本文關(guān)鍵詞：β3腎上腺素能受體通過降低鈣敏感性介導(dǎo)大鼠心臟的負(fù)性肌力作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1、結(jié)扎大鼠心臟冠狀動脈前降支,造成心肌梗死,繼而發(fā)生缺血性心力衰竭。2、在用普萘洛爾(Propranolol)阻斷β1和β2受體的前提下,通過研究β3受體激動劑BRL37344(BRL)和拮抗劑SR59230A(SR)對正常大鼠和心衰心臟功能的影響,觀察β3受體在心臟中所起的作用;3、急性分離心衰大鼠心肌細(xì)胞,給予β3受體激動劑BRL37344(BRL)和拮抗劑SR59230A(SR)通過測定單個心肌細(xì)胞收縮力和鈣瞬變,分析鈣敏感性對心肌細(xì)胞的影響,探討β3受體在正常和心衰大鼠心臟中的作用和影響。再進(jìn)一步給予一氧化氮合酶(NOS)阻斷劑L-NAME,分析β3受體在心力衰竭中可能的信號通路。方法:1、100只雄性SD(Sprigue Dawley)大鼠(體重180-220g),隨機分成假手術(shù)組(n=30)和心臟衰竭組(n=70)。手術(shù)前給大鼠腹腔注射10%的水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉,待其麻醉后打開胸腔,結(jié)扎冠狀動脈。術(shù)前記錄正常心電圖,術(shù)中持續(xù)心電圖監(jiān)測。手術(shù)完成后連續(xù)3天腹腔注射20萬單位的青霉素,預(yù)防傷口感染。假手術(shù)組用同樣的方法打開胸腔但冠脈不予結(jié)扎,其余的操作同手術(shù)組。四周后假手術(shù)組和心衰組再隨機分成BRL37344組和SR59230A組。2、將離體心臟連接Langendorff灌流裝置,用1.8m M的有鈣臺式液(Tyrode’s Solution)以95%O2和5%O2充分飽和,灌注壓60mm Hg,溫度39℃,p H7.38。實驗過程中給予相關(guān)藥物,測量分析左室收縮壓(LVSP)、左室舒張壓(LVEDP)、左室等容收縮期室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)和左室等容舒張期室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax),用Lab Chart分析軟件分析相應(yīng)數(shù)據(jù)。3、分別剪取假手術(shù)組和手術(shù)組大鼠左心室前壁結(jié)扎區(qū)域邊緣部分和周圍部分,迅速將組織放入福爾馬林溶液中。石蠟包埋,切片厚度5um,再經(jīng)過脫蠟、抗原修復(fù)、加兔抗鼠anti-β3受體一抗、二抗試劑盒、加SABC封閉以及DAB顯色劑顯色后觀察β3受體的表達(dá)。4、急性分離新鮮的單個心肌細(xì)胞,避光條件下負(fù)載熒光染料fura-2 AM,用有鈣臺式液(1.5mmol/L)灌流。然后用Ion Optix離子影像系統(tǒng)同步測量單個心肌細(xì)胞收縮力和鈣瞬變。細(xì)胞收縮力可用bl%peak h(肌小結(jié)相對縮短幅度)、dep v(最大收縮速率)、ret v(肌小結(jié)最大舒張速率)表示;鈣瞬變以ΔCa(F340/380熒光信號比值的變化幅度)、+d[Ca]/dtmax(收縮期鈣最大上升速度)、-d[Ca]/dtmax(舒張期鈣最大下降速度)表示;鈣敏感性用Ca S(鈣瞬變幅度和收縮幅度的比值)表示。結(jié)果:1、與假手術(shù)組相比:四周、八周、十二周后心衰組大鼠心質(zhì)量指數(shù)(HW/BW)和左心質(zhì)量指數(shù)(LVW/BW)均有明顯升高(P0.05),左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)和左室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)均明顯增大(P0.05),左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和短軸縮短率(LVFS)均明顯減小(P0.05)。2、HE染色可觀察到假手術(shù)組大鼠左心室前壁心肌細(xì)胞基本排列緊密,未見心肌損傷現(xiàn)象。手術(shù)組左心室前壁結(jié)扎處有一部分心肌細(xì)胞壞死,細(xì)胞間隙擴張,細(xì)胞有輕到中度肥大,有膠原纖維增生變粗,且有血管增生現(xiàn)象。3、免疫組織化學(xué)法檢測,鏡下可看到手術(shù)組大鼠左心室前壁心肌組織中靠近細(xì)胞膜表面附近有較多量的β3受體的表達(dá),有些細(xì)胞的胞漿中也可見到其表達(dá)。