【摘要】：目的:研究重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老小鼠的抗衰老及其美白作用。方法:(1)重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白抗衰老作用實(shí)驗(yàn)研究?體內(nèi)實(shí)驗(yàn)除正常對(duì)照組外,其余4組全部采用D-半乳糖誘導(dǎo)小鼠的衰老模型。將健康昆明小鼠隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、rLZ-8低、中、高劑量組(劑量由低到高分別為660,990及1320ug/kg體重)。連續(xù)給予受試藥物(小鼠背部去毛后涂抹給藥)8周后,麻醉取血與皮膚組織,用于血清學(xué)與組織形態(tài)學(xué)等指標(biāo)檢測。?體外實(shí)驗(yàn)體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,將細(xì)胞分為4組:正常對(duì)照組、rLZ-8低、中、高劑量組(0.5,1及2ug/ml),分別于24h,48h,72h收集6孔板中細(xì)胞培養(yǎng)上清以檢測膠原、HA及HYP含量。(2)重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白美白作用實(shí)驗(yàn)研究體外培養(yǎng)黑色素瘤細(xì)胞,均勻接種于6孔培養(yǎng)板中,細(xì)胞接種24h后,吸去培養(yǎng)液,加入無血清培養(yǎng)液。次日,加入受試藥物rLZ-8使終濃度為8,16,24,32,48ug/ml,并分別于24h,36h,48h及60h后收集細(xì)胞及培養(yǎng)上清,檢測TYR與LDH活性。同時(shí)采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)測定黑色素瘤細(xì)胞增殖抑制率。結(jié)果:(1)涂抹給藥后,小鼠較造模后毛色變亮,行動(dòng)較為敏捷,外觀方面出現(xiàn)一定程度改觀。(2)給予受試藥物后,各給藥組小鼠皮膚含水量均有不同程度提高。(3)HE染色結(jié)果顯示,rLZ-8各劑量組小鼠皮膚表皮增厚,真皮層纖維增多增粗、皮膚附屬器數(shù)目亦有所增加。(4)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,各劑量組I型、III型膠原蛋白、波形蛋白含量均有提高。(5)血清學(xué)與皮膚組織勻漿結(jié)果顯示,各給藥組與模型對(duì)照組相比,超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、過氧化氫酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、羥脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)、褪黑素(Melatonin,MT)均有明顯上調(diào)(P0.05),丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量降低(P0.05)。(6)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與空白對(duì)照組相比,各給藥組人皮膚成纖維細(xì)胞I型、III型膠原蛋白、透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)及HYP水平均有上調(diào)(P0.05)。(7)rLZ-8可抑制黑色素瘤細(xì)胞增殖速率,同時(shí)降低酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)、乳酸脫氫酶(Lactic dehydrogenase,LDH)活性。結(jié)論:1.rLZ-8可有效改善衰老小鼠的外觀特征及皮膚組織的病理形態(tài),提高皮膚組織中I型、III型膠原蛋白、波形蛋白含量,上調(diào)成纖維細(xì)胞分泌I型、III型膠原蛋白、HYP及HA,體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)共同證實(shí)重組靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白具有抗衰老作用。2.rLZ-8可提高抗氧化物酶(SOD、CAT及GSH-Px)活性、上調(diào)HYP、MT水平,下調(diào)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA水平,增強(qiáng)衰老小鼠機(jī)體抗氧化能力,發(fā)揮其延緩機(jī)體衰老的作用。3.rLZ-8可以抑制黑色素瘤細(xì)胞增殖降低黑色素合成過程中限速酶TYR的活性,破壞黑色素瘤細(xì)胞,以達(dá)到美白肌膚的作用。
【圖文】：

造模前后小鼠外觀變化圖

厚度有所增加，膠原纖維較模型對(duì)照組明顯增多增粗且分布趨于均勻，皮膚器形態(tài)有較好改善，數(shù)目亦有所增加；其中中、高劑量組較低劑量組皮膚改為明顯。各劑量給藥組的同體實(shí)驗(yàn)側(cè)小鼠皮膚較模型對(duì)照組亦有一定改善作但遠(yuǎn)不及各實(shí)驗(yàn)組明顯。HE 染色結(jié)果見圖 2.3。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R285

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9 蔣保祥;影響中藥免疫調(diào)節(jié)因素的探討[J];江蘇中醫(yī);1999年05期

10 ;靈芝的“扶正祛邪”與免疫調(diào)節(jié)[J];老年人;2013年07期

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本文編號(hào)：2559959