目的:新生兒缺血缺氧性腦病(HIE)是新生兒期比較常見的合并癥,由宮內(nèi)窘迫,新生兒窒息,肺透明膜病等眾多原因產(chǎn)生,是造成嬰兒死亡和神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的主要因素。在早產(chǎn)兒中,HIE發(fā)病率高達(dá)60%。而其中,90%的發(fā)病患者患有長期神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙,包括神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育遲緩,癲癇,學(xué)習(xí)認(rèn)知功能障礙,運動功能障礙等。然而,現(xiàn)階段對于HIE的治療主要集中于急性期的對癥治療包括機械通氣,降溫,高壓氧療法以及損傷后的康復(fù)治療等,其效果并不令人滿意。我們?nèi)允中枰环N能夠逆轉(zhuǎn)或減輕遠(yuǎn)期腦損傷的治療手段。隨著吸入麻醉藥在嬰幼兒手術(shù)中的廣泛應(yīng)用,麻醉藥的腦保護(hù)作用受到關(guān)注。作為擁有多種藥理功能的臨床常用藥物,吸入麻醉藥如異氟醚和七氟醚,能夠提高缺血腦組織對低氧的耐受性。七氟醚作為一種新生兒臨床手術(shù)常用的吸入麻醉藥,具有呼吸道刺激性小,麻醉深度易調(diào)節(jié)等優(yōu)點。隨著吸入麻醉藥器官保護(hù)作用的深入研究,七氟醚的預(yù)處理和后處理都已被證實具有神經(jīng)保護(hù)作用。然而由于HIE發(fā)病的不可預(yù)見性,后處理的臨床意義相對更佳。已有研究表明,七氟醚后處理能夠減少腦梗死容積,抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡,促進(jìn)海馬神經(jīng)元再生。課題組前期實驗研究顯示,在缺血...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 七氟醚后處理對HIBI后膠質(zhì)瘢痕及遠(yuǎn)期學(xué)習(xí)記憶功能的影響
    1 前言
    2 材料方法
        2.1 主要儀器和試劑
            2.1.1 主要儀器設(shè)備
            2.1.2 主要試劑
        2.2 實驗動物模型與分組
            2.2.1 實驗動物
            2.2.2 實驗分組
            2.2.3 HIBI模型制備
            2.2.4 麻醉處理
        2.3 神經(jīng)行為學(xué)測試
            2.3.1 曠場試驗Openfieldtest,OFT
            2.3.2 懸吊試驗Suspension test
            2.3.3 水迷宮測試Morris water maze tests MWM
        2.4 Westernblot蛋白分析
            2.4.1 蛋白提取
            2.4.2 BCA法測定蛋白濃度及蛋白變性
            2.4.3 配膠及電泳
            2.4.4 轉(zhuǎn)膜、封閉及一抗孵育
            2.4.5 二抗孵育及顯影
        2.5 海馬組織病理學(xué)觀察
            2.5.1 尼氏染色Nisslstaining
            2.5.2 高爾基染色Golgi staining
        2.6 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 造模后各組死亡率及體重
        3.2 七氟醚改善HIBI后大鼠神經(jīng)行為學(xué)功能
            3.2.1 對自主活動能力和焦慮情緒的影響
            3.2.2 對感覺運動的影響
            3.2.3 對空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響
        3.3 七氟醚改善HIBI后大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元密度及樹突棘密度
        3.4 七氟醚改善HIBI后海馬區(qū)突觸相關(guān)蛋白的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分: 七氟醚后處理減輕膠質(zhì)瘢痕水平與HIF-1α蛋白的關(guān)系
    1 前言
    2 材料方法
        2.1 主要儀器和試劑
            2.1.1 主要儀器設(shè)備
            2.1.2 主要試劑
        2.2 實驗動物模型與分組
            2.2.1 實驗動物
            2.2.2 實驗分組
            2.2.3 HIBI模型制備
            2.2.4 麻醉處理
            2.2.5 藥物注射
        2.3 神經(jīng)行為學(xué)測試
            2.3.1 曠場試驗Openfieldtest,OFT
            2.3.2 懸吊試驗Suspension test
            2.3.3 水迷宮測試Morris water maze tests MWM
        2.4 Westernblot蛋白分析
            2.4.1 蛋白提取
            2.4.2 BCA法測定蛋白濃度及蛋白變性
            2.4.3 配膠及電泳
            2.4.4 轉(zhuǎn)膜、封閉及一抗孵育
            2.4.5 二抗孵育及顯影
        2.5 海馬病理學(xué)觀察
            2.5.1 尼氏染色Nisslstaining
            2.5.2 高爾基染色Golgistaining
        2.6 免疫熒光雙染
        2.7 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果
        3.1 造模后各組死亡率及體重
        3.2 七氟醚處理后HIF-1α表達(dá)水平變化
        3.3 七氟醚改善HIBI后大鼠神經(jīng)行為學(xué)功能
            3.3.1 對自主活動能力和焦慮情緒的影響
            3.3.2 對感覺運動的影響
            3.3.3 對空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響
        3.4 對大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元密度及CA1區(qū)樹突棘密度
        3.5 對海馬區(qū)突觸相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        3.6 免疫熒光雙染
            3.6.1 缺血缺氧后及七氟醚后處理后星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元形態(tài)
            3.6.2 缺血缺氧后及七氟醚后處理后膠質(zhì)瘢痕形態(tài)
    4. 討論
    5. 結(jié)論
第三部分: 七氟醚后處理通過調(diào)節(jié)DJ-1蛋白抑制HIF-1α泛素化過程改善腦內(nèi)膠質(zhì)瘢痕形成
    1 前言
    2 材料方法
        2.1 主要儀器和試劑
            2.1.1 主要儀器設(shè)備
            2.1.2 主要試劑
        2.2 實驗動物模型與分組
            2.2.1 實驗動物
            2.2.2 實驗分組
            2.2.3 HIBI模型制備
            2.2.4 麻醉處理
            2.2.5 藥物注射
        2.3 Westernblot蛋白分析
            2.3.1 蛋白提取
            2.3.2 BCA法測定蛋白濃度及蛋白變性
            2.3.3 配膠及電泳
            2.3.4 轉(zhuǎn)膜、封閉及一抗孵育
            2.3.5 二抗孵育及顯影
        2.4 Realtime PCR檢測
        2.5 統(tǒng)計學(xué)分析
    3. 結(jié)果
        3.1 造模后各組死亡率及體重
        3.2 HIBI后HIF-1αmRNA水平變化
        3.3 DJ-1/VHL蛋白水平變化與膠質(zhì)瘢痕的關(guān)系
    4. 討論
    5. 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3852119