4、假手術(shù)BRL組和心衰BRL組的心率(HR)、左心室收縮壓(LVSP)、左室等容收縮期室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)及左室等容舒張期室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)的絕對值均有明顯降低(P0.05),左心室舒張壓(LVEDP)明顯升高(P0.05);假手術(shù)SR組和心衰SR組均無明顯變化。5、急性分離的單個心衰大鼠的心肌細(xì)胞,激動β3受體后肌小節(jié)收縮幅度(bl%peak h)、鈣瞬變(F340/380)幅度均明顯下降(P0.05),鈣敏感性降低(P0.05)。6、急性分離的單個心衰大鼠心肌細(xì)胞,給予NOS的阻斷劑L-NAME后,心肌肌小節(jié)收縮幅度(bl%peak h)、鈣瞬變(F340/380)幅度均不再下降,鈣敏感性增強(P0.05),說明NOS信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和β3受體有關(guān)。結(jié)論:心衰大鼠心臟β3受體表達(dá)顯著增加。阻斷β1和β2腎上腺素能受體,給予BRL37344后大鼠的心臟功能受到抑制;心衰大鼠給予BRL37344后心臟負(fù)性肌力作用更明顯。激動β3受體使心肌細(xì)胞收縮幅度、鈣瞬變幅度和鈣敏感性降低;β3受體降低心肌細(xì)胞收縮、鈣瞬變和鈣敏感性的作用與NOS信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：心臟衰竭 β3腎上腺素能受體 Ca2+
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R54
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 常用縮寫詞中英文對照表12-13
• 前言13-15
• 第一部分 制作衰竭心臟模型并觀察 β3 受體對心臟功能的影響15-26
• 1 材料和方法15-19
• 1.1 試劑和儀器15-16
• 1.2 實驗分組16
• 1.3 實驗方法16-18
• 1.4 統(tǒng)計結(jié)果分析18-19
• 2 結(jié)果19-26
• 2.1 兩組大鼠超聲心動圖19-20
• 2.2 兩組大鼠心質(zhì)量指數(shù)HW/BW和左心室質(zhì)量指數(shù)LVW/BW20
• 2.3 假手術(shù)組和手術(shù)組大鼠心肌組織形態(tài)學(xué)特點20-21
• 2.4 左心室功能測定21-26
• 第二部分 β3 受體介導(dǎo)心臟的負(fù)性變力作用與NOS信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有關(guān)26-38
• 1 材料和方法26-31
• 1.1 試劑和儀器26-27
• 1.2 實驗分組27-28
• 1.3 實驗方法28-30
• 1.4 統(tǒng)計結(jié)果分析30-31
• 2 結(jié)果31-38
• 2.1 免疫組織化學(xué)法檢測兩組大鼠心臟 β3 受體的表達(dá)31-33
• 2.2 測定單個心肌細(xì)胞肌小節(jié)的收縮力33-35
• 2.3 單個心肌細(xì)胞的鈣瞬變和鈣敏感性35-38
• 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 綜述44-55
• 參考文獻(xiàn)50-55
• 致謝55-56
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果56-57
• 個人簡歷57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 田穎,李為民,孔一慧;β_3受體激動劑BRL-37344促進(jìn)大鼠心力衰竭及可能的作用機制[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2005年06期

2 姜東林;姜升陽;孫鈞銘;許婷姝;;β3腎上腺素能受體的心血管調(diào)節(jié)與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J];中國微循環(huán);2008年01期

  本文關(guān)鍵詞：β3腎上腺素能受體通過降低鈣敏感性介導(dǎo)大鼠心臟的負(fù)性肌力作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：382811