【摘要】：研究背景骨組織是人體內(nèi)較穩(wěn)定的礦化結(jié)締組織結(jié)構(gòu),其中含有4種活性細胞成分：成骨細胞(osteoblast)、破骨細胞(osteoclast)、骨襯細胞(bone lining cell)及骨細胞(osteocyte)。盡管在生理特性上其有惰性的一面,骨組織其實是一種具有高度活力的器官,其內(nèi)部一直發(fā)生著成骨細胞的新骨形成及破骨細胞的骨吸收的骨重塑(bone remodeling)過程。簡單來說,骨重塑就是新骨替代舊骨的過程。實際上骨重塑是一個高度復雜及協(xié)調(diào)的循環(huán)過程,主要包括3個連續(xù)卻無法截然分開的階段：(1)破骨細胞啟動骨吸收；(2)由骨吸收到新骨形成的過渡期；(3)成骨細胞的新骨形成期。這個過程的發(fā)生有賴于破骨細胞、成骨細胞、骨細胞及骨襯細胞之間的協(xié)同作用,這4種細胞共同形成了臨時的解剖結(jié)構(gòu)——基本多細胞單位(basic multicellular unit, BMU)。有證據(jù)表明,骨細胞充當機械應(yīng)力感受器(mechanosensor)并參與調(diào)控骨重塑的過程。正常的骨重塑是骨折修復、骨骼的機械適應(yīng)性及鈣穩(wěn)態(tài)所不可缺少的過程。另一方面,如骨吸收及骨形成之間的平衡被破壞,將會導致多種骨骼疾病的發(fā)生,如過度骨吸收會導致骨量丟失或骨質(zhì)疏松,相反,如骨形成過度則會發(fā)生骨硬化癥。因此,骨吸收與骨形成間的平衡是至關(guān)重要的,且有賴于局部及全身多種因素如激素、細胞因子、化學因子及生物刺激等的協(xié)同效應(yīng)。各種原因造成的骨折愈合障礙(延遲愈合、不愈合等)目前依然是骨折治療術(shù)后最為常見且后果嚴重的并發(fā)癥,往往需要多次住院及手術(shù)治療,除治療周期的延長外,其預(yù)后往往無法預(yù)料,對病人衛(wèi)生保健系統(tǒng)來說是一種沉重的負擔,而對骨科學者來說則是一項嚴峻的挑戰(zhàn)。因此,如何預(yù)防及治療這些并發(fā)癥一直是眾多骨科學者孜孜不倦所研究的重心。在骨不連的治療領(lǐng)域存在著一種“鉆石四邊理念”(Diamond Concept),該理念強調(diào)在治療骨不連時應(yīng)同時予以生長因子、支架及成骨細胞,并在需要的時候更換骨折固定方式。我們認為在這理念中生長因子的范疇應(yīng)該是廣義的,不單指生長因子(growth factor),還應(yīng)包括激素、藥物等一切有生物效應(yīng)的物質(zhì),而在這當中較有研究前景的還包括他汀類藥物(statins)。他汀類是臨床上治療高膽固醇血癥最主要的藥物,然而,除降脂作用外,他汀類藥物尚被發(fā)現(xiàn)可發(fā)揮一系列如促進骨再生、抗氧化、抗血栓形成及免疫抑制等生物學效應(yīng)。在這些效應(yīng)中,促進骨再生這方面最受研究者的關(guān)注,且在這方面研究得最多的一種他汀類藥物是辛伐他汀(simvastatin)。有足夠的證據(jù)表明,辛伐他汀通過促進成骨細胞增殖分化、抑制成骨細胞凋亡及抑制破骨細胞形成及激活等途徑發(fā)揮促進骨再生效應(yīng)。然而,辛伐他汀對骨組織內(nèi)數(shù)目最多的細胞類型——骨細胞的作用卻鮮有報道。骨細胞是骨骼中重要的感受器、整合器及傳感器,一直以來被認為是一種較不活躍的細胞。然而,有研究結(jié)果表明,骨細胞會在骨構(gòu)建、代謝性骨病等高骨轉(zhuǎn)換率(bone turnover)狀態(tài)下發(fā)生凋亡。這一發(fā)現(xiàn)使學者們對骨細胞重新燃起了研究熱情。