【摘要】：目的：利用成功建立的裸鼠80%肝組織切除模型，研究豬肝細(xì)胞異種移植對(duì)裸鼠肝功能的影響及在減少其死亡率，延長其生存時(shí)間，降低小肝綜合征發(fā)生率，促進(jìn)其肝組織再生修復(fù)中的作用。 方法：將20只裸鼠（5周齡,體重22.71±1.11g）術(shù)前禁食水6小時(shí)，術(shù)前5分鐘給予1%戊巴比妥0.01ml/g腹腔注射麻醉，麻醉顯效后行腹部正中切口顯露肝臟，行肝大部切除術(shù)，切除80%肝組織，建立小肝綜合征動(dòng)物模型，然后隨機(jī)分為2組（豬肝細(xì)胞移植組和對(duì)照組）,每組10只。選取實(shí)驗(yàn)小香豬一頭，行肝葉切除，制備豬肝細(xì)胞懸液，將制備好的豬肝細(xì)胞懸液注射于移植組小肝綜合征裸鼠腹腔內(nèi)，每只裸鼠注射1ml，豬肝細(xì)胞數(shù)量約為1×106個(gè)。對(duì)照組以1ml生理鹽水注入裸鼠腹腔內(nèi)。觀察移植組及對(duì)照組實(shí)驗(yàn)裸鼠的生存時(shí)間及生存狀況；移植前1小時(shí)、移植后1天、4天、7天、14天、28天行心臟穿刺抽血0.1ml做肝功能檢測(cè)，測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartateaminotransferase，AST）值；在移植前1小時(shí)、移植后2天、7天、28天、56天分別對(duì)移植組及對(duì)照組裸鼠經(jīng)腹部正中切口行肝組織活檢和腹腔移植豬肝細(xì)胞活檢，行實(shí)驗(yàn)裸鼠肝組織大體觀察。同時(shí)，肝組織切片蘇木精-伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察肝組織及移植的豬肝細(xì)胞的病理改變。 結(jié)果：①經(jīng)膠原酶灌注法分離可得到豬肝細(xì)胞，臺(tái)盼藍(lán)染色提示豬肝細(xì)胞的存活率為90%以上。移植后56天活檢，移植組裸鼠腹腔內(nèi)可見散在的肝細(xì)胞團(tuán)，行HE染色在光學(xué)顯微鏡下可見豬肝細(xì)胞；②對(duì)照組裸鼠56天的生存率為20%，而豬肝細(xì)胞移植組裸鼠56天存活率為80%；③移植組裸鼠移植前肝功能中ALT、AST值顯著升高，分別達(dá)到ALT525.22±28.21U/L、AST428.32±35.45U/L，達(dá)到小肝綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)，術(shù)后第1天肝功能ALT、AST明顯下降，術(shù)后第7天逐漸平穩(wěn)；對(duì)照組裸鼠移植前肝功能中ALT、AST升高，分別達(dá)到ALT523.13±21.35U/L、 AST426.54±32.65U/L，術(shù)后第4天開始逐漸下降，術(shù)后第28天肝功能逐漸平穩(wěn)。在移植后第1天，，移植組ALT、AST與對(duì)照組比較有顯著性差別（P0.05）。④移植前兩組裸鼠的腹腔可見肝組織部分缺失，顏色稍暗。移植術(shù)后第2天，對(duì)照組肝組織淤血腫脹，不同程度的脂肪變性，腹腔少量渾濁腹水，而移植組肝臟組織顏色稍紅潤，質(zhì)地柔軟，瘀血腫脹及脂肪樣變較輕，無腹水。術(shù)后第7天對(duì)照組可見肝組織較前稍紅潤，質(zhì)地稍柔軟，部分裸鼠仍可見腹水，而移植組可見肝臟組織再生，再生的肝組織質(zhì)地柔軟，顏色紅潤。術(shù)后28天對(duì)照組及移植組可見肝組織與正常裸鼠的肝臟組織體積相仿，質(zhì)地柔軟，色澤紅潤；術(shù)后56天兩組裸鼠均可見肝臟組織色澤、質(zhì)地外觀正常，體積較正常裸鼠肝組織體積增大，肝臟重量增加。⑤肝細(xì)胞移植術(shù)后第2天、第7天，行對(duì)照組及移植組裸鼠肝組織活檢，石蠟包埋切片HE染色病理學(xué)檢查。在光學(xué)顯微鏡下可見對(duì)照組裸鼠中央靜脈重度淤血、肝細(xì)胞氣球樣變明顯，肝細(xì)胞腫脹，出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞壞死，肝索結(jié)構(gòu)消失，大量的炎細(xì)胞浸潤；豬肝細(xì)胞移植組裸鼠肝臟組織中肝細(xì)胞僅見少量的空泡化及脂肪樣變，壞死肝細(xì)胞較少，肝索及匯管區(qū)結(jié)構(gòu)基本正常。移植術(shù)后第56天移植組肝細(xì)胞正常，肝索結(jié)構(gòu)完整，肝小葉結(jié)構(gòu)正常；對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)亦基本恢復(fù)正常，但肝索結(jié)構(gòu)仍較紊亂。 結(jié)論：豬肝細(xì)胞移植到裸鼠腹腔內(nèi)能夠較好地存活；豬肝細(xì)胞移植可以有效改善裸鼠80%肝組織切除后的肝臟功能,降低其死亡率和肝功能衰竭發(fā)生率，從而減少其小肝綜合癥的發(fā)生率，為廣泛肝組織切除術(shù)后裸鼠的肝臟再生和恢復(fù)創(chuàng)造時(shí)間和條件。
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R657.3

