發(fā)布時間：2021-04-28 03:47

　　目的:1.制備抗鈉-鈣交換體（Na+-Ca2+exchanger,NCX）α-2重復序列（840-877）（α-2（840-877））單克隆抗體,觀察其對成年大鼠心室肌細胞主要離子電流的影響。2.建立大鼠心肌缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）誘發(fā)的心律失常模型,觀察抗NCXα-2（840-877）單克隆抗體對模型大鼠心律失常的影響,并分析其作用機制。方法:1.抗NCXα-2（840-877）單克隆抗體的制備及效價檢測。單克隆雜交瘤細胞株由NCXα-2第840-877位氨基酸殘基肽段免疫小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融合而成,經篩選所得的陽性克隆株及三次亞克隆后獲得可以穩(wěn)定分泌單克隆抗體的細胞株。通過對其進行擴大培養(yǎng),采用動物體內誘生法制備腹水,應用Protein A親和柱對所得腹水進行純化,得到單克隆抗體。利用間接ELISA法檢測純化后的單克隆抗體效價;SDS-PAGE法測定純化后的單克隆抗體純度。2.大鼠心室肌細胞急性分離。正常成年SD大鼠用40 mg·kg-1戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,快速開胸取心臟,經主動脈逆行插管將心臟懸掛于Langendorff灌... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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前言
第一部分 抗鈉-鈣交換體α-2_(840-877)單克隆抗體的制備及其對大鼠心室肌細胞主要離子電流的影響
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體的制備
        2.2 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對大鼠心室肌細胞離子電流的影響
第二部分 抗鈉-鈣交換體α-2_(840-877)單克隆抗體對大鼠心肌缺血/再灌注誘發(fā)心律失常的作用研究
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結果
        2.1 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對離體大鼠心臟缺血/再灌注誘發(fā)心律失常的影響
        2.2 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對大鼠在體心臟缺血/再灌注誘發(fā)心律失常的影響
        2.3 抗NCX α-2_(840-877)單克隆抗體對大鼠心室肌細胞鈣瞬變的影響
討論
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]心肌缺血再灌注損傷的主要機制與相關藥物治療的研究進展[J]. 徐盟.  實用藥物與臨床. 2014(08)
[2]我國心血管疾病現狀與展望[J]. 姚震,陳林.  海南醫(yī)學. 2013(13)
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博士論文
[1]特異性增強心肌內向整流鉀電流(IK1)-抗心律失常新途徑[D]. 劉清華.山西醫(yī)科大學 2009
[2]增強L-型鈣通道、鈉鈣交換體和鈉泵以提高心肌變力性的實驗研究[D]. 白曉潔.山西醫(yī)科大學 2006

碩士論文
[1]抗Na+/Ca2+交換體α-2840-877單克隆抗體的制備及其對大鼠心室肌細胞Na+/Ca2+交換電流的特異性抑制作用研究[D]. 高亞男.山西醫(yī)科大學 2014
[2]鈣蛋白酶抑制劑MDL28170減輕大鼠心肌缺血/再灌注損傷[D]. 顧曉明.第四軍醫(yī)大學 2014
[3]抗GST標簽蛋白單克隆抗體的制備及其活性鑒定[D]. 王政.華中農業(yè)大學 2008



本文編號：3164741