近十年來,我們不斷拓寬了對骨細胞功能的理解水平,最主要的原因是骨細胞的一些特異性標記物的發(fā)現(xiàn),如牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)、骨硬化蛋白(sclerostin)等,使得我們對骨細胞的生理功能有了更深刻的認識。骨硬化蛋白(sclerostin)主要由骨細胞分泌,是骨形成的重要負向調(diào)節(jié)因素,主要通過抑制成骨細胞的增殖分化而抑制骨形成。骨硬化蛋白的表達受多種因素的調(diào)節(jié),包括機械應(yīng)力、局部細胞因子和內(nèi)分泌等因素。眾多實驗研究證實,下調(diào)骨硬化蛋白的表達可導致骨形成及骨量的增加。在臨床上,骨硬化蛋白的單克隆抗體被用于治療婦女絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥,可顯著降低骨硬化蛋白水平及恢復骨礦密度。核因子KB受體活化因子配體(receptor activator for nuclear factor-κB ligand, RANKL)是一種Ⅱ型跨膜蛋白,且是腫瘤壞死因子(TNF)超級家族的一員,是目前發(fā)現(xiàn)的唯一具有誘導破骨細胞分化、發(fā)育及發(fā)揮細胞效應(yīng)的因子。有研究證明,肢體不負重會導致增加骨細胞凋亡,并且會提高RANKL蛋白的表達水平。此外,骨細胞是RANKL的主要來源,抑制骨細胞凋亡可下調(diào)RANKL的表達。由此看來,骨細胞更像是骨構(gòu)建(modeling)與重塑(remodeling)過程的“司令細胞”,通過骨硬化蛋白和RANKL調(diào)節(jié)成骨細胞與破骨細胞的功能。然而,目前為止仍缺乏闡明骨細胞的凋亡與骨硬化蛋白及RANKL的表達之間關(guān)系的相關(guān)資料。實驗?zāi)康?、通過動物實驗的方法,并從醫(yī)學影像學、組織病理學、分子生物學等多個角度,探討辛伐他汀在大鼠脛骨開放截骨模型骨愈合過程中所起的作用,并重點觀察辛伐他汀對骨細胞凋亡的作用情況,為后續(xù)的研究提供理論依據(jù)。2、通過SD大鼠原代骨細胞分離培養(yǎng),驗證辛伐他汀、骨細胞凋亡及骨硬化蛋白、RANKL的表達之間的關(guān)系,并初步探討這之間可能的分子機制,從而為該藥物在骨科臨床上的應(yīng)用提供更充分的理論依據(jù)。實驗方法一、動物實驗1、載辛伐他汀克氏針的制備160mg辛伐他汀原料藥溶于由1.5m1乙酸乙酯及100mg PDLLA組成的溶液中,得出濃度為10% W/W的辛伐他汀工作液。將直徑1.Omm、長30mm的克氏針在辛伐他汀工作液中蘸2次,在層流環(huán)境中自然干燥后-20°保存?zhèn)溆谩?、建模及分組。72只雌性SD大鼠隨機分為辛伐他汀治療組及對照組。采用Christine等報道的方法建立SD大鼠脛骨開放截骨模型,治療組用載藥的克氏針作髓內(nèi)固定物,對照組的固定物則僅含PDLLA涂層。3、影像學檢查于術(shù)后2周、4周及8周,戊巴比妥鈉麻醉大鼠后,拍攝大鼠右脛骨側(cè)位X線片影,并按照改良Lane-Sandhu X射線評分標準對拍攝所得的X線片進行評分。4、組織病理學檢查于術(shù)后2周、4周、8周用空氣栓塞法處死動物,取出標本后依次進行脫鈣、脫水、透明、透蠟、包埋等處理,最后將組織塊切成5μM的薄片,并采用HE及番紅O-固綠對組織切片進行染色,并于光鏡下觀察結(jié)果。5、Western blot檢測于術(shù)后2周、4周及8周采用western blot技術(shù)檢測2組實驗動物骨痂中骨硬化蛋白及RANKL的蛋白表達水平。6、Real-time PCR檢測采用Real-time PCR檢測術(shù)后第2、4、8周2組實驗動物骨痂中Bcl-2、caspase-3、sclerostin及RANKL mRNA的表達水平。