結(jié)節(jié)乳狀體核在丙泊酚麻醉意識(shí)消失和恢復(fù)中的作用研究
發(fā)布時(shí)間：2021-01-19 20:57
目的:丙泊酚是廣泛應(yīng)用于臨床的靜脈麻醉藥,是一種GABAA型受體激動(dòng)劑,但導(dǎo)致意識(shí)消失的確切機(jī)制仍未闡明。研究與我們的前期工作發(fā)現(xiàn),丙泊酚麻醉致意識(shí)消失和恢復(fù)與睡眠-覺(jué)醒的過(guò)程有一定相似性。結(jié)節(jié)乳狀體核（Tuberomammillary Nucleus,TMN）是睡眠-覺(jué)醒環(huán)路中的主要組成部分,也是大腦中組胺的唯一來(lái)源。組胺的分泌受GABA調(diào)控,同時(shí)反饋抑制GABA的釋放。故本課題旨在研究TMN組胺神經(jīng)元在丙泊酚麻醉致意識(shí)消失和恢復(fù)中的作用。方法:1、篩選腹腔注射丙泊酚的最佳劑量:隨機(jī)選取42只野生型C57小鼠,采用50、60、70、80、90、100（mg/kg）的劑量進(jìn)行丙泊酚腹腔注射,篩選出小鼠腹腔注射產(chǎn)生翻正反射消失（Loss of right reflex,LORR）的最佳劑量;2、建立損毀模型進(jìn)行行為學(xué)和腦電圖檢測(cè):將42只野生型C57小鼠隨機(jī)分為藥物損毀組（Saporin）、生理鹽水組（NS）和空白對(duì)照組（Control）,n=14,采用腦區(qū)微注射的方法在前兩組小鼠兩側(cè)TMN分別注射藥物（Orexin2R-Saporin,250ng/μl）或生理鹽水...
【文章來(lái)源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省
【文章頁(yè)數(shù)】：41 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
結(jié)節(jié)乳狀體核的神經(jīng)投射[10]
圖 2 滾筒試驗(yàn)小鼠發(fā)生 LORR 示意圖1.4.2 TMN 腦區(qū)微注射模型的建立制備微量注射針：用拉制儀拉制前端尖細(xì)的玻璃電極，將整根玻璃電極和0.5 μl 的微量注射針內(nèi)灌滿(mǎn)液體石蠟，將微量注射針插入玻璃電極內(nèi)，用熱熔膠槍進(jìn)行密封。剪掉玻璃電極前端約 2 mm，確定整個(gè)注射針通暢且密閉性良好。將小鼠隨機(jī)分成三組：藥物損毀組（Saporin）、生理鹽水組（NS）和空白對(duì)照組（Control）,n=14。用 10%的水合氯醛（4 ml/kg）腹腔注射麻醉后，固定于小鼠立體定位儀上。將紅霉素眼膏涂抹于眼球表面，以避免強(qiáng)光損害。頭皮表面消毒后，頭皮下注射利多卡因，5 分鐘后剪開(kāi)頭皮，暴露顱骨表面。確定 Bregma（B）點(diǎn)和 Lambda（λ）點(diǎn)位置，進(jìn)行前后調(diào)平和左右調(diào)平（高度相差＜0.02mm）。根據(jù)第二版小鼠解剖圖譜（Paxinos and Watson《The Mouse Brain in StereotaxicCoordinates》），TMN 選取坐標(biāo)（-2.70 mm，±1.10 mm,-5.25 mm），前額葉皮層(Cg2)
圖 3 腦區(qū)微注射位置示意圖注：左圖為解剖圖譜示意圖：紅色區(qū)域代表 TMN 位置，黑色加粗實(shí)線(xiàn)代表進(jìn)針位置；圖為小鼠微注射示意圖。1.4.3 行為學(xué)和腦電圖記錄行為學(xué) LORR 采用腹腔注射測(cè)量，藥物經(jīng)腹腔注射后放入滾筒， RORR 則采用尾靜脈單次注射丙泊酚進(jìn)行測(cè)量，給藥后小鼠很快進(jìn)入麻醉狀態(tài)，記錄此時(shí)到 RORR 的時(shí)間。記錄流程如圖 4 和圖 5。分別記錄丙泊酚麻醉下三組小鼠的腦電圖，從 LORR 到 RORR，采用 CEDPower1401 收集腦電信號(hào)，濾波范圍（0.1 Hz – 0.1 kHz, gain: 1000 ×），用 Spike 2軟件處理分析 EEG 數(shù)據(jù)。
本文編號(hào)：2987700
【文章來(lái)源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省
【文章頁(yè)數(shù)】：41 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
結(jié)節(jié)乳狀體核的神經(jīng)投射[10]
圖 2 滾筒試驗(yàn)小鼠發(fā)生 LORR 示意圖1.4.2 TMN 腦區(qū)微注射模型的建立制備微量注射針：用拉制儀拉制前端尖細(xì)的玻璃電極，將整根玻璃電極和0.5 μl 的微量注射針內(nèi)灌滿(mǎn)液體石蠟，將微量注射針插入玻璃電極內(nèi)，用熱熔膠槍進(jìn)行密封。剪掉玻璃電極前端約 2 mm，確定整個(gè)注射針通暢且密閉性良好。將小鼠隨機(jī)分成三組：藥物損毀組（Saporin）、生理鹽水組（NS）和空白對(duì)照組（Control）,n=14。用 10%的水合氯醛（4 ml/kg）腹腔注射麻醉后，固定于小鼠立體定位儀上。將紅霉素眼膏涂抹于眼球表面，以避免強(qiáng)光損害。頭皮表面消毒后，頭皮下注射利多卡因，5 分鐘后剪開(kāi)頭皮，暴露顱骨表面。確定 Bregma（B）點(diǎn)和 Lambda（λ）點(diǎn)位置，進(jìn)行前后調(diào)平和左右調(diào)平（高度相差＜0.02mm）。根據(jù)第二版小鼠解剖圖譜（Paxinos and Watson《The Mouse Brain in StereotaxicCoordinates》），TMN 選取坐標(biāo)（-2.70 mm，±1.10 mm,-5.25 mm），前額葉皮層(Cg2)
圖 3 腦區(qū)微注射位置示意圖注：左圖為解剖圖譜示意圖：紅色區(qū)域代表 TMN 位置，黑色加粗實(shí)線(xiàn)代表進(jìn)針位置；圖為小鼠微注射示意圖。1.4.3 行為學(xué)和腦電圖記錄行為學(xué) LORR 采用腹腔注射測(cè)量，藥物經(jīng)腹腔注射后放入滾筒， RORR 則采用尾靜脈單次注射丙泊酚進(jìn)行測(cè)量，給藥后小鼠很快進(jìn)入麻醉狀態(tài)，記錄此時(shí)到 RORR 的時(shí)間。記錄流程如圖 4 和圖 5。分別記錄丙泊酚麻醉下三組小鼠的腦電圖，從 LORR 到 RORR，采用 CEDPower1401 收集腦電信號(hào)，濾波范圍（0.1 Hz – 0.1 kHz, gain: 1000 ×），用 Spike 2軟件處理分析 EEG 數(shù)據(jù)。
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