本文關鍵詞：間斷性缺氧對大鼠舌下神經(jīng)核形態(tài)學及電生理特性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察不同時間階段間斷性缺氧對大鼠舌下神經(jīng)核團形態(tài)學及電生理特性的影響。方法:將40只雄性SD大鼠隨機分為間斷性缺氧組及對照組。其中,間斷性缺氧組30只,對照組10只。間斷性缺氧組包含間斷性缺氧4周組(IH4組)、間斷性缺氧8周組(IH8組)、間斷性缺氧12周組(IH12組)三個亞組。每組各10只大鼠。實驗期間,實驗者將IH4組、IH8組、IH12組置于間斷性缺氧箱,向間斷性缺氧艙內(nèi)循環(huán)充入氮氣,通過控氧儀監(jiān)測間斷性缺氧艙內(nèi)的氧濃度來程控輸氣和排氣裝置,使每次循環(huán)間斷性缺氧艙內(nèi)的氧濃度最低達到5%,隨后排出氮氣的同時吸入空氣,使間斷性缺氧箱內(nèi)的氧濃度恢復到21%。每次循環(huán)為8分鐘,氧濃度波動于5%~21%之間,每日間斷性缺氧8小時。對照組(UC組)置于正常氧環(huán)境,其余飼養(yǎng)條件同間斷性缺氧組。為排除年齡因素對實驗的影響,實驗開始及開始后第4周、第8周,分別將10只大鼠進行間斷性缺氧處理,于實驗開始后第12周分別獲得同一周齡間斷性缺氧4周(IH4組)、8周(IH8組)、12周(IH12組)的模型大鼠。實驗開始后第12周,在對照組及完成最后一次間斷性缺氧的各IH亞組,分別隨機取8只大鼠,麻醉后解剖并游離舌下神經(jīng)。將舌下神經(jīng)置于雙極銀電極上,使用多道生理記錄儀記錄各組大鼠舌下神經(jīng)放電活性。完成放電活性測定后,取大鼠的延髓,固定包埋后連續(xù)切片。每隔5張切片選取3張分別裱片于不同的玻片,此過程循環(huán)反復,將每一延髓組織塊制成3套切片。每套切片依次序分別予以編號。同一延髓組織塊制成的3套切片中,編號相同的玻片處于相鄰的延髓平面。將每一延髓組織塊制成的3套切片分別進行he染色、nissl染色及tunel檢測。光鏡下,對照大鼠腦立體定位圖譜挑選包含舌下神經(jīng)核團的腦切片,定位舌下神經(jīng)核團。觀察處于同一平面的舌下神經(jīng)核形態(tài)學改變及細胞凋亡情況。各組另取2只大鼠,通過光鏡定位舌下神經(jīng)核團后,使用透射電鏡觀察舌下神經(jīng)核神經(jīng)細胞超微結(jié)構(gòu)的改變;結(jié)果:(1)、ih4組、ih8組、ih12組大鼠舌下神經(jīng)放電活性均較uc組增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.001)。ih12組大鼠舌下神經(jīng)放電活性較ih4組及ih8組顯著減弱,但仍明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(p0.001)。sd大鼠經(jīng)ih長期刺激后,舌下神經(jīng)放電活性呈現(xiàn)出先升高后降低的雙相變化過程。(2)、he染色發(fā)現(xiàn),ih4組、ih8組、ih12組大鼠舌下神經(jīng)核內(nèi)神經(jīng)細胞均表現(xiàn)出不同程度的變性、損傷。隨著ih處理時間持續(xù)延長,神經(jīng)細胞數(shù)目逐漸減少,體積縮小,部分神經(jīng)元結(jié)構(gòu)崩解。細胞核皺縮、消失,染色質(zhì)凝集、邊聚,甚至有細胞核的溶解消失等現(xiàn)象。(3)、尼氏染色發(fā)現(xiàn),ih4組、ih8組、ih12組大鼠延髓舌下神經(jīng)核神經(jīng)元均出現(xiàn)尼氏體減少、著色變淺。隨著ih處理時間的持續(xù)延長,胞體腫脹明顯,脫失嚴重,形態(tài)出現(xiàn)不規(guī)則。胞漿尼氏體數(shù)量減少,著色淺淡或空染。細胞核出現(xiàn)固縮、偏移,核仁不清楚。尼氏染色陽性細胞計數(shù)逐漸減少,各IH組與對照組比較差異具有統(tǒng)計學意義(34.50±2.45,24.63±2.07,19.88±2.64 VS 45.13±1.86,P0.001,n=8)。(4)、TUNEL檢測發(fā)現(xiàn),IH4組、IH8組、IH12組大鼠舌下神經(jīng)核內(nèi)神經(jīng)細胞均發(fā)生細胞凋亡,各IH組凋亡率與對照組比較差異均具有統(tǒng)計學意義(7.26±0.33,10.42±0.84,8.32±0.50 VS 1.30±0.01,P0.001,n=8)。且隨著間斷性缺氧處理時間的延長,凋亡率不斷增加。在本實驗中,間斷性缺氧8周時(IH8組)凋亡率達到高峰。(5)、透射電鏡觀察也證實,各IH組大鼠HN中均存在神經(jīng)細胞凋亡。結(jié)論:IH可引起舌下神經(jīng)核神經(jīng)細胞凋亡并影響舌下神經(jīng)放電活性。
【關鍵詞】：間斷性缺氧 舌下神經(jīng)核 凋亡 舌下神經(jīng)放電 阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征
【學位授予單位】：湖南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R766
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-12
• 前言12-15
• 第一章 材料與方法15-23
• 1 實驗材料15-16
• 2 方法16-22
• 3 統(tǒng)計方法22-23
• 第二章 結(jié)果23-29
• 1 呼吸相關舌下神經(jīng)電活性改變23-25
• 2 HE染色25
• 3 尼氏染色25-27
• 4 TUNEL檢測27-28
• 5 透射電鏡28-29
• 第三章 討論29-37
• 1 模擬OSAHS患者間斷性缺氧動物模型的構(gòu)建29
• 2 IH病理損傷的機制29-30
• 3 IH與腦神經(jīng)細胞凋亡的關系30
• 4.IH對HN 形態(tài)學的影響30-32
• 5 IH對舌下神經(jīng)放電活性的影響32-34
• 6.IH致HN細胞凋亡與舌下神經(jīng)放電活性變化的關系34-37
• 第四章 結(jié)論37-38
• 參考文獻38-43
• 綜述43-49
• 綜述參考文獻46-49
• 主要縮寫詞表49-50
• 在讀期間發(fā)表的論文及參與的課題50-51
• 致謝51

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