RT-PCR按照TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0試劑盒說明書進行。7、免疫組織化學染色術(shù)后4周時,采用免疫組織化學染色法檢測組織中caspase-3、sclerostin、 α-SMA蛋白的表達量。8、TUNEL原位細胞凋亡檢測采用TUNEL原位細胞凋亡檢測法檢測術(shù)后第4周時2組實驗動物標本中骨細胞的凋亡情況,實驗操作按生產(chǎn)商提供的說明書進行。9、生物力學檢測在術(shù)后第8周,采用三點彎曲試驗對2組的脛骨標本進行生物力學分析,記錄最大載荷并計算出標本的彈性模量。所得結(jié)果與同一實驗動物健側(cè)脛骨自我比較,結(jié)果以占對側(cè)百分比的形式表示。二、細胞實驗1、SD大鼠原代骨細胞的分離培養(yǎng)無菌條件下將3只SD乳鼠的長骨及顱骨取出,剔除干凈骨膜及其他附著于骨骼上的軟組織,取Hank's平衡鹽溶液將長骨內(nèi)骨髓組織沖出,然后通過序貫、交替的膠原酶消化及EDTA脫鈣法進行骨細胞的分離。用α-MEM培養(yǎng)基(含5%胎牛血清+5%小牛血清)培養(yǎng)原代骨細胞,至細胞長至融合狀態(tài)時進行細胞傳代。本研究使用第5-10代細胞進行實驗。2、骨細胞的鑒定骨細胞的鑒定要點有：(1)細胞外形特點：細胞外形呈星形或樹枝狀,形態(tài)偏圓偏短,表面有4個以上的突觸并與周圍細胞形成聯(lián)系；(2)細胞上清液中堿性磷酸酶測定值較低(與成骨細胞相比較)；(3)骨鈣蛋白表達水平較高。3、骨細胞凋亡模型的建立采用腫瘤壞死因子-α刺激骨細胞而形成骨細胞凋亡模型。為了獲得TNF-α的最佳刺激濃度,使用流式細胞術(shù)檢測不同濃度(5、10、20、40ng/ml) TNF-α刺激下骨細胞的總凋亡率,TNF-α作用時間為24小時。4、骨細胞凋亡檢測采用TUNEL細胞凋亡檢測法檢測在不同處理條件下骨細胞的凋亡情況,檢測操作按產(chǎn)品說明書進行,熒光顯微鏡下觀察,激發(fā)波長為460nm,發(fā)射波長為545nm。5、活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)檢測采用細胞活性氧簇檢測試劑盒(Deep Red Fluorescence)檢測骨細胞細胞內(nèi)的活性氧簇,實驗步驟按產(chǎn)品說明書進行,采用熒光酶標儀檢測各孔的熒光信號強弱,熒光酶標儀激發(fā)波長為650 nm,發(fā)射波長為675 nm。未處理組細胞用于設(shè)定背景熒光強度。6、Real-time PCR采用Real-time PCR檢測骨細胞中IL-1α、TNF-α、NF-κB mRNA的表達水平。RT-PCR按照TaKaRa RNA PCR Kit(AMV) Ver.3.0試劑盒說明書進行。7、Western blot檢測采用western blot檢測骨細胞中骨硬化蛋白、RANKL蛋白表達水平及MAPKs、NF-κB信號通路及相關(guān)凋亡因子(Bax,Bcl-2,caspase-3)在不同條件下的活化情況。實驗結(jié)果一、動物實驗1、影像學檢查及Lane-Sandhu評分影像學檢查提示術(shù)后2周2組實驗動物的X線片表現(xiàn)并無明顯差別,均未見明顯骨痂形成。術(shù)后4周、8周辛伐他汀治療組無論從骨痂形成量還是愈合質(zhì)量均優(yōu)于對照組。Lane-Sandhu影像學評分顯示：術(shù)后2周,實驗組動物的評分為(0.26±0.86)分,對照組為(0.35±1.00)分,統(tǒng)計結(jié)果為P0.05,無統(tǒng)計學差異。術(shù)后4周,實驗組動物的評分為(4.92±1.44)分,對照組為(3.58±2.06)分,統(tǒng)計結(jié)果為P0.05,且辛伐他汀治療組優(yōu)于對照組。