【摘要】：目的:糖尿病是威脅人類健康主要疾病之一。據(jù)統(tǒng)計糖尿病患者中心血管并發(fā)癥所導(dǎo)致的死亡率75%,其中大多數(shù)是死于糖尿病相關(guān)的冠心病。臨床上糖尿病患者可出現(xiàn)各種類型心律失常,但其發(fā)病機制目前仍未完全明確。同時臨床上也缺乏有效的治療手段,主要是抗心律失常藥物及導(dǎo)管消融,對于緩慢性心律失常通過植入永久起搏器治療,對于VT/VF還可植入ICD。雖然這些治療措施積極有效,但同時也有其局限性。近年來,人們提出的針對心肌離子電流紊亂、折返環(huán)形成及異位興奮點等的病理生理學(xué)上游治療的概念�？p隙連接(gap junction,GJ)是心肌細胞間特殊的連接方式,常見于心肌間閏盤處。GJ中的連接蛋白(connexin,Cx)在細胞偶聯(lián)中發(fā)揮著重要的作用。心肌的連接蛋白主要有Cx40、Cx43及Cx45三種。已有研究證實Cx40主要分布于心房肌及心室肌中,Cx43則主要分布于心室肌,在心房肌中僅有低水平表達,Cx45分布于心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng)中。在電傳導(dǎo)方面,Cx40及Cx43具有快速傳導(dǎo)的特點,而Cx45的傳導(dǎo)速率相比而言卻要慢很多,可能是在心電傳導(dǎo)中起到調(diào)控作用。糖尿病所致的心律失常發(fā)生與心肌組織的被動電特性及傳導(dǎo)性有關(guān),而細胞-細胞之間的傳導(dǎo)性正是由位于閏盤的縫隙連接(GJ)所決定。研究證實RAAS的過度激活、氧化應(yīng)激、心肌纖維化等可是導(dǎo)致糖尿病心肌Cx表達與分布異常的原因。本研究通過分析糖尿病大鼠心肌Cx40表達與分布的改變,探討參松養(yǎng)心膠囊及貝那普利對糖尿病大鼠心肌Cx40的影響。方法:對購自南京青龍山動物飼養(yǎng)中心的雄性SD大鼠50只進行隨機分組,空白對照組10只,模型組40只。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,模型組予以一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin,SZT)65mg/kg,3天后測尾靜脈血糖,血糖≥16.7mmol/l為造模成功。最終糖尿病大鼠成模37只,模型組再隨機分為糖尿病對照組12只,貝那普利組12只及參松養(yǎng)心膠囊組13只。貝那普利組予以每日貝那普利7.5mg/kg灌胃,參松養(yǎng)心膠囊組予以每日參松養(yǎng)心膠囊1g/kg灌胃,空白對照組及糖尿病組每日予以等量蒸餾水灌胃。各組予以充足食物及水飼養(yǎng)8周后,予以25%烏拉坦6ml/kg腹腔注射,麻醉后行心電圖檢查。斷頭猝死,暴露心臟,取心臟,置于4℃生理鹽水中洗滌。沿心臟長軸切開,再沿房室溝切開,分別取出左房及左室。標(biāo)本分成兩部分,其中一份浸入福爾馬林組織固定液中浸泡一周,另一部分放置-80℃超低溫冰箱中保存。采用westernbloting技術(shù)分別對各組心室肌及心房肌cx40表達水平進行分析。采用he染色技術(shù)觀察各組大鼠心肌結(jié)構(gòu)改變并采用免疫熒光技術(shù)對心肌cx40分布情況進行分析。結(jié)果:1、飼養(yǎng)8周后,糖尿病大鼠出現(xiàn)明顯的三多一少癥狀,心電圖顯示糖尿病組大鼠出現(xiàn)各種類型心律失常,糖尿病大鼠組心率較其他三組明顯下降(p0.05),糖尿病組p波寬度增寬,與正常對照組及貝那普利組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),但與參松養(yǎng)心膠囊組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。四組間qrs時間、qtc比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2、糖尿病組大鼠心房肌及心室肌cx40水平較正常對照組下降(p0.05),貝那普利組心房肌及心室肌cx40表達水平較糖尿病組有升高趨勢(p0.05),參松養(yǎng)心膠囊組心房肌cx40表達水平較糖尿病組有升高趨勢,但心室肌cx40表達水平較糖尿病組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)3、he染色顯示正常對照組大鼠心肌細胞排列整齊,糖尿病組大鼠出現(xiàn)大片的心肌細胞壞死凋亡,排列紊亂,細胞間多見脂肪組織及纖維組織,貝那普利組及參松養(yǎng)心膠囊組大鼠心肌細胞排列整齊,但仍可見到纖維組織及血管炎性反應(yīng)。3、免疫染色顯示,正常對照組心肌cx40表達分布于心肌細胞長軸的端端,呈階梯狀分布,偶可見于細胞側(cè)面分布。糖尿病組大鼠心肌cx40表達多數(shù)分布于心肌細胞的側(cè)面,分布紊亂,貝那普利組大鼠心肌cx40表達分布呈現(xiàn)端端分布及側(cè)面化分布并存的現(xiàn)象,參松養(yǎng)心膠囊組心房肌cx40表達水平增高,但分布仍呈現(xiàn)為側(cè)面化分布為主。結(jié)論:1、糖尿病大鼠可出現(xiàn)各種類型心律失常及hr下降等。貝那普利及參松養(yǎng)心膠囊均對hr有提高作用。貝那普利對p波寬度有改善作用,但對qrs時間及qtc影響有限,參松養(yǎng)心膠囊對p波寬度、qrs及qtc影響有限。2、cx40主要分布與心房肌中,在心室肌中分布較少。糖尿病大鼠心肌出現(xiàn)Cx40表達的下降及分布呈側(cè)面化表現(xiàn)。3、貝那普利對糖尿病大鼠心肌Cx40的表達及分布均有一定的改善作用,參松養(yǎng)心膠囊對糖尿病大鼠心房肌Cx40的表達有一定的上調(diào)作用,但對其空間分布影響較小;參松養(yǎng)心膠囊對糖尿病大鼠心室肌Cx40的表達及分布無明顯改善作用
【圖文】：

