本文關(guān)鍵詞：藤茶活性成分二氫楊梅素干預(yù)兔WAMD的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:評價激光誘導(dǎo)日本大耳白兔濕性年齡相關(guān)性黃斑變性(Wet age-related maculardegeneration,WAMD)的可行性;探討藤茶活性成分二氫楊梅素(Dihydromyricetin,DMY)對WAMD的影響。方法:532nm激光對成年日本大耳白兔眼底進(jìn)行光凝,創(chuàng)建WAMD模型。光凝后4-12周麻醉動物,行眼底熒光血管造影(FFA),光凝區(qū)光學(xué)相干斷層掃描檢查(OCT),酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測兔外周血中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)情況。DMY(100 mg DMY?kg-1?d-1)灌胃給藥,ELISA檢測外周血和房水中VEGF和PEDF水平;實(shí)時熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和色素上皮細(xì)胞衍生因子(Pigment epithelium-derived factor,PEDF)mRNA表達(dá)情況;HE染色檢測脈絡(luò)膜新生血管(Choroidal neovascularization,CNV);實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,解剖實(shí)驗(yàn)動物,分別計算肝臟、腎臟和脾臟指數(shù)。結(jié)果:光凝4-12周后,FFA顯示兔眼光斑部視網(wǎng)膜可見點(diǎn)狀熒光;OCT圖像顯示光斑部視網(wǎng)膜色素上皮層斷裂;外周血VEGF有不同程度的增加。給藥4周,模型組外周血VEGF降低幅度為63.3%,而模型對照組降低幅度為48.6%;給藥8周,模型組外周血VEGF降低幅度為46.7%,模型對照組降低幅度為20.1%。給藥8周模型組日本大耳白兔房水VEGF濃度為2271.4 ng/L,而模型對照組房水中VEGF濃度為2967.5 ng/L。給藥4周,模型組外周血PEDF降低幅度為55.9%,而模型對照組降低幅度為58.6%;給藥8周,模型組外周血PEDF降低幅度為12.1%,模型對照組降低幅度為53.1%。給藥8周,模型組大耳白兔房水PEDF濃度為195.1μg/L,而模型對照組房水中PEDF濃度為153.3μg/L。給藥8周,模型組VEGF mRNA的表達(dá)量顯著低于模型對照組(P〈0.01),其表達(dá)量分別是正常對照的0.5倍和13.9倍;模型組PEDF mRNA的表達(dá)量,顯著低于模型對照組(P〈0.01),其表達(dá)量分別是正常對照的1.7倍和4.8倍。給藥8周,模型對照組(未給藥組)可見明顯CNV,而模型給藥組未見明顯CNV。給藥8周,模型組肝臟指數(shù)和脾臟指數(shù)低于模型對照組(P=0.147和P=0.223),模型組腎臟指數(shù)與模型對照組沒有明顯差異(P=0.874)。結(jié)論:倍頻532 nm激光光凝(功率900mW,時間0.1 s)日本大耳白兔眼底能有效誘導(dǎo)CNV形成,發(fā)展血管滲漏,成功建立兔WAMD模型。DMY下調(diào)VEGF蛋白表達(dá)與其下調(diào)VEGF-mRNA表達(dá)趨勢一致;而DMY上調(diào)PEDF蛋白表達(dá)與其下調(diào)PEDF-mRNA表達(dá)趨勢不一致。DMY具有一定的抑制WAMD模型日本大耳白兔CNV生長的藥理作用,其作用機(jī)制可能與其下調(diào)VEGF的表達(dá)、上調(diào)PEDF表達(dá)和益氣活血、健脾疏肝有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：濕性年齡相關(guān)性黃斑變性 脈絡(luò)膜新生血管 藤茶 二氫楊梅素
【學(xué)位授予單位】：湖北民族學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 縮略詞表7-10
• 第一章 前言10-19
• 1 AMD的介紹10
• 2 CNV的介紹10-11
• 3 CNV的誘導(dǎo)方法11
• 3.1 激光光凝11
• 3.2 Matrigel法11
• 4 CNV的檢查方法11-15
• 4.1 眼底血管造影11-12
• 4.2 光學(xué)相干斷層掃描12
• 4.3 組織學(xué)觀察12-13
• 4.4 熒光素標(biāo)記脈絡(luò)膜血管平鋪13-14
• 4.5 血管內(nèi)皮生長因子檢測14-15
• 5 藤茶以及二氫楊梅素15-17
• 5.1 DMY 的生理作用研究15-17
• 6 研究意義17-19
• 第二章 日本大耳白兔WAMD模型的建立19-25
• 1 實(shí)驗(yàn)材料19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物19
• 1.2 試劑19
• 1.3 儀器19
• 2 實(shí)驗(yàn)方法19-21
• 2.1 激光光凝AMD造模19-20
• 2.2 熒光眼底血管造影20
• 2.3 相干光斷層掃描20
• 2.4 VEGF因子檢測20-21
• 3 結(jié)果21-23
• 3.1WAMD模型兔的FFA觀察21
• 3.2 WAMD模型兔的OCT觀察21-22
• 3.3 WAMD模型兔血清VEGF因子檢測22-23
• 4 討論23-25
• 第三章 藤茶活性成分DMY對兔WAMD的影響25-42
• 1 實(shí)驗(yàn)材料25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物25
• 1.2 試劑25
• 1.3 儀器25
• 2 實(shí)驗(yàn)方法25-28
• 2.1 激光光凝AMD造模25-26
• 2.2 試驗(yàn)動物分組和處理26
• 2.3 VEGF和PEDF因子mRNA的Real-time PCR檢測26-27
• 2.4 VEGF和PEDF因子檢測27
• 2.5 HE染色觀察CNV27-28
• 3 結(jié)果28-37
• 3.1 藤茶活性成分DMY對WAMD兔VEGF因子的影響28-30
• 3.2 藤茶活性成分DMY對WAMD兔PEDF因子的影響30-32
• 3.3 藤茶活性成分DMY對WAMD兔VEGF和PEDF-mRNA表達(dá)的影響32-35
• 3.4 HE染色觀察DMY對WAMD模型兔脈絡(luò)膜的影響35
• 3.5 DMY對WAMD模型兔主要肝、腎和脾指數(shù)的影響35-37
• 4 討論37-42
• 4.1 AMD治療方法的選擇37-39
• 4.2 DMY對WAMD模型兔VEGF和PEDF蛋白表達(dá)水平的影響39-40
• 4.3 DMY對WAMD模型兔VEGF和PEDF mRNA表達(dá)水平的影響40-41
• 4.4 DMY治療WAMD的有效性評價41-42
• 參考文獻(xiàn)42-48
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章48-49
• 致謝49

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：藤茶活性成分二氫楊梅素干預(yù)兔WAMD的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：374065