術(shù)后8周,實驗組動物的Lane-Sandhu評分為(7.92±2.53)分,對照組為(5.17±1.94)分,統(tǒng)計結(jié)果為P0.05,故2組動物在術(shù)后4周的Lane-Sandhu評分差異具有統(tǒng)計學意義,且治療組優(yōu)于對照組。2、組織病理學檢查結(jié)果HE染色結(jié)果顯示：術(shù)后第2周時,2組動物脛骨的骨折間隙由炎性纖維組織填充,均未見明顯纖維性骨痂形成。骨折固定術(shù)后4周,2組實驗動物骨折端均可見骨痂形成,實驗組的骨痂形成量較多,且骨痂中可見大量新生血管,纖維骨痂逐漸被軟骨性骨痂取締。骨折內(nèi)固定術(shù)后8周,辛伐他汀組軟骨骨痂周邊連續(xù)不斷為新生骨小梁取代,骨小梁粗細較均勻,且骨小梁排列亦較術(shù)后4周時整齊,由此可見實驗組硬骨痂已逐漸開始塑形過程。相比之下,對照組軟骨骨痂數(shù)量相對較少,軟骨化骨進程緩慢,新生小梁狀骨排列紊亂無序。番紅O-固綠染色結(jié)果顯示2組實驗動物組織的染色結(jié)果顯示,2組中均可見軟骨性骨痂,且辛伐他汀組骨折部位軟骨組織較對照組少,說明其骨折區(qū)軟骨化骨進程比對照組快。3、Western blotting檢測結(jié)果Western blotting檢測結(jié)果顯示術(shù)后2周、4周及8周,辛伐他汀處理組實驗動物骨痂中骨硬化蛋白及RANKL的蛋白表達量均顯著比對照組低；而同一組實驗動物在不同時間期間此兩種蛋白的表達量亦存在顯著性差異,并呈遞減趨勢。4、Real-time PCR結(jié)果Real-time PCR檢測結(jié)果提示：術(shù)后2周,實驗組caspase-3、sclerostin及RANKL mRNA的表達水平均低于對照組(p0.05)；實驗組Bcl-2 mRNA的表達水平較對照顯著升高。術(shù)后4周,實驗組caspase-3、sclerostin及RANKL mRNA的表達水平依然低于對照組(p0.05),實驗組Bcl-2mRNA的表達水平依然較對照顯著升高。術(shù)后8周,2組實驗動物caspase-3、sclerostin mRNA水平的比較無顯著性差異,而2組實驗動物Bcl-2 mRNA的表達水平比較,對照組依然低于實驗組,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),實驗組RANKL mRNA表達水平較對照組高,差異有統(tǒng)計學意義(p=0.008)。對各指標行單因素方差分析后發(fā)現(xiàn),除RANKL外,各指標的表達水平隨時間推移而均有所下降。5、骨細胞凋亡檢測結(jié)果TUNEL原位細胞凋亡檢測結(jié)果顯示在骨折術(shù)后第4周時,對照組大鼠組織切片中TUNEL陽性的骨陷窩數(shù)量顯著多于實驗組,經(jīng)統(tǒng)計分析得出二者之間差異存在統(tǒng)計意義(t=3.648,p=0.004)。6、免疫組織化學染色結(jié)果免疫組化染色結(jié)果顯示,與實驗組相比,對照組實驗動物骨組織中caspase-3及sclerostin的蛋白表達量顯著增多,兩者差異有統(tǒng)計學意義。然而,在術(shù)后第4周時對照組大鼠骨痂中的微血管密度卻比實驗組少,且差異存在統(tǒng)計學意義(p0.05)。7、生物力學測試結(jié)果骨折治療后8周三點彎曲力學性能檢測結(jié)果顯示,對照組的最大載荷及彈性模量均小于實驗組,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。二、細胞實驗1、SD大鼠原代骨細胞的分離培養(yǎng)及鑒定骨細胞分離培養(yǎng)初期,可見有少許成骨細胞及成纖維細胞共同生長,經(jīng)多次消化、傳代后骨細胞逐漸純化,形成長勢良好、外形獨特的細胞系。