本文關鍵詞：小檗堿對NAFLD大鼠肝組織Nrf2-ARE信號通路mRNA及蛋白表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過高脂飲食誘導建立大鼠NAFLD模型,觀察小檗堿對NAFLD大鼠肝組織Nrf2-ARE信號通路相關基因及蛋白表達的調(diào)控作用,探討小檗堿防治NAFLD作用機制。方法:將24只SPF級健康成年雄性SD大鼠按隨機數(shù)字表法隨機分為3組,分別為:正常組,模型組,小檗堿組,每組8只。采用高脂飼料喂養(yǎng)復制大鼠NAFLD模型。正常組給予基礎飼料,其它兩組予以高脂飼料喂養(yǎng),小檗堿組同時灌飼小檗堿(100mg/kg)干預,正常組和模型組予實驗動物飲用水。8周后戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,提取血清檢測常規(guī)生化指標(AST、ALT、TC、TG、LDL-C、HDL-C),取肝組織進行TC、TG檢測,并行HE和油紅O染色觀察病理變化,比色法檢測肝組織GSH-Px、NO;Real-time Q-PCR和Western Blot方法檢測各組肝組織Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1 m RNA及相關蛋白表達。結(jié)果:1肝組織病理HE染色示:正常組大鼠肝小葉、肝索結(jié)構完好清晰,肝索和肝血竇在中央靜脈周圍大致呈放射狀排列,肝細胞結(jié)構完整呈多面體形,排列整齊,界限明顯,胞質(zhì)紅染均勻,細胞沒有或有較少和較小的脂肪空泡,胞核大而圓,位置居中,無明顯病變;模型組大鼠肝組織切片肝竇、肝索結(jié)構紊亂不清,脂肪變性明顯,可見肝細胞腫脹,胞漿內(nèi)存在大小不一的圓形脂滴,以大泡性脂滴為主,胞核被擠壓、靠向邊緣;小檗堿組大鼠肝組織脂肪變性情況較模型組顯著改善。油紅O染色示:正常組大鼠肝細胞核淡藍居中,肝細胞內(nèi)未見明顯橘紅色脂滴,偶見正常散在的小紅染脂滴,細胞間間隙清晰,肝竇結(jié)構正常,細胞排列整齊;模型組大鼠肝細胞腫脹,核質(zhì)深藍染色、靠邊,肝細胞內(nèi)可見大片的紅染脂滴,相鄰細胞間紅染融合,小葉結(jié)構破壞,肝索紊亂不清;小檗堿組肝細胞內(nèi)紅染脂滴量介于正常組與模型組之間。2血脂、肝脂含量測定血脂:模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C與正常組比較顯著升高(P0.01,P0.05),HDL-C顯著降低(P0.01);小檗堿組大鼠血清TC、TG、LDL-C與模型組比較顯著降低(P0.05),HDL-C顯著升高(P0.05)。肝脂:模型組較正常組大鼠肝組織TC、TG顯著升高(P0.01,P0.05),小檗堿組較模型組明顯降低(P0.01,P0.05)。提示NAFLD大鼠存在脂質(zhì)代謝紊亂,小檗堿可以改善NAFLD大鼠血脂。3血清AST、ALT測定模型組大鼠血清AST含量及AST/ALT的比值與正常組比較顯著升高(P0.05),小檗堿組與模型組比較AST及AST/ALT的比值有下降趨勢但沒有統(tǒng)計學意義(P0.05);與正常組相比較,模型組大鼠血清ALT含量無顯著性增高(P0.05),小檗堿組與模型組比較沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4氧化應激因子測定與正常組比較,模型組大鼠肝組織及血清GSH-Px活力明顯降低(P0.05);與模型組大鼠比較,小檗堿組肝組織及血清GSH-Px活力明顯升高(P0.05);說明NAFLD大鼠肝組織中GSH-Px活力低下,而小檗堿可以明顯改善GSH-Px的活力起到抗氧化應激的作用。模型組大鼠肝組織及血清NO水平較正常組明顯升高(P0.05),而小檗堿組的NO水平較模型組大鼠顯著降低(P0.05);提示NAFLD大鼠肝組織中存在NO的高表達,而小檗堿可以降低其水平從而起到保護肝臟的作用。5肝組織Nrf2-ARE信號通路相關基因及蛋白檢測模型組大鼠肝組織Nrf2、NQO1、HO-1 m RNA及蛋白表達量較正常組明顯上升(P0.05),而Keap1 m RNA及蛋白的表達無顯著的統(tǒng)計學差異(P0.05)。與模型組相比較,小檗堿組Nrf2、NQO1、HO-1 m RNA及蛋白表達水平顯著上升,Keap1 m RNA及蛋白無顯著的統(tǒng)計學差異(P0.05)。結(jié)果表明在NAFLD大鼠肝組織中Nrf2、NQO1、HO-1m RNA及蛋白有高表達,小檗堿對NAFLD大鼠肝組織Nrf2、NQO1、HO-1 m RNA及蛋白的表達有上調(diào)作用,對Keap1 m RNA及蛋白的表達影響較小。結(jié)論:(1)采用高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)SD大鼠8周,可以成功誘導NAFLD大鼠模型。(2)NAFLD大鼠存在脂質(zhì)代謝紊亂、肝組織脂肪變性以及肝組織Nrf2-ARE信號通路的活化。(3)小檗堿可以改善NAFLD模型大鼠肝臟脂肪變性,其機制可能通過調(diào)節(jié)肝臟Nrf2-ARE信號通路相關基因及蛋白的表達并調(diào)控相關氧化應激因子的表達,改善氧化應激而起作用。
【關鍵詞】：小檗堿 NAFLD 氧化應激 Nrf2-ARE信號通路 大鼠
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 主要縮略詞英漢對照表3-4
• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-11
• 第一部分 理論研究11-20
• 1 研究現(xiàn)狀11-12
• 2 氧化應激與NAFLD12-13
• 3 抗氧化物質(zhì)13-14
• 4 Nrf2-ARE信號通路與NAFLD14-16
• 5 NAFLD診斷16-17
• 6 中醫(yī)與NAFLD17-18
• 7 小檗堿與NAFLD18-20
• 第二部分 實驗研究20-44
• 1 材料20-22
• 2.實驗方法22-31
• 3 結(jié)果31-44
• 第三部分 討論44-46
• 第四部分 結(jié)論與展望46-47
• 參考文獻47-53
• 附錄53-54
• 在校期間發(fā)表學術論文及參與科研情況54-55
• 致謝55

