背景:近年來研究表明局麻藥通過不同機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用。羅哌卡因是一種新型長效的酰胺類局部麻醉藥,一般用于局部浸潤麻醉、椎管內(nèi)麻醉、區(qū)域神經(jīng)阻滯及術(shù)后鎮(zhèn)痛。隨著局麻藥抗腫瘤作用的研究深入,羅哌卡因的抗腫瘤作用越來越引起學(xué)者的研究興趣。目的:觀察羅哌卡因?qū)θ烁伟㏒k-hep-1細(xì)胞株增殖和凋亡的影響并探討其抗腫瘤作用機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)利用MTT法檢測(cè)對(duì)照組,400μM,800μM,1200μM羅哌卡因處理人肝癌Sk-hep-1細(xì)胞株和人正常肝細(xì)胞L-02細(xì)胞株24h后,觀察細(xì)胞毒性作用;選擇400μM,800μM,1200μM羅哌卡因處理人肝癌Sk-hep-1細(xì)胞株24h,48h和72h后觀察細(xì)胞存活率變化;不同濃度的羅哌卡因（400μM,800μM,1200μM）作用于人肝癌Sk-hep-1細(xì)胞24 h后,應(yīng)用DAPI核染色法,觀察人肝癌Sk-hep-1細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)形態(tài)學(xué)變化;400μM,800μM,1200μM羅哌卡因處理人肝癌Sk-hep-1細(xì)胞24h后,蛋白免疫印跡法檢測(cè)羅脈卡因?qū)leaved caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bcl-2、Bax、Cyt-c... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２羅哌卡因處理不同時(shí)間對(duì)Ｓｋ－ｈｅｐ－ｌ細(xì)胞增殖的影響??＿

胞２４ｈ后，對(duì)照組細(xì)胞活力為９３．８１％，４００?ｎＭ組細(xì)胞活力為７９．６７％，８００?組細(xì)胞活??力為５９．２８％，１２００?ｐＭ組細(xì)胞活力５２．１３％，能夠明顯抑制細(xì)胞的增殖，隨藥物濃度升高??其抑制作用增強(qiáng)，且有顯著性差異（戶＜〇．〇５），見圖１Ａ；而在正常肝細(xì)胞株Ｌ－０２中，羅??哌卡因則無明顯抑制作用（Ｐ＞?０．０５），見圖１Ｂ。，結(jié)果表示羅哌卡因通過非細(xì)胞毒性作??用抑制人肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１細(xì)胞增殖。統(tǒng)計(jì)分析得出羅哌卡因在肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１細(xì)胞株中的半??抑制濃度ＩＣ５０為１３０３ｐＭ。??Ａ??１５０－１??”?Ｓｋ－ｈｅｐ－１??｜?ｉｏｏ－?ｎｒ?＊??■Ｉ?ｔ?Ｔ?？??＝５〇．?Ｈ?瞧?ｄａ?ｔ??Ｒｏｐｉｖａｃａｉｎｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｉｉｍｏｌ）??圖１Ａ不同濃度羅哌卡因?qū)Γ樱耄瑁澹穑奔?xì)胞的影響??１５??

３．３羅哌卡因?qū)Γ樱耄瑁澹穑奔?xì)胞株凋亡的影響??用４００?ｐＭ、８００?＿［、１２００?的羅呢卡因預(yù)處理肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１細(xì)胞２４ｈ，用ＤＡＰＩ進(jìn)行??核染色，熒光顯微鏡下觀察。如圖３所示，羅呢卡因干預(yù)后，細(xì)胞核呈致密濃染且出現(xiàn)核濃縮、核??邊集等典型的凋亡形態(tài)學(xué)變化，對(duì)照組細(xì)胞核完整，臟飽滿。??■?獅關(guān)???????????８００?（ｉｌｌ?１２００１１１??．？?????????ＷＢ＾１ＷＢａａＩＰｉＨｉＰｉＨｉｉ??ＨｉＭｌＭ＾Ｍ??ｊＨＫＵｙＢＳＭＫＨＳ＾＾Ｂ§ＢＢ９９８８ＫＢＢ９Ｂ＠ｆｌＢ９Ｓ８§９ＨＨＫ８９ｌ??圖３光學(xué)顯微鏡下觀察ＤＡＰＩ染色的細(xì)胞形態(tài)??３．４羅哌卡因?qū)Γ樱耍瑁澹穑奔?xì)胞凋亡相關(guān)蛋白水平的影響??３．４．１羅哌卡因?qū)Υ俚蛲龅鞍祝拢幔磉_(dá)的影響??４００?ｐＭ、８００?ｐＭ、１２００?ｆｉＭ羅哌卡因作用于肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１細(xì)胞２４ｈ后，用免疫印跡法??檢測(cè)分析促凋亡蛋白Ｂａｘ表達(dá)水平。免疫印跡法條帶分析的結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比羅哌??卡因作用于Ｓｋ－ｈｅｐ－１細(xì)胞２４ｈ后，促凋亡蛋白Ｂａｘ表達(dá)水平顯著升高（尸＜〇．〇５），見圖４。??１７??


本文編號(hào)：3023594