發(fā)布時(shí)間：2017-04-11 03:16

  本文關(guān)鍵詞：Btk在糞腸球菌感染的大鼠根尖周炎中的表達(dá)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立以糞腸球菌感染的實(shí)驗(yàn)性大鼠根尖周炎模型,研究大鼠根尖周病變過(guò)程中布魯頓酪氨酸激酶(Btk)mRNA的表達(dá)變化,探討糞腸球菌對(duì)Btk表達(dá)的影響。方法:研究對(duì)象為成年健康的雄性SD大鼠32只,采用10%水合氯醛(0.35-0.40ml/100g體重)腹腔注射麻醉大鼠,隨機(jī)分為A、B兩組,每組各16只,以大鼠右側(cè)下頜第一磨牙為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)大鼠磨牙行開(kāi)髓術(shù)。A組(未封菌組):髓腔內(nèi)封入浸有PBS緩沖液的無(wú)菌小棉球;B組(封菌組):髓腔內(nèi)封入浸有糞腸球菌菌懸液的小棉球。隨后兩組均采用進(jìn)口玻璃離子對(duì)開(kāi)髓的牙齒進(jìn)行充填以封閉髓腔。以大鼠的左下第一磨牙作為正常對(duì)照組。常規(guī)條件飼養(yǎng),分別在開(kāi)髓后的1、2、3、4周,各選取4只實(shí)驗(yàn)大鼠,乙醚深度麻醉并快速處死,分離大鼠的下頜骨,刮取大鼠下頜第一磨牙根尖區(qū)的組織,進(jìn)行充分研磨,提取并純化所提取組織的RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,采用Real-time PCR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組的Btk mRNA的表達(dá)水平,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1.A組術(shù)后2、3、4周Btk mRNA的表達(dá)量與正常對(duì)照組相比明顯增高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);A組1周術(shù)后Btk mRNA表達(dá)量與正常對(duì)照組相比略有增高,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.B組術(shù)后1、2、3、4周各時(shí)間點(diǎn)Btk mRNA的表達(dá)量均高于正常對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.A、B兩組在術(shù)后1至2周Btk mRNA的表達(dá)水平逐漸增高,2周時(shí)達(dá)峰值,于3周時(shí)表達(dá)開(kāi)始逐漸降低,4周表達(dá)水平持續(xù)降低。A組Btk mRNA基因表達(dá)量在術(shù)后1、2、3、4周之間兩兩比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。B組Btk mRNA表達(dá)量在術(shù)后2周和3周分別于其他時(shí)間點(diǎn)兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.在術(shù)后1周、2周、3周、4周各時(shí)間點(diǎn)上,B組Btk mRNA的表達(dá)水平均高于A組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.Btk參與了整個(gè)根尖周炎的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程,并在此過(guò)程中Btk的表達(dá)量增高。2.糞腸球菌的存在增強(qiáng)了大鼠根尖周炎中Btk的表達(dá),其表達(dá)情況與根尖周炎的進(jìn)程密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：酪氨酸激酶Btk SD大鼠 Real-time PCR 糞腸球菌 根尖周炎
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R781.34
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 材料和方法14-21
• 1.實(shí)驗(yàn)材料14-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑14-15
• 1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器設(shè)備15
• 1.4 試劑的配置15-16
• 2.實(shí)驗(yàn)方法16-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組16-17
• 2.2 建立實(shí)驗(yàn)性根尖周炎大鼠模型17
• 2.3 根尖周組織取材17-18
• 2.4 提取組織總 RNA18-19
• 2.5 RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA19
• 2.6 設(shè)計(jì)和合成引物19-20
• 2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)20
• 2.8 PCR產(chǎn)物的分析20-21
• 3.數(shù)據(jù)的收集和整理21
• 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-27
• 1. 瓊脂凝膠電泳21
• 2. 目的基因與管家基因的擴(kuò)增曲線和溶解曲線21-23
• 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23-27
• 討論27-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-36
• 綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 致謝44-45

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