【摘要】：目的:分析咬合創(chuàng)傷伴牙周炎實驗?zāi)Ｐ脱乐芙M織中白細(xì)胞介素17(IL-17)在不同時間的表達(dá)變化以及其他病理組織改變情況,進(jìn)一步明確咬合創(chuàng)傷與牙周炎以及IL-17與牙周炎的關(guān)系,為臨床工作中疾病的治療提供更理性的方法和實驗依據(jù)。方法:選用購于河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心的三個月大的Wistar雄性大鼠120只,體重250-280g。清潔,良好的口腔衛(wèi)生,沒有口腔疾病,良好的咬合關(guān)系。隨機(jī)將大鼠分為對照組(CG),咬合創(chuàng)傷組(OG),牙周炎組(PG),咬合創(chuàng)傷伴牙周炎組(OPG)四個組,30只大鼠為一組。再按照1d、3d、1w、2w、4w、6w將各組分成六小組,每組5只。對大鼠進(jìn)行麻醉和消毒。麻醉是用100g/L濃度水合氯醛(3ml/Kg)腹腔注射,消毒是用1%碘酊和75%酒精消毒口腔的兩側(cè)黏膜。咬合創(chuàng)傷組(OG)每只大鼠用復(fù)合樹脂光固化粘結(jié)長1-2mm,直徑0.6mm的正畸方絲于左側(cè)上頜第一磨牙牙合面中央。該組通過粘附一正畸方絲,使咬合面增高0.5-0.8mm,來創(chuàng)建咬合創(chuàng)傷。牙周炎組(PG)每只大鼠用直徑0.2mm金屬結(jié)扎絲來結(jié)扎左側(cè)下頜第一磨牙,并盡量位于齦溝內(nèi)。咬合創(chuàng)傷伴牙周炎組(OPG)每只大鼠用復(fù)合樹脂光固化粘結(jié)長1-2mm,直徑0.6mm的正畸方絲于左側(cè)上頜第一磨牙牙合面中央,在左側(cè)下頜第一磨牙齦溝內(nèi)位置結(jié)扎直徑0.2mm金屬絲。對照組(CG)大鼠不做處理。所有的大鼠裝在無病原體的籠子里,25攝氏度,濕度60%-70%,飼喂商業(yè)飼料。分別在第1d、3d、1w、2w、4w、6w將每組大鼠腹部注射10%水合氯醛進(jìn)行麻醉,進(jìn)行4%多聚甲醛的反心臟方向灌注,立即解剖左側(cè)上頜下頜磨牙區(qū)的牙周組織。去除實驗牙上結(jié)扎絲及影響材料。將組織用4%多聚甲醛溶液在4℃環(huán)境中固定48h,然后用10%EDTA溶液脫鈣4W,然后進(jìn)行包埋,取正中矢狀面切片,厚度5μm。進(jìn)行HE染色和IL-17免疫組織化學(xué)染色,觀察牙周組織病理變化和IL-17陽性細(xì)胞數(shù)目及染色情況。對IL-17免疫組織化學(xué)染色的結(jié)果用Image Pro-Plus6.0圖像分析軟件進(jìn)行分析。用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果:1 HE染色結(jié)果1.1對照組對照組各小組間染色結(jié)果無明顯差異。牙周膜纖維分布位置井然有序,可見排列整齊的成纖維細(xì)胞,其排列相平于纖維束長軸方向。牙周韌帶的頂端與牙槽骨緊密相連。牙骨質(zhì)平面光整,有扁平的成牙骨質(zhì)細(xì)胞在牙骨質(zhì)表面的牙周膜中。牙槽骨與牙周膜臨界處表面平整,可見成骨細(xì)胞。在牙周膜和牙槽骨中可見血管,幾乎沒有血細(xì)胞在血管中。1.2實驗組咬合創(chuàng)傷組(OG):1d組與對照組表現(xiàn)相似,牙周組織無明顯改變。3d組實驗?zāi)パ腊Y狀較輕,牙周膜纖維組織排列紊亂,牙周膜毛細(xì)血管擴(kuò)張,偶見多核巨細(xì)胞,可能是破骨細(xì)胞。1w組牙周膜纖維組織排列紊亂明顯,破骨細(xì)胞位于牙槽骨表面。2w組牙周纖維更加紊亂,破骨細(xì)胞數(shù)目增加,骨吸收活動加強(qiáng)。4w組破骨細(xì)胞數(shù)目最多最活躍,出現(xiàn)明顯骨吸收,結(jié)締組織纖維變性溶解,病損程度達(dá)高峰。6w組與4W組比較,癥狀有所減輕。但仍可見破骨細(xì)胞。整個過程牙齦無較大變化。牙周炎組(PG):1d組實驗?zāi)パ腊Y狀較輕,可見牙周膜纖維組織排列紊亂。3d組實驗?zāi)パ姥乐芙M織出現(xiàn)毛細(xì)血管擴(kuò)張充血。結(jié)締組織內(nèi)可見少量炎細(xì)胞,上皮釘突增多變長,出現(xiàn)破骨細(xì)胞。1w組纖維結(jié)締組織排列明顯紊亂,有破骨細(xì)胞和骨吸收。2w組,實驗牙牙槽骨骨吸收更加明顯,骨吸收陷窩增大,破骨細(xì)胞數(shù)目增加,大量炎細(xì)胞浸潤牙周組織,結(jié)締組織纖維變性溶解,病損程度達(dá)高峰。4w組6w組病損程度逐漸減輕,破骨細(xì)胞數(shù)目減少,可見成骨細(xì)胞。咬合創(chuàng)傷伴牙周炎組(OPG):1d組實驗?zāi)パ姥乐芙M織毛細(xì)血管擴(kuò)張充血,纖維排列紊亂,結(jié)締組織內(nèi)可見少量炎細(xì)胞。