【摘要】：目的：探討齊墩果酸（Oleanolic acid, OA）對果糖所致大鼠脂肪肝的作用效果并闡明其可能的作用機制。 方法：將24只SPF級雄性SD大鼠（體重210~230g）適應性飼養(yǎng)7天后，按照體重大小隨機分為4組（n=6）：（1）正常對照組（controlgroup, CON）：自由飲食，正常飲水；（2）果糖對照組（fructose controlgroup, FRU）：自由飲食，飲用10%果糖水(w/v,每天配制)；（3）果糖齊墩果酸低劑量組（fructose-OA-low-dose group, FOL）：自由飲食，飲用果糖水， OA5mg/kg；（4）果糖齊墩果酸高劑量組（fructose-OA-high-dose group，F(xiàn)OH）：自由飲食、飲用果糖水，OA25mg/kg。每三天記錄一次體重，并根據(jù)體重變化調(diào)整用藥組大鼠給藥量。用藥組起始果糖水濃度均為10%，每天記錄飲用果糖水量，并對果糖水濃度作相應調(diào)整，使用藥組大鼠果糖攝入量與FRU組一致。各組大鼠飼養(yǎng)10周末，夜間禁食14h后，隔日稱體重，乙醚麻醉下摘除眼球取血，分離血漿檢測TG、TC、NEFA、GLU、INSULIN濃度；處死大鼠，取肝臟，同時對附睪脂肪（epididymal adipose）和腎周脂肪（peri-renal adipose）稱重，行肝臟HE染色和油紅O染色，同時檢測肝臟TG、TC含量；提取肝組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄mRNA獲得cDNA，，用Real-Time PCR方法檢測肝臟脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄因子SREBP-1c、ChREBP及其下游相關(guān)基因FAS、ACC-1、SCD-1、LPK、MTTP和脂質(zhì)氧化相關(guān)基因PPARα、CPT1a、ACO及PPARγ、CD36、G6Pase的mRNA水平；提取肝細胞核蛋白，用Western blot方法檢測調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成的兩個關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子SREBP-1c和ChREBP的蛋白表達量。實驗數(shù)據(jù)應用StatView統(tǒng)計軟件進行分析，以均數(shù)±標準誤（x±SEM）表示，t檢驗進行兩組數(shù)據(jù)的差異比較。 結(jié)果： 1.相對于CON組，F(xiàn)RU組、FOL組、FOH組的能量攝入量要顯著高于CON組，且差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）； 2.相對于CON組，飲用果糖水的FRU組、FOL組、FOH組大鼠內(nèi)臟脂肪量，即附睪脂肪和腎周脂肪重量（e+p WAT）增加明顯（P0.05）；OA用藥組相對FRU組大鼠e+p WAT下降趨勢不明顯（P0.05）；同樣，相對于CON組，F(xiàn)RU組大鼠肝臟重量增加明顯（P0.05），但用藥組大鼠肝臟重量下降趨勢不明顯（P0.05）； 3.相對于CON組，F(xiàn)RU組大鼠血清生化指標TC、TG、GLU、INSULIN濃度升高明顯，差異有統(tǒng)計學意義（P0.05）；相對FRU組，OA用藥組大鼠血清GLU下降明顯（P0.05），且FOL組、FOH組大鼠血清TC、TG、NEFA和INSULIN相對于FRU組都呈劑量依賴性下降，但差異沒有統(tǒng)計學意義（P0.05）； 4.與CON組相比，F(xiàn)RU組大鼠肝臟TC沒有明顯變化，但TG增高顯著（P0.05），且油紅O染色結(jié)果顯示，F(xiàn)RU組大鼠肝臟脂質(zhì)沉積嚴重（P0.05）；相對于FRU組，OA高劑量用藥組FOH大鼠肝臟TG下降明顯，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.05）；油紅O染色結(jié)果提示，F(xiàn)OH組大鼠肝臟脂質(zhì)沉積情況明顯輕于FRU組（P0.05）； 5. Real-Time PCR實驗結(jié)果顯示，與CON組相比，F(xiàn)RU組大鼠肝臟SREBP-1c、ChREBP、FAS、ACC-1、SCD-1等脂質(zhì)合成基因mRNA顯著升高（P0.05）；相對于FRU組，F(xiàn)OH用藥組大鼠肝臟SREBP-1c、ChREBP、FAS、ACC-1、SCD-1mRNA水平顯著降低（P0.05）；6. Western blot實驗結(jié)果表明，與CON組相比，F(xiàn)RU組大鼠肝臟脂質(zhì)合成基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子SREBP-1c和ChREBP蛋白表達量增高（P0.05），相對于FRU組，F(xiàn)OH組大鼠肝細胞核SREBP-1c蛋白表達水平顯著降低（P0.05），而FOH組大鼠肝臟細胞核ChREBP蛋白表達量變化不大（P0.05）。 結(jié)論： 1高果糖飲食后，大鼠脂質(zhì)代謝發(fā)生紊亂，脂肪肝形成； 2齊墩果酸對果糖造成的大鼠脂肪肝有明顯的改善作用； 3齊墩果酸對果糖所致大鼠脂肪肝的作用與其下調(diào)肝臟脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄因子SREBP-1c，減少其下游相關(guān)基因的mRNA表達量密切相關(guān)。
【圖文】：

28注：* p<0.05。圖 1 OA 對果糖飲食后大鼠能量攝入量、體重和白色脂肪量的影響Fig.1 Effect of OA on energy intake, body weight and e+p WAT in fructose diet rats2.2 大鼠血漿脂質(zhì)代謝相關(guān)生化指標的變化2.2.1 果糖水飲用 10 周后大鼠各項血漿生化指標的變化相對于 CON 組，F(xiàn)RU 組大鼠血清生化指標 TC、TG、GLU、INSULIN 濃明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）（圖 2a-b, d-e）；而 FRU 組大鼠血清 NE相對于 CON 組顯著降低（P<0.05）（圖 2c）。

2 大鼠血漿脂質(zhì)代謝相關(guān)生化指標的變化xpression of rats plasma lipid metabolism related代謝相關(guān)指標的變化情況后大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)指標的變化雖然 FRU 組大鼠肝臟重量、肝重體重比和計學意義（P>0.05）（圖 3a-c）；FRU 組大差異達 3 倍左右（P<0.05）（圖 3d），另外， 組大鼠肝臟細胞空泡明顯（圖 4a-b）、脂質(zhì)沉
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前7條

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本文編號：2575576