骨細胞外形多呈星形或樹枝狀,細胞表面有多個長突觸,并與周圍細胞形成聯(lián)系,而成骨細胞多外形多為梭形、錐形或立方形,細胞表面突觸少且細。骨細胞體型較成骨細胞小,但更立體。此外,骨細胞的堿性磷酸酶活性比成骨細胞低(p0.01),而骨鈣素表達水平卻顯著高于成骨細胞(p0.01)。2、最佳TNF-α刺激濃度及辛伐他汀處理濃度流式細胞術(shù)結(jié)果示,骨細胞的總凋亡率隨TNF-α刺激濃度升高而相應(yīng)升高(F=71.57,P0.000)。根據(jù)檢測結(jié)果,本研究最終選用20ng/ml作為TNF-α的刺激濃度。MTT比色法檢測結(jié)果示骨細胞的活性隨著辛伐他汀刺激的濃度升高而下降(F=57.04,P0.000),根據(jù)結(jié)果,選取10-5 mol/L作為本次實驗辛伐他汀的主要處理濃度。3、ROS檢測結(jié)果骨細胞內(nèi)活性氧簇檢測結(jié)果顯示,TNF-a顯著刺激ROS的形成(P0.01 vs對照組),而辛伐他汀預(yù)處理則可顯著抑制ROS的形成(P0.01 vs TNF-α處理組)。4、辛伐他汀抑制TNF-α誘導的骨細胞凋亡TUNEL檢測結(jié)果顯示TNF-α (20ng/ml)刺激顯著誘導骨細胞發(fā)生凋亡(P0.01 vs對照組)。辛伐他汀預(yù)處理可顯著抑制TNF-α誘導的骨細胞凋亡(P0.01 vs TNF-α處理組)。此外,流式細胞術(shù)顯示出相近的結(jié)果,且ROS清除劑NAC對骨細胞預(yù)處理后同樣顯著抑制骨細胞凋亡。5、TNF-α誘導骨細胞上調(diào)sclerostin、RANKL蛋白的表達Western blot結(jié)果顯示,20ng/ml的TNF-α刺激骨細胞24 h后,骨細胞中sclerostin及RANKL蛋白的表達量顯著高于對照組(P0.01)。辛伐他汀保護骨細胞30 min后再使用TNF-α進行刺激,辛伐他汀有抑制TNF-α對骨細胞上調(diào)sclerostin及RANKL蛋白表達量的效應(yīng),且該抑制效應(yīng)呈濃度依賴性。6、辛伐他汀抑制TNF-α誘導的凋亡相關(guān)因子的活化Western blot檢測結(jié)果顯示,骨細胞暴露于TNF-α刺激后,顯著增加了Bax蛋白的表達及減少了Bcl-2蛋白的表達。然而,辛伐他汀預(yù)處理骨細胞后,顯著抑制了TNF-α上調(diào)Bax蛋白及下調(diào)Bcl-2蛋白的效應(yīng)。辛伐他汀處理組的Bcl-2/Bax比率顯著高于TNF-α處理組。此外,caspase 3蛋白的檢測結(jié)果與上述結(jié)果一致,TNF-α刺激可顯著增加cleaved caspase-3蛋白的表達水平(P0.01,VScontrol),表明caspase-3與TNF-α誘導的骨細胞凋亡相關(guān),而對骨細胞進行辛伐他汀預(yù)處理可顯著下調(diào)cleaved caspase-3蛋白的表達水平。7、辛伐他汀通過抑制JNK/NF-κB通路而抑制TNF-α誘導的骨細胞凋亡Western blot檢測結(jié)果顯示,骨細胞暴露于TNF-α刺激后,顯著增加了JNK、p38及ERK蛋白的磷酸化。然而,辛伐他汀(10-5M)預(yù)處理抑制了JNK蛋白分子的磷酸化,而對p38、 ERK蛋白的磷酸化則無抑制作用。此外,TNF-α刺激尚可使IKKα/β的磷酸化水平上升(p0.01),而辛伐他汀預(yù)處理則可減弱這種上調(diào)效應(yīng)。另一方面,TNF-α刺激骨細胞可顯著上調(diào)NF-κB的表達水平(F=42.27,P0.0001),且呈時間依賴性。使用辛伐他汀及MAPKs信號通路抑制劑預(yù)處理骨細胞后western blot檢測NF-κB蛋白的表達水平,結(jié)果顯示,辛伐他汀及JNK抑制劑SP600125對NF-κB的表達有抑制作用,而p38及ERK抑制劑卻無此作用。