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;美指南不建議篩查酒精性脂肪性肝病(NAFLD)[J];中國社區(qū)醫(yī)師;2012年23期

2 姚仲彩;李紅山;;強肝膠囊聯(lián)合多烯磷脂酰膽堿膠囊治療NAFLD的療效和機制研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2011年18期

3 毛雨晴;樊曉明;;饑餓素(ghrelin)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中的研究進展[J];復旦學報(醫(yī)學版);2014年02期

4 張愛青;楊雪敏;李韋;呂宗舜;;NAFLD患者小腸細菌過度生長情況及雙歧三聯(lián)活菌膠囊的療效[J];山東醫(yī)藥;2014年15期

5 鮑麗靜;向曉星;龍愛華;鄭新梅;;羅格列酮聯(lián)合還原型谷胱甘肽對NAFLD大鼠胰島素及胰島素信號轉(zhuǎn)導相關蛋白的影響[J];肝臟;2010年01期

6 唐文;趙長江;李藝華;;多烯磷脂酰膽堿膠囊治療NAFLD患者的效果觀察[J];中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè);2011年Z4期

7 吳麗美;李志海;鮑蓓;;廣州地區(qū)在職交警人群NAFLD患病風險因素的多元回歸分析[J];醫(yī)學理論與實踐;2013年15期

8 錢雪梅;胡潔華;;還原型谷胱甘肽聯(lián)合易善復治療NAFLD的療效觀察[J];中國醫(yī)藥指南;2012年21期

9 ;果糖消耗增加與NAFLD患者纖維化嚴重程度有關[J];肝臟;2011年02期

10 劉曉琳;茅益民;;從NAFLD臨床實踐到指南的推薦[J];肝臟;2014年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 何興祥;;NAFLD診斷與治療的新理念[A];2013年廣東省肝臟病學會《全國肝病防治高峰論壇》深圳會議講義匯編[C];2013年

2 婁國強;;非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的診斷進展[A];2012年浙江省醫(yī)學會肝病、感染病學學術年會暨浙江省感染科醫(yī)師學術年會論文集[C];2012年

3 劉宇;畢宇芳;徐敏;陸潔莉;黃飛;徐佰慧;楊枝;寧光;;低風險人群中非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和低度蛋白尿的相關性研究[A];中華醫(yī)學會第十一次全國內(nèi)分泌學學術會議論文匯編[C];2012年

4 萬星勇;徐承富;虞朝輝;厲有名;;基于轉(zhuǎn)錄譜印跡法篩選NAFLD相關基因[A];2012年浙江省內(nèi)科學年會論文集[C];2012年

5 劉倩倩;肖國強;;亞低溫游泳運動對NAFLD大鼠瘦素抵抗和脂質(zhì)代謝的影響[A];第九屆全國體育科學大會論文摘要匯編(2)[C];2011年

6 張雯;翟莎;丁文翠;王戰(zhàn)建;;T2DM患者合并NAFLD的危險因素分析及機制探討[A];中華醫(yī)學會第十次全國內(nèi)分泌學學術會議論文匯編[C];2011年

7 萬燕萍;徐仁應;方華;陸麗萍;張曉敏;蔡威;;不同年齡性別腰圍百分位值對兒童NAFLD的預測價值[A];中華醫(yī)學會第十一屆全國營養(yǎng)支持學術會議論文匯編[C];2008年

8 何興祥;;NAFLD診斷與治療的新理念[A];第二屆廣東肝膽胰疾病防治論壇論文匯編[C];2012年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張運佳;NAFLD患者非高密度脂蛋白膽固醇與頸動脈粥樣硬化的相關性研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 張金文;小檗堿對NAFLD大鼠肝組織Nrf2-ARE信號通路mRNA及蛋白表達的影響[D];暨南大學;2015年

3 孔曉玲;ω-3多不飽和脂肪酸治療非酒精性脂肪性肝�。∟AFLD）的基礎與臨床研究[D];大連醫(yī)科大學;2011年

4 趙媛媛;羅格列酮對IGT合并NAFLD大鼠肝細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激機制的研究[D];山西醫(yī)科大學;2014年

5 侯景靜;海狗油ω-3多不飽和脂肪酸對小鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的預防作用[D];大連醫(yī)科大學;2010年

6 李美蓉;非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）胰島素抵抗機制的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2008年

  本文關鍵詞：小檗堿對NAFLD大鼠肝組織Nrf2-ARE信號通路mRNA及蛋白表達的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：277854