【摘要】：目的:探討自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)大、小動(dòng)脈血管重構(gòu)的差異。方法:以20周齡雄性SHR為實(shí)驗(yàn)組,同齡Wistar-Kyoto(WKY)大鼠為對(duì)照組。每周測(cè)量體重和血壓,43周齡大鼠麻醉取血,留取胸主動(dòng)脈和腸系膜小動(dòng)脈組織。HE染色觀察比較大、小動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化,天狼星紅-維多利亞藍(lán)染色檢測(cè)膠原纖維和彈力纖維變化,激光掃描共聚焦顯微鏡和Western blot分析Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá),透射電子顯微鏡觀察動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)變化,原位末端標(biāo)記法(TUNEL)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)檢測(cè)評(píng)估血管壁細(xì)胞凋亡與增殖情況。結(jié)果:小動(dòng)脈血管內(nèi)徑(ID)和血管腔橫截面積(LCSA)減小,壁厚內(nèi)徑比(WT/ID)和壁腔橫截面積比(WCSA/LCSA)增大,外膜成纖維細(xì)胞增殖并部分遷移,膠原增多,以III型膠原增多為主,血管壁細(xì)胞的增殖指數(shù)和凋亡指數(shù)增加;主動(dòng)脈ID、LCSA、WT/ID和WCSA/LCSA均增大,中層血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)肥大增生明顯,膠原增多,血管壁細(xì)胞的增殖指數(shù)和凋亡指數(shù)增加。結(jié)論:高血壓大鼠大、小動(dòng)脈血管重構(gòu)差異明顯,小動(dòng)脈以基質(zhì)增多,特別是外膜III型膠原蛋白增多為主,血管壁細(xì)胞凋亡增加;大動(dòng)脈以血管壁細(xì)胞增生,特別是VSMCs增生、肥大為主。
【圖文】：

個(gè)視野中的PCNA陽(yáng)性細(xì)胞或凋亡細(xì)胞總數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%。4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有統(tǒng)計(jì)分析均應(yīng)用SPSS13．0軟件處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，兩組間均數(shù)比較采用非配對(duì)t檢驗(yàn)，以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1血壓、體重及血清指標(biāo)的比較與WKY-C組大鼠相比，SHＲ-C組大鼠的血壓明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．01)，然而，對(duì)于體重、BUN、SCr、BS、TG、TC及LDL-C，兩組大鼠間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，見圖1、表1。Figure1．Thesystolicbloodpressure(SBP)andbodyweightoftherats．Mean±SD．n=10．＊＊P＜0．01vsWKY-Cgroup．圖1大鼠收縮壓和體重變化的比較表1大鼠BUN、SCr、BS、TG、TC及LDL-C的檢測(cè)結(jié)果Table1．ThechangesofBUN，SCr，BS，TG，TCandLDL-Cintherats(Mean±SD．n=10)GroupBUN(mmol/L)SCr(μmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL-C(mmol/L)BS(mmol/L)WKY-C8．32±1．1631．00±2．280．46±0．141．60±0．160．22±0．076．33±0．83SHＲ-C9．90±1．4531．17±4．620．43±0．111．52±0．070．17±0．046．45±0．672各組大鼠動(dòng)脈血管形態(tài)學(xué)變化的比較2．1HE染色WKY-C組大鼠腸系膜小動(dòng)脈及主動(dòng)脈形態(tài)大致正常，各層分界清楚，血管內(nèi)膜光滑，中膜無(wú)肥大增生、平滑肌排列規(guī)則，外膜無(wú)增厚。SHＲ-C組腸系膜小動(dòng)脈管壁增厚，管腔狹窄，中層血管平滑肌細(xì)胞(vascularsmoothmusclecells，VSMCs)排列紊亂，外膜增厚明顯，細(xì)胞增生;主動(dòng)脈管壁增厚，以中層增厚最為明顯，VSMCs肥大增生，中層彈性膜排列紊亂、疏松，厚薄不均且斷裂，部分內(nèi)膜脫落，見圖2。2．2天狼星紅-維多利亞藍(lán)雙染觀察天狼星紅-維多利亞藍(lán)雙染偏振光顯微鏡下觀察，在明場(chǎng)時(shí)，膠原被染成紅色，彈力纖維被染成

0．01或P＜0．05)。SHＲ-C組腸系膜小動(dòng)脈與主動(dòng)脈膠原面積百分比顯著高于WKY-C組，且小動(dòng)脈增加更明顯(P＜0.01)，腸系膜小動(dòng)脈彈性纖維面積百分比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，彈性纖維面積與膠原面積比值顯著低于WKY-C組大鼠(P＜0．05);但主動(dòng)脈SHＲ-C組彈性纖維面積顯著高于WKY-C組(P＜0．05)，彈性纖維面積與膠原面積比值的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P＞0．05)，見圖3～7。Figure3．ThestainingwithSiriusred-Victoriablueofthearterialtissuesintherats．TheA，C，EandGwereunderthelightfield，andtheB，D，F(xiàn)andHwereunderthedarkfield．AandB:WKY-Cgroupofmesentericsmallartery;CandD:SHＲ-Cgroupofmesentericsmallartery;EandF:WKY-Cgroupofaorta;GandH:SHＲ-Cgroupofaorta．圖3大鼠動(dòng)脈組織天狼星紅-維多利亞藍(lán)染色2．3Ⅰ、Ⅲ型膠原的分布及表達(dá)使用激光共聚焦顯微鏡對(duì)Ⅰ、Ⅲ型膠原進(jìn)行熒光分析，膠原被染成綠色，細(xì)胞核被染成紅色。WKY-C組大鼠動(dòng)脈組織可見正常密度的膠原纖維，，Ⅰ型膠原纖維主要分布在外膜，Ⅲ型膠原主要分布在中膜及外膜;與其相比，SHＲ-C組動(dòng)脈管壁細(xì)胞核數(shù)目增多，Ⅰ型膠原纖維增多，彌漫性分布于中膜平滑肌胞漿、間質(zhì)以及外膜，Ⅲ型膠原亦增多，彌漫分布于中膜及外膜，大小動(dòng)脈分布基本一致，但小動(dòng)脈膠原增加更為顯著，尤以外膜顯著。熒光定量分析結(jié)果顯示:與WKY-C組相比，SHＲ-C組Ⅰ、Ⅲ型膠原的表達(dá)增多，且小動(dòng)脈更為顯著(P＜0．01)，尤以III型膠原最為明顯(P＜0．01);主動(dòng)脈以I型膠原增加為主，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Westernblot檢測(cè)顯示SHＲ-C組大、小動(dòng)脈Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)水平增加，與激光掃描共聚焦顯微鏡定量分析結(jié)果基本一致，見圖8～10。2．4超微結(jié)構(gòu)的變化透射電鏡下WKY-C組血管超微結(jié)構(gòu)正常，?
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學(xué)院;濰坊科技學(xué)院;山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院保健科;
【基金】：山東省科技發(fā)展計(jì)劃(No.2014GSF118043)
【分類號(hào)】：R544.1

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本文編號(hào)：2527145