本文關(guān)鍵詞：益骨顆粒對(duì)原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的治療作用及其機(jī)制探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：對(duì)益骨顆粒治療骨質(zhì)疏松癥的作用進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià),并從血鈣濃度、骨形成-骨吸收的耦聯(lián)狀態(tài)、成骨細(xì)胞的增殖分化等方面對(duì)該治療作用的機(jī)制進(jìn)行探討。方法：1.益骨顆粒對(duì)雙側(cè)卵巢摘除大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用SD雌性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、雌二醇組、益骨顆粒低、中、高組。除假手術(shù)組外,其余動(dòng)物雙側(cè)摘除卵巢以制備骨質(zhì)疏松癥模型,假手術(shù)組動(dòng)物不摘除卵巢,只剪去卵巢附近約1g的脂肪。術(shù)后一周,動(dòng)物分別灌胃給藥,劑量分別為：雌二醇0.0003 g ·kg-1 · d-1益骨顆粒低劑量0.4g · kg-1、中劑量0.8g · kg-1 · d-1、高劑量1.6g · Kg-1 · d-1,假手術(shù)組和模型組動(dòng)物給予等量蒸餾水,連續(xù)治療16周。給藥后第12、16周,分別對(duì)動(dòng)物全身的骨密度進(jìn)行檢測。動(dòng)物處死前第14天皮下注射鹽酸四環(huán)素,25mg/kg；處死前第4天皮下注射鈣黃素,10mg/kg以制備熒光標(biāo)記。末次給藥后1h,動(dòng)物腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉,腹主動(dòng)脈取血,分離血清,利用ELSIA法檢測血清中骨鈣素、抗酒石酸酸性磷酸酶5b的含量,利用全自動(dòng)生化儀檢測血清中鈣、磷、堿性磷酸酶的含量。取血完畢,動(dòng)物處死,取其子宮、腰椎、雙側(cè)股骨及左側(cè)脛骨。子宮用于制作病理切片,觀察益骨顆粒對(duì)子宮的影響；腰椎和右側(cè)股骨用于離體骨密度檢測；左側(cè)股骨用于生物力學(xué)指標(biāo)的檢測；左側(cè)脛骨用于制作切片,觀察該藥對(duì)骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)(骨外膜形成率等)的影響。2.益骨顆粒對(duì)大鼠成骨細(xì)胞增殖分化及其合成分泌堿性磷酸酶作用的影響取新生2日齡SD大鼠顱骨,利用酶消化,對(duì)其中的成骨細(xì)胞進(jìn)行原代分離,并行形態(tài)學(xué)觀察與堿性磷酸酶染色鑒定。制備雌二醇、益骨顆粒低、中、高劑量的含藥血清,按體系數(shù)濃度的10%加入第三代成骨細(xì)胞培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)48h、72h后,CCK-8法檢測成骨細(xì)胞增殖狀況,磷酸對(duì)硝基苯酯法檢測細(xì)胞中堿性磷酸酶水平。結(jié)果：1.益骨顆粒對(duì)雙側(cè)卵巢摘除大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用(1)與模型組相比,給藥3個(gè)月后,益骨顆粒高劑量組能顯著提高動(dòng)物的骨密度；給藥4個(gè)月后,益骨顆粒各劑量組均能顯著提高動(dòng)物的骨密度值。此外,益骨顆粒中、高劑量組能顯著提高股骨、腰椎的骨密度。(2)與模型組相比,益骨顆粒中劑量可顯著地提高血清鈣的水平。此外,益骨顆粒中、高劑量組血清的OCN、TRACP5b有顯著性地降低。(3)在生物力學(xué)實(shí)驗(yàn)中,益骨顆粒中、高劑量組動(dòng)物股骨的最大彎曲應(yīng)力、最大應(yīng)變、骨剛性系數(shù)較模型組有顯著性地提高。(4)通過脛骨骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),益骨顆粒高劑量可顯著性地提高骨小梁面積百分?jǐn)?shù)；而中、高劑量可降低骨小梁分離度,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外,益骨顆粒中、高劑量可降低骨外膜熒光周長百分?jǐn)?shù),而各劑量也可顯著性地降低骨外膜形成率。2.益骨顆粒對(duì)大鼠成骨細(xì)胞增殖分化及其合成分泌堿性磷酸酶作用的影響(1)與對(duì)照組相比,經(jīng)益骨顆粒各劑量含藥血清培養(yǎng)72h后,成骨細(xì)胞的增殖率有顯著性的提高。