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 金銀鵬;傅青春;;肝細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用前景[J];肝臟;2019年08期

2 解文鑫;彭強(qiáng);;肝細(xì)胞移植臨床應(yīng)用[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2014年03期

3 李育蓉;劉振文;呂金輝;侯俊;李進(jìn);侯春梅;胡敏;;肝細(xì)胞移植的研究進(jìn)展[J];軍事醫(yī)學(xué);2012年02期

4 冉江華;劉靜;李立;;人肝細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年53期

5 張敏;劉振文;張玲霞;;肝細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用及前景[J];傳染病信息;2010年06期

6 李灼日;吳一飛;呂新生;;肝細(xì)胞移植的臨床研究進(jìn)展[J];中國普通外科雜志;2009年07期

7 吳旭波;韓寶三;張瑞;黃芳;吳薇;王兆海;彭承宏;;肝細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年53期

8 劉世呈;李靖;;肝細(xì)胞移植的研究進(jìn)展[J];中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2008年02期

9 Stephen C.Strom;賴榮陶;;可能源于干細(xì)胞的肝細(xì)胞移植[J];肝臟;2008年01期

10 王緋;楊永平;;肝細(xì)胞移植基礎(chǔ)與臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J];肝臟;2007年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李因茵;;護(hù)理一例肝細(xì)胞移植患者的體會(huì)[A];全國腫瘤護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會(huì)議論文匯編[C];2005年

2 陳永平;;肝細(xì)胞移植研究進(jìn)展[A];傳染病診治高峰論壇暨2007年浙江省感染病學(xué)、肝病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

3 陳永平;;肝細(xì)胞移植的研究進(jìn)展[A];第十次浙江省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

4 楊永平;;肝細(xì)胞移植:臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)室研究[A];2006年慢性乙型肝炎治療進(jìn)展研討會(huì)資料匯編[C];2006年

5 陳永平;;肝細(xì)胞移植的研究進(jìn)展[A];2008年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

6 權(quán)月;;肝細(xì)胞移植治療急性肝功能衰竭的研究進(jìn)展[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2007年

7 楊永平;;肝細(xì)胞移植：臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)室研究[A];第二屆全國人工肝及血液凈化學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

8 楊文龍;何金秋;;肝細(xì)胞移植治療肝衰竭研究進(jìn)展[A];第三屆全國重型肝病及人工肝血液凈化學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2007年

9 陳利平;葉輝;;大鼠自體肝細(xì)胞移植治療90%肝切除術(shù)后急性肝功能衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[A];2012中國器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

10 李君;李蘭娟;章益民;盛國平;俞海英;曹紅翠;徐威;盛吉芳;黃建榮;;永生化人肝細(xì)胞系的建立及其在細(xì)胞移植中的應(yīng)用[A];2004年浙江省傳染病、肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前7條

1 胥金章　黃顯斌;我國首例肝細(xì)胞移植手術(shù)獲得成功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

2 吳理茂;肝細(xì)胞移植技術(shù)新進(jìn)展[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

3 黃顯斌;我完成首例肝細(xì)胞體內(nèi)移植術(shù)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

4 ;首例肝細(xì)胞移植手術(shù)獲成功[N];科技日?qǐng)?bào);2004年

5 王振坤;什么是肝細(xì)胞移植[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

6 南通大學(xué)附屬醫(yī)院肝膽外科主任 陳鐘;急性肝衰竭的肝細(xì)胞移植[N];健康報(bào);2007年

7 美國《生命科學(xué)》 楊孝文 譯;硫酸不能讓裸鼠產(chǎn)生疼痛[N];北京科技報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 李羽;永生化人胚胎肝細(xì)胞系的建立及肝細(xì)胞移植的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 李曉斌;骨髓干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的肝細(xì)胞移植對(duì)大鼠肝切除術(shù)后肝衰治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

3 江海洪;小鼠胚胎干細(xì)胞向肝前體細(xì)胞誘導(dǎo)分化及其對(duì)實(shí)驗(yàn)性急性肝衰竭的移植治療研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

4 常實(shí);同種異體肝細(xì)胞移植對(duì)大鼠肝臟纖維化的影響[D];中南大學(xué);2007年

5 李俊剛;可回復(fù)永生化人胎肝細(xì)胞系的建立及其移植預(yù)防小鼠急性肝衰竭[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 廖凱男;豬肝細(xì)胞移植治療裸鼠小肝綜合征的實(shí)驗(yàn)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2014年

2 周徐;肝細(xì)胞移植新型細(xì)胞來源及提高肝細(xì)胞移植效率的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2017年

3 葉浩;肝細(xì)胞移植聯(lián)合“養(yǎng)肝合劑”對(duì)兔血吸蟲肝硬化治療效果研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

4 陳勝平;肝細(xì)胞移植治療放射性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2004年

5 姚紫州;胚胎干細(xì)胞來源的肝細(xì)胞移植對(duì)小鼠慢性肝衰竭的治療作用[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

6 肖驍;肝細(xì)胞移植對(duì)裸鼠肝銅代謝的影響[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

7 梁冬明;HGF在肝細(xì)胞移植治療大鼠急性肝功能衰竭中的表達(dá)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

8 劉妍芳;微囊化羅非魚肝細(xì)胞移植治療大鼠急性肝功能衰竭的實(shí)驗(yàn)觀察[D];同濟(jì)大學(xué);2007年

9 張克;乙型肝炎病毒體外感染胎肝細(xì)胞及阿德福韋耐藥的初步研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 徐哲;微載體粘附培養(yǎng)肝細(xì)胞的生物學(xué)特性及其移植治療大鼠急性肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

本文編號(hào)：2563000