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小檗堿對(duì)大鼠自體原位肝臟移植腸損傷的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-03 00:07

  本文關(guān)鍵詞:小檗堿對(duì)大鼠自體原位肝臟移植腸損傷的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探究小檗堿是否對(duì)大鼠自體原位肝臟移植引起的腸道損傷具有保護(hù)作用以及可能的機(jī)制。方法:SD雄性大鼠24只,健康狀態(tài)良好,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將其隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(S組)、自體原位肝臟移植模型組(AT組)、自體原位肝臟移植模型組+小檗堿組(BBR組)。S組大鼠僅接受麻醉后開(kāi)腹,游離肝臟周?chē)难芗绊g帶后關(guān)腹;AT組大鼠采用自體原位肝臟移植模型,使用4℃乳酸林格氏液持續(xù)灌注,30 min后隨即恢復(fù)肝臟血液灌注,沖洗腹腔后關(guān)腹;小檗堿組(BBR組)大鼠術(shù)前7 d連續(xù)給予200 mg·kg-1·d-1小檗堿灌胃,手術(shù)操作同AT組。于再灌注8 h時(shí),抽取下腔靜脈血,檢測(cè)D-乳酸和內(nèi)毒素的濃度。距回盲部2 cm處切取5 cm回腸組織,稱(chēng)量回腸的濕重,隨后將其放至80℃烤箱中,24小時(shí)后再次稱(chēng)量其重量,獲取組織的干重。取部分腸組織制成腸組織勻漿,測(cè)定腸組織MDA及SOD活性。采用免疫組織化學(xué)方法和Western blot技術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞色素C及Bax、Bcl-2、AMPK蛋白的表達(dá)水平。腸組織標(biāo)本被甲醛溶液固定,于光學(xué)顯微鏡下觀察腸組織的病理學(xué)結(jié)果。腸上皮細(xì)胞的凋亡采用TUNEL法檢測(cè)。應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,P0.05代表統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有意義。結(jié)果:S組腸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)未見(jiàn)明顯異常,AT組和BBR組損傷明顯,BBR組損傷較AT組減輕。AT和BBR組腸組織的D-乳酸,內(nèi)毒素,濕/干重比率,MDA水平,Bax、AMPK蛋白表達(dá)水平,Cytochrome C表達(dá)水平和凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)均高于S組,但AT組腸組織的D-乳酸,內(nèi)毒素,濕/干重比率,MDA水平,Bax蛋白表達(dá)水平,Cytochrome C表達(dá)水平和凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)較BBR組增高更明顯(P0.05),AT組的AMPK蛋白表達(dá)水平低于BBR組(P0.05)。AT組和BBR組腸組織SOD水平和Bcl-2蛋白表達(dá)水平低于S組,AT組較BBR組降低更明顯(P0.05)。結(jié)論:1.大鼠自體原位肝臟移植過(guò)程可以引起腸道的損傷,腸道粘膜水腫,濕/干重比率增加,血漿中D-乳酸和內(nèi)毒素的濃度升高,同時(shí)氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡及AMPK蛋白的激活在自體原位肝臟移植腸損傷的發(fā)生過(guò)程中也起著重要作用。2.預(yù)先給予小檗堿能激活A(yù)MPK,增加凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax比值,進(jìn)而維持線(xiàn)粒體膜的穩(wěn)定性,細(xì)胞色素C從細(xì)胞內(nèi)釋放到胞漿的量明顯減少,保護(hù)腸道免受缺血再灌注的損傷,減少細(xì)胞發(fā)生凋亡。
【關(guān)鍵詞】:大鼠 小檗堿 氧化應(yīng)激 細(xì)胞凋亡 AMPK蛋白 自體原位肝臟移植 腸損傷
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-11
  • 前言11-13
  • 研究現(xiàn)狀、成果11-12
  • 研究目的、方法12-13
  • 1 材料和方法13-27
  • 1.1 材料13-14
  • 1.2 動(dòng)物模型建立和分組14-15
  • 1.3 標(biāo)本采集15-16
  • 1.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法16-26
  • 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理26-27
  • 2 結(jié)果27-31
  • 2.1 腸組織病理結(jié)果27
  • 2.2 腸組織的濕/干重(W/D)比率27-28
  • 2.3 腸組織MDA含量和SOD活性變化28-29
  • 2.4 血清中D-乳酸和內(nèi)毒素濃度變化的比較29
  • 2.5 腸組織細(xì)胞色素C表達(dá)水平和凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化29-30
  • 2.6 腸組織Bax和Bcl-2 蛋白表達(dá)水平的比較30-31
  • 2.7 腸組織AMPK蛋白表達(dá)水平31
  • 3 討論31-40
  • 3.1 大鼠自體原位肝臟移植模型的建立31-32
  • 3.2 自體原位肝臟移植所致肝腸損傷的機(jī)制32-34
  • 3.3 缺血再灌注損傷時(shí)活性氧增多的機(jī)制及損傷作用34-35
  • 3.4 D-乳酸和內(nèi)毒素與缺血再灌注損傷35-36
  • 3.5 細(xì)胞凋亡在缺血再灌注損傷的作用36-37
  • 3.6 AMPK蛋白與缺血再灌注損傷37-38
  • 3.7 小檗堿保護(hù)機(jī)制的探討38-40
  • 結(jié)論40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-47
  • 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明47-48
  • 綜述48-60
  • 綜述參考文獻(xiàn)54-60
  • 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張艷波;王軍;王勇;王凌宇;李爽;周?chē)?guó)慶;;小檗堿對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷腦組織Bcl-2、Caspase-3表達(dá)的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2011年13期


  本文關(guān)鍵詞:小檗堿對(duì)大鼠自體原位肝臟移植腸損傷的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):283372

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