背景:阿爾茲海默�。ˋlzheimer disease,AD）是老年癡呆最常見的病因,表現(xiàn)為認(rèn)知功能進(jìn)行性下降,細(xì)胞內(nèi)Aβ積聚和細(xì)胞外斑塊形成是其特征性病理變化。實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)麻醉藥物可以引起Aβ增多并損傷認(rèn)知功能,提示麻醉后認(rèn)知功能障礙（Postoperative cognitive dysfunction,POCD）與AD可能具有某些相似的分子機(jī)制。自噬是細(xì)胞內(nèi)的重要降解機(jī)制,自噬溶酶體體積增大、功能受損致使神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Aβ積累可促進(jìn)AD病理進(jìn)展。我們前期研究表明3%七氟烷麻醉4小時可引起APP/PS1小鼠認(rèn)知功能障礙,本課題主要探討自噬在七氟烷導(dǎo)致空間學(xué)習(xí)記憶損傷中的作用。實(shí)驗(yàn)方法:6月齡APP/PS1轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠隨機(jī)分為對照組（Control）、七氟烷（Sevo）組,雷帕霉素（Rap）組,雷帕霉素+七氟烷（Rap+Sevo）組。麻醉前三周Rap和Rap+Sevo組腹腔注射雷帕霉素隔天一次,Control組和Sevo組注射溶劑,最后一次注射24h后,Control和Rap組吸入60%空氧混合氣,Sevo和Rap+Sevo組吸入60%空氧混合氣+3%七氟烷4h。麻醉后24h取小... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文略縮詞表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動物
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.4 試劑配制
    2.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.5.1 實(shí)驗(yàn)分組和麻醉（一）
        2.5.2 實(shí)驗(yàn)分組和藥物處理（二）
    2.6 組織提取及保存
    2.7 免疫印跡實(shí)驗(yàn)
        2.7.1 海馬組織蛋白提取及樣品制備
        2.7.2 蛋白濃度測定（Braford法）
        2.7.3 SDS-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）
        2.7.4 上樣
        2.7.5 轉(zhuǎn)膜
        2.7.6 染色,封閉
        2.7.7 免疫雜交
        2.7.8 顯影與定影
        2.7.9 圖像分析
    2.8 免疫熒光
    2.9 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測Aβ40和Aβ
        2.9.1 分組
        2.9.2 加樣
        2.9.3 加酶標(biāo)溶液
        2.9.4 溫育
        2.9.5 加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin
        2.9.6 顯色
        2.9.7 終止
        2.9.8 讀板
    2.10 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)
    2.11 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果
    3.1 七氟烷增加APP/PS1小鼠海馬細(xì)胞內(nèi)Aβ表達(dá)
    3.2 ELISA結(jié)果表明七氟烷增加APP/PS1小鼠海馬細(xì)胞內(nèi)Aβ40表達(dá)
    3.3 七氟烷增加APP/PS1小鼠海馬細(xì)胞外Aβ斑塊聚集
    3.4 七氟烷引發(fā)APP/PS1小鼠海馬中自噬
    3.5 七氟烷引起APP/PS1小鼠海馬中出現(xiàn)巨大自噬溶酶體
    3.6 七氟烷損傷自噬的降解功能
    3.7 雷帕霉素減少巨大自噬溶酶體
    3.8 雷帕霉素改善自噬流
    3.9 雷帕霉素治療的七氟烷麻醉小鼠細(xì)胞外Aβ斑塊減少
40和Aβ₄₂表達(dá)減少">    3.10 雷帕霉素治療的七氟烷麻醉小鼠細(xì)胞中可溶性Aβ₄₀和Aβ₄₂表達(dá)減少
    3.11 雷帕霉素逆轉(zhuǎn)七氟烷引起的認(rèn)知功能損傷
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 術(shù)后認(rèn)知功能障礙和阿爾茲海默病中的自噬
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]吸入麻醉藥增加β淀粉樣蛋白的寡聚化反應(yīng)和細(xì)胞毒性[J]. Roderic G.Eckenhoff M.D.,Jonas S.Johansson M.D. Ph.D.,Huafeng Wei M.D. Ph.D.,Anna Carnini Ph.D.,Baobin Kang M.D.,Wenlin Wei M.D.,Ravindernath Pidikiti M.D.,Jason M.Keller B.Sc.,Maryellen F.Eckenhoff Ph.D.,王耀岐.  國外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊. 2004(05)



本文編號：3133755