(2)與對(duì)照組相比,經(jīng)益骨顆粒各劑量含藥血清培養(yǎng)48h后,成骨細(xì)胞堿性磷酸酶水平有顯著性的提高。結(jié)論：大鼠雙側(cè)卵巢摘除,是制備骨質(zhì)疏松模型的經(jīng)典方法,該模型可出現(xiàn)臨床上骨質(zhì)疏松癥的一系列特征,如鈣質(zhì)的流失、骨密度的下降、骨組織顯微結(jié)構(gòu)破壞、骨生物力學(xué)功能下降和骨代謝相關(guān)指標(biāo)的變化等。基于此模型,本課題發(fā)現(xiàn)益骨顆粒不僅可以提高模型動(dòng)物的骨密度值,對(duì)骨質(zhì)疏松所引起的骨組織顯微結(jié)構(gòu)破壞和骨生物力學(xué)功能下降都有一定的改善作用。此外,在體外的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,本課題發(fā)現(xiàn)益骨顆粒有增強(qiáng)成骨細(xì)胞的增殖分化的作用,并能加強(qiáng)成骨細(xì)胞合成分泌堿性磷酸酶的功能。聯(lián)系上述,益骨顆粒對(duì)骨質(zhì)疏松的治療作用可能與其促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖分化,糾正骨吸收-骨形成失衡狀態(tài),減少骨中鈣質(zhì)流失；促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌合成ALP,使P與Ca沉積于骨膠原骨架上,加快骨質(zhì)礦化；維持骨小梁正常形態(tài),改善骨生物力學(xué)作用有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：益骨顆粒 骨質(zhì)疏松 骨小梁 骨生物力學(xué) 骨代謝
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R259
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-10
• 引言10-12
• 第一章 文獻(xiàn)研究12-31
• 第一節(jié) 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)骨質(zhì)疏松的認(rèn)識(shí)及藥物治療12-21
• 一、骨質(zhì)疏松癥的概述12-13
• 二、雌激素與骨代謝的關(guān)系13-16
• 三、治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的藥物16-21
• 第二節(jié) 中醫(yī)對(duì)骨質(zhì)疏松癥的認(rèn)識(shí)及藥物治療21-27
• 一、中醫(yī)對(duì)骨質(zhì)疏松癥的認(rèn)識(shí)21-23
• 二、中藥對(duì)原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的防治作用23-27
• 第三節(jié) 骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型的研究27-30
• 一、動(dòng)物的選擇27-28
• 二、模型制備的方法28-30
• 第四節(jié) 本課題的研究目的及意義30-31
• 第二章 實(shí)驗(yàn)研究31-62
• 第一節(jié) 益骨顆粒對(duì)雙側(cè)卵巢摘除大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用31-55
• 一、實(shí)驗(yàn)材料31
• 二、實(shí)驗(yàn)方法31-40
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-53
• 四、小結(jié)53-55
• 第二節(jié) 益骨顆粒對(duì)成骨細(xì)胞增殖分化及其合成分泌堿性磷酸酶作用的影響55-62
• 一、實(shí)驗(yàn)材料55
• 二、實(shí)驗(yàn)方法55-57
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果57-61
• 四、小結(jié)61-62
• 第三章 討論62-70
• 一、益骨顆粒對(duì)原發(fā)性骨質(zhì)疏松的藥效學(xué)研究62-64
• 二、益骨顆粒對(duì)原發(fā)性骨質(zhì)疏松治療機(jī)制的探討64-69
• 三、總結(jié)69-70
• 結(jié)語70-71
• 參考文獻(xiàn)71-75
• 附錄75-76
• 在校期間發(fā)表論文情況76-77
• 致謝77-78
• 附件78

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫斌峰;董q

本文編號(hào)：300737