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文Connexin40 的表達[10]。我們實驗中通過 Western blotting 技術(shù)比較心房與心室肌Connexin40 的表達，，及免疫熒光技術(shù)分析 Cx40 分布再次驗證 Cx40 在心房及心室中分布的差異。結(jié)果表明，Connexin40 在心房中表達遠高于心室，且這種差異也同樣存在于糖尿病組、貝那普利組及參松養(yǎng)心膠囊組大鼠心肌中。4.1 大鼠心室肌及心房肌 Cx40 表達差異 Western blotting 圖及免疫熒光圖（圖 2）圖 2 正常組大鼠心室肌及心房肌 Cx40 表達差異

25注: 圖 3 中 A（正常對照組）：心肌細胞排列規(guī)則、緊密；B（糖尿病組）心肌排列紊亂，可見心肌間大量的脂肪浸潤，大片的無核淡染區(qū)及血管炎性反應(yīng)；C（貝那普利組）心肌細胞排列規(guī)則，但組織較疏松；D（參松養(yǎng)心膠囊組）可見心肌細胞排列欠規(guī)則，少許無核淡染區(qū)及少許血管炎性反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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1 張莉;汪蓮開;陳世健;胡建華;;參松養(yǎng)心膠囊對糖尿病大鼠心房重構(gòu)及心律失常的影響[J];中成藥;2015年12期

2 肖婷;羅健;吳志雄;周松柏;李芳;楊軍;;硫化氫對糖尿病大鼠心肌纖維化及CX40和CX45表達的影響[J];中國老年學(xué)雜志;2015年21期

3 Bing Sun;Jin-Fa Jiang;Cui-Mei Zhao;Chao-Hui Hu;;Effects of antiarrhythmic peptide 10 on acute ventricular arrhythmia[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2015年03期

4 鄔藝忠;劉超;劉泉;;Connexins異常表達參與的新生兒先天性心臟病發(fā)病機制研究[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2015年06期

5 陳春燕;韓新源;酉鵬華;程功;孫超峰;;卡托普利對兔心房組織Cx40、Cx43表達增齡性變化的影響[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

6 劉秋晨;張馳;施春花;韓玲;杜曉秋;戴駿琪;謝可鳴;孫曉東;張克平;劉立民;;不同麻醉藥對小鼠缺氧耐受性的影響及機制研究[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2013年18期

7 楊慧;王紅霞;李匯華;;腎素-血管緊張素系統(tǒng)對心血管系統(tǒng)疾病的網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)[J];生理科學(xué)進展;2013年03期

8 石茂靜;董蕾;劉浩;郭繼鴻;劉元生;;糖尿病與非糖尿病患者發(fā)生心律失常類型和危險因素分析[J];中國心臟起搏與心電生理雜志;2012年05期

9 涂焰明;吳鏗;;炎癥因子——核因子-κB對糖尿病心肌病的影響[J];國際心血管病雜志;2012年01期

10 余志斌;圣娟娟;;心肌細胞縫隙連接重塑與心律失常[J];生理學(xué)報;2011年06期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 劉玉勝;DPP—Ⅳ抑制劑對糖尿病大鼠左室心肌重塑與功能的影響及作用機制[D];山東大學(xué);2013年

2 李寧;參松養(yǎng)心膠囊抗心律失常機理研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

3 謝利劍;Connexin43基因與先天性心臟病發(fā)病機制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前4條

1 褚淑蕾;PI3k-Akt信號通路在2型糖尿病大鼠易發(fā)心房顫動中的介導(dǎo)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 吳志雄;硫化氫對糖尿病大鼠心肌氧化應(yīng)激和細胞凋亡的拮抗作用[D];南華大學(xué);2015年

3 梁瀟;鹽酸貝那普利對糖尿病大鼠P53、α-SMA基因表達的影響[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2015年

4 趙峰;風(fēng)心病慢性心房顫動左房及界嵴Cx40蛋白和mRNA表達研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

本文編號：2550272