【摘要】：目的:在七氟醚麻醉下進行剖腹探查手術(shù)制備老齡小鼠術(shù)后認知功能障礙(Postoperative cognitive dysfunction,POCD)模型,觀察老齡小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子及其前體的表達變化與其認知功能和海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)改變的關(guān)系,研究術(shù)后認知功能保護的途徑。方法:采用健康無污染的C57BL6老年雄性小鼠108只,月齡17-18月。采用隨機數(shù)字表法將小鼠分為3組,每組36只(n=36):對照組(C組)、麻醉組(A組)、手術(shù)組(S組)。手術(shù)組(S組)在專用麻醉裝置下采用4%七氟醚對小鼠進行麻醉,采用剖腹探查的方法建立手術(shù)模型;麻醉組(A組)只采用4%七氟醚對小鼠進行麻醉,A組麻醉時間與S組麻醉手術(shù)時間相同;對照組(C)組不做特殊處理。以Morris水迷宮實驗作為模型是否建立成功的判斷標準,記錄小鼠水迷宮測試游泳距離和逃避潛伏期,記錄結(jié)果的平均值作為術(shù)前結(jié)果。分別于術(shù)后第3、7天重復(fù)術(shù)前測試操作,記錄小鼠游泳距離和逃避潛伏期,記錄結(jié)果的平均值作為術(shù)后結(jié)果。于術(shù)后第3、7天水迷宮試驗后,收集標本。分別采用HE染色和高爾基組織學(xué)染色(Golgi-Cox staining)的方法來觀察發(fā)生術(shù)后認知功能障礙的老齡小鼠相對于正常老齡小鼠海馬區(qū)神經(jīng)元組織病理變化和形態(tài)學(xué)改變,免疫印跡(Western Blot)法測定小鼠腦海馬區(qū)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子前體(precursor of brain-derived neurotrophic factor,pro BDNF)蛋白的表達,酶聯(lián)免疫吸附實驗(enzyme lined immunosorbent assay,ELISA)法測定小鼠腦海馬區(qū)組織型纖溶酶原激活劑(tissue plasminogen activator,t PA)的表達。結(jié)果:1.與對照組(C組)相比,和麻醉組(A組)和手術(shù)組(S組)小鼠水迷宮小鼠游泳距離和逃避潛伏期延長(P0.05);BDNF和pro BDNF蛋白的表達水平上調(diào)(P0.05);t PA蛋白的表達水平上調(diào)(P0.05);HE染色顯示海馬CA1區(qū)錐體細胞形態(tài)排列紊亂,胞漿深染,核固縮;高爾基染色顯示海馬神經(jīng)元細胞軸突、樹突分支稀疏,長度減小。2.與麻醉組(A組)相比,手術(shù)組(S組)小鼠水迷宮小鼠游泳距離和逃避潛伏期延長(P0.05);BDNF和pro BDNF蛋白的表達水平上調(diào)(P0.05);t PA蛋白的表達水平上調(diào)(P0.05);HE染色顯示海馬CA1區(qū)錐體細胞形態(tài)排列紊亂,胞漿深染,核固縮;高爾基染色顯示海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞軸突、樹突分支稀疏,長度減小(P0.05)。結(jié)論:1.七氟醚麻醉和七氟醚麻醉下手術(shù)刺激均可引起老齡小鼠術(shù)后認知能力下降,后者引起老齡小鼠術(shù)后認知能力下降更明顯;2.七氟醚麻醉和七氟醚麻醉下手術(shù)刺激均可以使老齡小鼠BDNF和pro BDNF以及t PA蛋白表達上調(diào),后者老齡小鼠BDNF和pro BDNF以及t PA蛋白表達上調(diào)更明顯;3.七氟醚麻醉和七氟醚麻醉下手術(shù)刺激均可引起老齡小鼠海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡和神經(jīng)元形態(tài)改變,后者老齡小鼠海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡和神經(jīng)元形態(tài)改變更明顯。
【圖文】：

結(jié)果結(jié)果1.水迷宮試驗情況Morris 水迷宮測試結(jié)果顯示：組內(nèi) S 組與術(shù)前相比術(shù)后 3d、7d 逃避潛伏期和游泳距離增加（P＜0.05）；與 C 組比較，A 組和 S 組術(shù)后 3d、7d 逃避潛伏期和游泳距離增加（P＜0.05）；組內(nèi) A 組和 S 組與術(shù)前相比術(shù)后 3d、7d 逃避潛伏期和游泳距離增加（P＜0.05），與 A 組比較，S 組術(shù)后 3d、7d 逃避潛伏期和游泳距離增加（P＜0.05）。（圖 1.1,1.2）

各組小鼠術(shù)后各時間點海馬區(qū)BDNF和proBDNF蛋白表達情況（*P＜0.05，VSC組；#P＜0.05，，VSA組）
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R614

【參考文獻】

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本文編號：2666566