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沿視覺傳導(dǎo)通路電針刺激對前部缺血性視神經(jīng)病變模型干預(yù)的研究

發(fā)布時間:2017-04-29 08:01

  本文關(guān)鍵詞:沿視覺傳導(dǎo)通路電針刺激對前部缺血性視神經(jīng)病變模型干預(yù)的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:通過觀察沿視覺傳導(dǎo)通路電針刺激對兔AION模型視神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)和凋亡相關(guān)因子Bax、Bcl-2的影響,從形態(tài)學(xué)的角度探討沿視覺傳導(dǎo)通路電針刺激對缺血性視神經(jīng)病變模型的保護作用,同時從分子生物學(xué)的角度進一步揭示沿視覺傳導(dǎo)通路電針刺激抑制細(xì)胞凋亡的途徑。方法:選用健康新西蘭大白兔12只,隨機分為4組:模型組、針刺組、針刺加電針組、正常組,每組3只。除正常組外,其余三組實驗眼(右眼)滴入復(fù)方托吡卡胺滴眼液充分散瞳,從兔耳緣靜脈注入孟加拉玫瑰紅(Rose Bengal, RB) 2.5mmol/(ml·kg),立即將家兔固定于裂隙燈前,兔對側(cè)眼用黑色不透光眼罩遮蓋。分別用532nm綠光、功率75mW、1000 μm光斑直徑照射家兔實驗眼視盤中上2/3區(qū)域60s。造模后1天通過眼底彩照及FFA檢查,觀察兔視盤及其周圍變化,從而判定造模是否成功。造模成功后,針刺組取穴:攢竹、魚腰、視區(qū)。針刺加電針組取穴:攢竹、魚腰、視區(qū),攢竹和視區(qū)加電針(疏密波,強度5mA)。模型組和正常組不作干預(yù)。針刺組和針刺加電針組均每日針刺治療1次,每次30分鐘,連續(xù)治療3天。模型組及正常組正常飼養(yǎng)3天。然后將各組新西蘭大白兔麻醉、取材、制作石蠟切片,分別通過HE染色觀察兔視神經(jīng)組織的病理學(xué)改變,通過免疫組化染色觀察兔視網(wǎng)膜中Bax、Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果:1.HE染色:干預(yù)3天,模型組家兔神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層出現(xiàn)增生現(xiàn)象、排列十分紊亂,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列疏松,數(shù)目減少,可見較長片段的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞缺失,內(nèi)核層明顯變薄,細(xì)胞數(shù)目明顯減少。針刺組家兔視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)基本完整,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列疏松,數(shù)目減少,可見視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞少量缺失,內(nèi)核層變薄,細(xì)胞數(shù)目減少。針刺加電針組家兔視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)基本完整,視神經(jīng)組織內(nèi)細(xì)胞排列整齊,可見視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞少量缺失,內(nèi)核層輕度變薄,細(xì)胞數(shù)目減少,正常組家兔視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)完整,視神經(jīng)組織內(nèi)細(xì)胞形態(tài)正常,排列整齊,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞無脫落,排列緊密,染色均勻。2.視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度:模型組、針刺組、針刺加電針組、正常組的視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度的秩均值依次為:9.56、18.33、20.83、25.28。模型組與正常組之間有顯著差異(P0.01)。而針刺組和針刺加電針組的視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度與模型組之間比較均無差異。3.免疫組化染色及RGC計數(shù):bcl-2計數(shù)分別為模型組16.33±4.583,針刺組30.56±7.796,針刺加電針組22.78±4.816,正常組41.44±10.561,其中針刺組和模型組相比有顯著差異(P=0.000),針刺加電針組與模型組相比無差異(P=0.0720.05). Bax計數(shù)分別為模型組26.78±11.925,針刺組24.78±5.630,針刺加電針組22.89±4.076,正常組14.56±5.077,其中針刺組與模型組相比無差異(P=0.5680.05),針刺加電針組與模型組相比無差異(P=0.2700.05)。Bax/Bcl-2分別為模型組1.64±0.557,針刺組0.84±0.254,針刺加電針組1.05±0.333,正常組0.35±0.091,其中針刺組與模型組相比有顯著差異(P=0.000),針刺加電針組與模型組相比有顯著差異(P=0.0010.05),針刺組和針刺加電針組相比無差異(P=0.2120.05)。結(jié)論:1.沿視覺傳導(dǎo)通路針刺療法,加電針和不加電針對缺血狀態(tài)下的兔視神經(jīng)的結(jié)構(gòu)均具有明顯的保護作用,但是對視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度的影響無差異。2.沿視覺傳導(dǎo)通路針刺療法,加電針和不加電針均可抑制缺血狀態(tài)下的兔視神經(jīng)中內(nèi)部線粒體途徑的激活,但是兩者之間無差異。3.沿視覺傳導(dǎo)通路電針療法可能是通過抑制細(xì)胞凋亡的內(nèi)部線粒體途徑來保護視神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)。
【關(guān)鍵詞】:視覺傳導(dǎo)通路 電針 前部缺血性視神經(jīng)病變 Bax/Bcl-2
【學(xué)位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R245
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-10
  • 英文縮略詞10-11
  • 第一部分 文獻綜述11-28
  • 1 前部缺血性視神經(jīng)病變的研究進展11-17
  • 1.1 概述11
  • 1.2 流行病學(xué)調(diào)查11
  • 1.3 危險因素11-13
  • 1.4 臨床表現(xiàn)13-15
  • 1.5 斷和鑒別診斷15
  • 1.6 疾病復(fù)發(fā)15
  • 1.7 治療15-17
  • 1.8 預(yù)防17
  • 2 中醫(yī)藥治療前部缺血性視神經(jīng)病變的研究進展17-23
  • 2.1 辨證論治17-18
  • 2.2 專病專方18-19
  • 2.3 中藥新劑型治療19-20
  • 2.4. 針刺治療20-22
  • 2.5. 結(jié)語22-23
  • 參考文獻23-28
  • 前言28-30
  • 第二部分 實驗研究30-49
  • 1 實驗材料30
  • 1.1 實驗動物30
  • 1.2 針灸針及電針儀30
  • 1.3 主要試劑及儀器30
  • 2 試驗方法30-33
  • 2.1 AION兔眼模型制備30-31
  • 2.2 分組處理31-32
  • 2.3 標(biāo)本采集及處理32-33
  • 3 實驗觀察方法33-35
  • 3.1 眼底彩照及熒光造影33
  • 3.2 HE染色33-34
  • 3.3 免疫組織化學(xué)染色34-35
  • 3.4 視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度測量35
  • 4 統(tǒng)計學(xué)分析35
  • 5 結(jié)果35-42
  • 5.1 家兔眼底彩照檢查35
  • 5.2 家兔眼底熒光造影檢查35-36
  • 5.3 HE染色觀察家兔視盤及視神經(jīng)組織的病理變化36-37
  • 5.4 視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度測量37-38
  • 5.5 免疫組化染色檢測凋亡相關(guān)因子38-42
  • 6 討論42-49
  • 6.1 針刺的取穴依據(jù)及其機理探討42-44
  • 6.2 動物模型的制備與思考44-47
  • 6.3 沿視覺傳導(dǎo)通路電刺激對兔AION模型作用機制的探討47-49
  • 結(jié)語49-50
  • 結(jié)論49
  • 不足與展望49-50
  • 參考文獻50-52
  • 致謝52-53
  • 個人簡歷53

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4 劉f,

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