發(fā)布時(shí)間：2017-05-16 22:07

  本文關(guān)鍵詞：骨痹合劑對(duì)大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型IL-1β、TNF-α表達(dá)的影響及其頸椎退變的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:復(fù)制一種與人類膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病過(guò)程相似的去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型[1-3]。觀察骨痹合劑對(duì)該模型IL-1β和TNF-α表達(dá)的影響,同時(shí)探討該模型大鼠頸椎退變的可能作用機(jī)制。方法:選用懷孕15日齡的SD大鼠12只,分別置于不同的籠子中飼養(yǎng),把出生第10天的40只幼鼠,按體重大小排序后隨機(jī)分為四組,分別為空白對(duì)照組、生理鹽水組、氨糖美辛組、骨痹合劑組,每組10只。四組均在腹腔麻醉下手術(shù)去除雙前肢,手術(shù)后置于原母鼠飼養(yǎng)籠內(nèi)繼續(xù)飼養(yǎng),再去除雙前肢四個(gè)月后右膝關(guān)節(jié)行Hulth法手術(shù)。骨痹合劑組按0.5m L/100g體重給予骨痹合劑灌胃;氨糖美辛組給予氨糖美辛腸溶片2mg/100g,置于同體積的蒸餾水中待其融化搖勻后,給予灌胃;生理鹽水組按0.5ml/100g體重給予生理鹽水灌胃;空白對(duì)照組不做任何干預(yù),持續(xù)4周時(shí)間為干預(yù)過(guò)程。然后麻醉處死相對(duì)應(yīng)的各組大鼠,取下右膝關(guān)節(jié)、頸椎通過(guò)固定、脫鈣、脫水、包埋、切片、撈片、烤片,行HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、藏紅固綠染色及IL-1β、TNF-α免疫組化檢測(cè)。結(jié)果:(1)右膝關(guān)節(jié)HE染色、藏紅固綠染色、甲苯胺藍(lán)染色三種染色中空白對(duì)照組、生理鹽水組較氨糖美辛組、骨痹合劑組的關(guān)節(jié)軟骨表層欠光滑,部分關(guān)節(jié)表面出現(xiàn)了斷裂和裂隙,軟骨細(xì)胞分布不均勻且排序不整齊,軟骨細(xì)胞各層次模糊,可見(jiàn)細(xì)胞簇集現(xiàn)象,潮線不完整,局部染色不均勻,關(guān)節(jié)軟骨部分淡染失染。IL-1β和TNF-α免疫組化染色顯示空白對(duì)照組和生理鹽水組較氨糖美辛組、骨痹合劑組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率高。(2)頸椎HE染色、藏紅固綠染色、甲苯胺藍(lán)染色三種染色中空白對(duì)照組、生理鹽水組較氨糖美辛組、骨痹合劑組軟骨終板細(xì)胞分布不均勻,排列不整齊,軟骨各層次模糊,并可見(jiàn)細(xì)胞簇集現(xiàn)象,局部染色不均勻,出現(xiàn)淡然失染現(xiàn)象。纖維環(huán)排列不規(guī)則紊亂,部分出現(xiàn)斷裂和裂隙,髓核皺縮,椎間盤(pán)內(nèi)積氣,出現(xiàn)“真空現(xiàn)象”。結(jié)論:(1)骨痹合劑對(duì)去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型產(chǎn)生了影響,可通過(guò)下調(diào)IL-1β和TNF-α的表達(dá),延緩膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞的退變進(jìn)程。(2)骨痹合劑對(duì)該模型大鼠的頸椎亦產(chǎn)生了影響,延緩了頸椎退變進(jìn)程。
【關(guān)鍵詞】：KOA 骨痹合劑 IL-1β TNF-α 大鼠模型 頸椎病
【學(xué)位授予單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 英文縮略詞一覽表11-12
• 前言12-14
• 第一部分 骨痹合劑對(duì)大鼠膝骨性關(guān)節(jié)炎模型IL-1β 和TNF-α表達(dá)的影響14-35
• 前言14-17
• 1.實(shí)驗(yàn)材料和研究方法17-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與方法17-18
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及藥品18
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)器材18-19
• 1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立19-20
• 1.4.1 去雙前肢直立大鼠模型建立19
• 1.4.2 建立去雙前肢直立聯(lián)合Hulth法大鼠KOA模型19-20
• 1.5 給藥干預(yù)方法20
• 1.6 標(biāo)本制備20
• 1.7 標(biāo)本實(shí)驗(yàn)方法20-21
• 1.8 形態(tài)學(xué)檢測(cè)21
• 1.8.1 HE染色21
• 1.8.2 藏紅固綠染色21
• 1.8.3 甲苯胺藍(lán)染色21
• 1.9 免疫組化檢測(cè)21-22
• 2.統(tǒng)計(jì)方法22
• 3.結(jié)果22-28
• 3.1 HE染色的形態(tài)學(xué)觀察22-23
• 3.2 藏紅固綠染色的形態(tài)學(xué)觀察23-24
• 3.3 甲苯胺藍(lán)染色的形態(tài)學(xué)觀察24-25
• 3.4 免疫組化檢測(cè)25-28
• 3.4.1 IL-1β 免疫組化檢測(cè)25-27
• 3.4.2 TNF-α 免疫組化檢測(cè)27-28
• 4.結(jié)論28-29
• 5.討論29-33
• 5.1 中醫(yī)學(xué)對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎的認(rèn)識(shí)29-30
• 5.2 骨痹合劑對(duì)膝骨性骨關(guān)節(jié)炎的作用30-31
• 5.3 IL-1β、TNF-α 與膝骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)系31-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 第二部分 骨痹合劑對(duì)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型頸椎退變的實(shí)驗(yàn)研究35-49
• 前言35-36
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料和方法36-38
• 1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本制備36
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及藥品36
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)器材36-37
• 1.4 標(biāo)本制備37
• 1.5 標(biāo)本實(shí)驗(yàn)方法37
• 1.6 形態(tài)學(xué)檢測(cè)37-38
• 1.6.1HE染色37-38
• 1.6.2 藏紅固綠染色38
• 1.6.3 甲苯胺藍(lán)染色38
• 1.7 統(tǒng)計(jì)方法38
• 2. 結(jié)果38-44
• 2.1 HE染色的形態(tài)學(xué)觀察38-39
• 2.2 藏紅固綠染色的形態(tài)學(xué)觀察39-40
• 2.3 甲苯胺藍(lán)染色的形態(tài)學(xué)觀察40-41
• 2.4 部分?jǐn)?shù)據(jù)測(cè)量結(jié)果41-44
• 2.4.1 軟骨終板厚度測(cè)量41-42
• 2.4.2 纖維環(huán)厚度測(cè)量42-43
• 2.4.3 髓核厚度測(cè)量43-44
• 3. 結(jié)論44
• 4. 討論44-49
• 4.1 中醫(yī)學(xué)對(duì)頸椎病的認(rèn)識(shí)44-46
• 4.2 直立體位與脊柱退變關(guān)系46-47
• 4.3 軟骨終板、纖維環(huán)、髓核與椎間盤(pán)退變的關(guān)系47-49
• 總結(jié)49
• 主要特點(diǎn)及價(jià)值49-50
• 問(wèn)題及展望50
• 參考文獻(xiàn)50-52
• 文獻(xiàn)綜述52-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 致謝58

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