本文關鍵詞：益氣養(yǎng)陰清熱利濕方對IgA腎病大鼠腎臟組織NF-κB和MCP-1的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過構建Ig A腎病大鼠模型,予以益氣養(yǎng)陰清熱利濕方進行干預,觀察Ig A腎病大鼠病理組織的變化,檢測24小時尿蛋白定量、腎功能,用免疫組化法、RT-PCR法測定核因子-κB(NF-κB)、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)在大鼠腎臟組織中的表達,探求益氣養(yǎng)陰清熱利濕方治療Ig A腎病的作用機制,為臨床治療Ig A腎病提供新的思路和方法。方法:雄性6周齡SD大鼠,40只,健康、清潔,重量在140~160g左右,在溫度:20℃~24℃,相對濕度:40%-60%的環(huán)境中,適應性飼養(yǎng)7天,第7天末檢測尿蛋白陰性、潛血陰性者,依據體重隨機分為4組:正常組:10只、模型組10只、貝那普利組10只、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組10只。正常組予蒸餾水灌胃,以4ml/kg計算,隔日1次,連用6周;皮下注射蓖麻油0.6 ml,1次/周,連用9周;于第6、8周末Na Cl注射液注入尾靜脈,每只用量0.2ml。模型組、貝那普利組、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組均用濃度為100 g/L免疫原BSA灌胃,每只大鼠用量以400mg/kg(4ml/kg)計算,連用6周;0.1ml CCl4+0.5ml蓖麻油皮下注射,1次/周,連用9周;于第6、8周末用濃度為0.25g/L脂多糖注射液注入尾靜脈,每只注射0.05mg(0.2ml)。第10周起開始給藥,益氣養(yǎng)陰清熱利濕組用益氣養(yǎng)陰清熱利濕中藥藥液灌胃,貝那普利組用貝那普利混懸液灌胃,正常組、模型組用純凈水灌胃,用藥8周。分別于造模前、第7、第9、第13、第17周末檢測24h尿蛋白定量。18周末將大鼠禁食水12h,稱重,按照3.50ml/kg用量將10%水合氯醛注入腹腔,進行麻醉,于腹主動脈取血,測定肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。觀察大鼠腎組織病理變化。分別用免疫組化法、RT-PCR法測定NF-κB、MCP-1在腎組織的表達情況。結果:1 24h尿蛋白定量24h尿蛋白定量:用藥干預后,于第17周末,兩個治療組(即貝那普利組與益氣養(yǎng)陰清熱利濕組)間相比較,無顯著性差異(P0.05)。兩治療組與模型組進行比較,尿蛋白均明顯降低,有顯著性差異(P0.05)。2腎功能正常組、模型組及兩治療組(貝那普利組與益氣養(yǎng)陰清熱利濕組)之間差異均不明顯(P0.05)。3腎組織病理改變光學顯微鏡觀察:在正常組,大鼠腎小球結構完整;在模型組觀察到系膜細胞增生、系膜基質增多;兩治療組(即貝那普利組、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組)大鼠系膜細胞輕度增生和系膜基質增多,相對于模型組,病變減輕。免疫熒光觀察:主要觀察免疫復合物沉積在大鼠腎小球系膜區(qū)有無沉積。正常組大鼠腎小球系膜區(qū)未見免疫復合物沉積,在模型組觀察到有熒光綠色免疫復合物沉積,兩治療組(即貝那普利組、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組)大鼠也有不同程度的免疫復合物沉積,但較模型組減輕。4免疫組化染色法檢測,NF-κB、MCP-1在腎臟組織的表達NF-κB陽性表達情況:正常組弱,其余三組明顯增強(P0.05);相對于模型組,兩治療組(即貝那普利、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組)表達減弱(P0.05);貝那普利組、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組兩治療組間相比較,無明顯差異(P0.05)。MCP-1陽性表達情況:正常組弱,其余三組明顯增強(P0.05);模型組高于兩治療組(即貝那普利組、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組),差異明顯(P0.05);貝那普利組、益氣養(yǎng)陰清熱利濕組兩治療組間相比較,無明顯差異(P0.05)。通過免疫組化法檢測發(fā)現,NF-κB與MCP-1在腎組織的表達呈正相關。5 RT-PCR法檢測,NF-κB、MCP-1在腎臟組織的表達相對于正常組,模型組、兩治療組(即益氣養(yǎng)陰清熱利濕組與貝那普利組)大鼠NF-κB、MCP-1在腎臟組織的表達均明顯增強(P0.05);與模型組比較,益氣養(yǎng)陰清熱利濕組、貝那普利組兩治療組大鼠NF-κB、MCP-1在腎臟組織的表達均減弱(P0.05);但益氣養(yǎng)陰清熱利濕組與貝那普利組進行組間比較,無明顯差異(P0.05)。RT-PCR法檢測結果顯示,NF-κB與MCP-1在腎組織的表達呈正相關。結論:1益氣養(yǎng)陰清熱利濕方能明顯降低Ig A腎病大鼠的尿蛋白,進而保護腎功能;2益氣養(yǎng)陰清熱利濕方能改善Ig A腎病大鼠腎組織的病理損傷情況,延緩Ig A腎病的進展;3益氣養(yǎng)陰清熱利濕方可能通過降低NF-κB、MCP-1在Ig A腎病大鼠腎臟組織的表達,降低炎癥反應,進而防止腎小球系膜增生、系膜硬化、基質沉積,延緩Ig A腎病的發(fā)展。
【關鍵詞】：IgA腎病 核因子-κB 單核細胞趨化蛋白-1 益氣養(yǎng)陰清熱利濕 動物模型 系膜增生
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-19
• 結果19-22
• 附圖22-32
• 附表32-34
• 討論34-40
• 結論40
• 參考文獻40-44
• 綜述 中醫(yī)對IgA腎病的認識與研究現狀44-52
• 參考文獻50-52
• 致謝52-53
• 個人簡歷53

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前8條

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  本文關鍵詞：益氣養(yǎng)陰清熱利濕方對IgA腎病大鼠腎臟組織NF-κB和MCP-1的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：310693