas L發(fā)現(xiàn):7天組、14天組和治療組Bak蛋白均較對照組明顯升高(P0.01),且7天組和14天組Bak蛋白表達(dá)均高于治療組(P0.01或P0.05);與對照組和治療組相比,7天組和14天組Bax蛋白表達(dá)均明顯升高(P0.01),且7天組明顯高于14天組(P0.05);與對照組相比,7天組、14天組和治療組Fas L蛋白表達(dá)均升高(P0.01或P0.05),但7天組和14天組的Fas L蛋白表達(dá)高于治療組(P0.01或P0.05),且7天組明顯高于14天組(P0.01)。結(jié)論:(1)UU感染可導(dǎo)致大鼠睪丸組織出現(xiàn)病理性改變。(2)UU感染可導(dǎo)致大鼠睪丸組織生精細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率及凋亡蛋白表達(dá)升高,表明UU感染能夠誘導(dǎo)生精細(xì)胞發(fā)生凋亡。(3)UU感染可降低大鼠睪丸間質(zhì)液及血漿中睪酮水平,表明UU感染可能與男性不育有關(guān)。(4)UU感染后經(jīng)抗生素干預(yù)治療有助于減輕睪丸組織炎癥性病理損傷,減少生精細(xì)胞的凋亡和提高睪酮水平。
【關(guān)鍵詞】:解脲脲原體 生精細(xì)胞 凋亡 睪酮
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R698.2
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-10
  • 引言10-14
  • 材料與方法14-21
  • 結(jié)果21-29
  • 討論29-35
  • 結(jié)論35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-40
  • 致謝40-41
  • 附錄A:英中文術(shù)語縮略語對照表41-42
  • 附錄B:常用試劑配制42-43
  • 附錄C:個(gè)人簡歷43
  • 附錄D:已發(fā)表的論文43-44
  • 附錄E:綜述44-52
  • 參考文獻(xiàn)50-52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 徐志喜,李鐵強(qiáng),白慧玲,趙粵萍,馬遠(yuǎn)方,張軍,許國強(qiáng),李秀敏;解脲支原體感染對精液及精子膜功能完整性的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年02期

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3 趙偉;孫國志;;不同種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物間用藥量換算[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;2010年05期

4 楊毅堅(jiān);金維捷;黃敏;董保福;;中醫(yī)藥治療精液不液化癥的近況[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2008年12期

5 黃文強(qiáng);范宇平;胡燁;潘家坪;阮井玲;滕曉明;;解脲脲原體感染與精子形態(tài)學(xué)相關(guān)性研究[J];診斷學(xué)理論與實(shí)踐;2014年04期


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本文編號:419736

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