3d組實驗?zāi)パ姥啦酃潜砻娉霈F(xiàn)破骨細(xì)胞,纖維排列更加紊亂。1w組破骨細(xì)胞數(shù)目增多,血管擴(kuò)張充血更加嚴(yán)重,炎細(xì)胞增多。2w組實驗牙牙周結(jié)締組織的基質(zhì)及膠原纖維變性,溶解。破骨細(xì)胞明顯增多,牙槽骨吸收破壞明顯,病損程度達(dá)高峰。4w組6w組病損程度逐漸減輕,仍有毛細(xì)血管擴(kuò)張充血和炎細(xì)胞浸潤結(jié)締組織,牙槽骨破壞不再活躍,有的部位可有成骨細(xì)胞。2白細(xì)胞介素17(IL-17)免疫組化表達(dá)2.1對照組對照組各小組間染色結(jié)果無明顯差異。大鼠的牙齦結(jié)締組織固有層及牙周膜的成纖維細(xì)胞中有弱陽性表達(dá)。2.2實驗組1d組中IL-17呈弱陽性表達(dá),3d、1w組牙周組織中IL-17的陽性表達(dá)逐漸增強(qiáng)。牙周炎組和咬合創(chuàng)傷伴牙周炎組2W達(dá)到高峰,咬合創(chuàng)傷組4w組達(dá)到高峰,高峰期后的實驗組中IL-17表達(dá)強(qiáng)度降低,但依然有較高表達(dá)。在每個實驗組中,隨著實驗時間的延長,IL-17的表達(dá)強(qiáng)度都呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。將咬合創(chuàng)傷組(OG),牙周炎組(PG),咬合創(chuàng)傷伴牙周炎組(OPG)三個實驗組中相同時間所對應(yīng)的IL-17的陽性表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行比較,咬合創(chuàng)傷伴牙周炎組(OPG)高于其他兩組。3數(shù)據(jù)分析結(jié)果將OG組、PG組、OPG組染色結(jié)果分別與對照組用Kruskal-Wallis H檢驗進(jìn)行比較,均得出P0.05,即有統(tǒng)計學(xué)意義,進(jìn)行Wilcoxon秩和檢驗,結(jié)果是OG組與對照組在1d、3d組P0.05,無統(tǒng)計意義,在其他時間組均有統(tǒng)計學(xué)意義,PG組與對照組在1d組P0.05,無統(tǒng)計意義,在其他時間組均有統(tǒng)計學(xué)意義。OPG組與對照組比較,結(jié)果均為P0.05,均有統(tǒng)計學(xué)意義;將OG組、PG組、OPG組組內(nèi)的各小組染色結(jié)果分別用Kruskal-Wallis H檢驗進(jìn)行比較,均得出P0.05,即OG組各小組間、PG組各小組間、OPG組各小組間有統(tǒng)計學(xué)意義;用Kruskal-Wallis H檢驗分別比較OG組與OPG組、PG組與OPG組,均得出P0.05,即OG組與OPG組、PG組與OPG組比較,均有統(tǒng)計學(xué)意義。進(jìn)行Wilcoxon秩和檢驗,結(jié)果是OG組與OPG組在3d、1w、2w組P0.05,有統(tǒng)計意義。PG組與OPG組在3d、1w、2w、4w組P0.05,有統(tǒng)計意義。結(jié)論:1 IL-17在牙周組織中的表達(dá)強(qiáng)度與牙周組織破壞程度成正相關(guān),IL-17在牙周炎中有一定作用,可能參與牙周組織的破壞。2咬合創(chuàng)傷對牙周組織造成損傷和破壞,可引起牙周疾病,并促進(jìn)牙周炎的進(jìn)展。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R781.4;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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1 徐琛蓉;趙川江;吳穎;;廣泛型侵襲性牙周炎患者齦溝液中白介素-17的檢測[J];口腔醫(yī)學(xué);2010年03期

2 張旭;汪饒饒;徐遠(yuǎn)志;唐小山;尚光偉;;慢性牙周炎患者IL-17mRNA的表達(dá)及意義[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2013年09期

3 楊斯惠;鐘良軍;;TH17細(xì)胞與牙周病相關(guān)性研究進(jìn)展[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2013年01期

4 林丹萍;王威棟;李璐;葉宇;孫穎;徐艷;;IL-17對人牙周膜成纖維細(xì)胞RANKL表達(dá)的影響[J];口腔醫(yī)學(xué);2014年06期

本文編號：2766316