Western bolt檢測JNK抑制劑SP600125及NF-κB抑制劑BAY11-7082對TNF-α誘導的骨細胞凋亡的作用,檢測結(jié)果顯示,辛伐他汀及JNK、NF-κB抑制劑顯著抑制骨細胞中caspase-3蛋白的激活。8、辛伐他汀通過抑制JNK/NF-κB信號通路而下調(diào)sclerostin及RANKL蛋白的表達Western blot檢測結(jié)果顯示,JNK抑制劑SP600125及NF-κB抑制劑BAY11-7082顯著抑制sclerostin及RANKL蛋白的表達。9、Real-time PCR結(jié)果本研究采用實時熒光定量PCR檢測骨細胞凋亡對IL-1α、TNF-αmRNA表達的影響。PCR檢測結(jié)果顯示,TNF-α刺激顯著增高IL-1α、TNF-αmRNA的表達水平,而辛伐他汀可顯著抑制這些促炎性因子的表達,NF-κB抑制劑BAY11-7082應(yīng)用亦可抑制IL-1α、TNF-αmRNA的表達。此外,TNF-a刺激顯著增高NF-κB mRNA的表達水平,而辛伐他汀可顯著抑制NF-κB mRNA的表達,此外,MAPK/JNK抑制劑SP600125的應(yīng)用同樣顯著抑制NF-κB mRNA的表達。實驗結(jié)論本研究通過結(jié)合體內(nèi)、體外實驗兩部分,并從影像學、生物力學、組織病理學及分子生物學等多個角度,探討辛伐他汀在骨再生方面的生物學效應(yīng)及分子機制,著重觀察其對骨細胞的影響作用,全文結(jié)果總結(jié)如下：1、局部應(yīng)用辛伐他汀可加速開放截骨模型骨折修復的進程及提高骨折愈合質(zhì)量,且這種促進效應(yīng)與其抑制骨細胞凋亡、下調(diào)骨硬化蛋白、RANKL的表達有關(guān)；2、通過TNF-a的刺激,成功構(gòu)建了骨細胞的凋亡模型,為后續(xù)骨細胞的功能研究提供了良好的細胞模型；3、辛伐他汀通過抑制ROS/JNK/NF-κB信號通路而進一步抑制凋亡相關(guān)因子的激活,最終抑制骨細胞凋亡；4、辛伐他汀抑制骨細胞表達骨硬化蛋白及RANKL,且該抑制效應(yīng)同樣與ROS/JNK/NF-κB信號通路有關(guān)。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R68
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8 本報實習記者 梁媛媛;薛定：發(fā)現(xiàn)癌癥“開關(guān)”[N];北京科技報;2010年
9 高書明;誘導癌細胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報;2004年
10 勇匯;中藥誘導癌細胞凋亡研究進展[N];中國醫(yī)藥報;2002年
相關(guān)博士學位論文 前10條
1 楊利;系列多氮類化合物的抗腫瘤活性研究[D];武漢大學;2012年
2 張浩;從分子、細胞和動物水平研究鉛誘發(fā)氧化損傷及細胞凋亡的效應(yīng)與機理[D];山東大學;2015年
3 何欣怡;家蠶微孢子蟲（Nosema bombycis）抑制家蠶BmN細胞凋亡的功能研究[D];浙江大學;2015年
4 馮全服;從線粒體途徑研究川芎嗪誘導HepG2細胞凋亡效應(yīng)機制[D];南京中醫(yī)藥大學;2015年
5 張曉倩;高糖誘導Bim蛋白高表達而促腎近曲小管上皮細胞凋亡的機制探討[D];山東大學;2015年
6 孫健瑋;PTEN基因負調(diào)控Raf1磷酸化的作用及其對PC3細胞凋亡的影響[D];昆明醫(yī)科大學;2014年
7 徐林艷;腫瘤細胞凋亡過程中TNFRSF10B和CFLAR調(diào)控機制研究[D];山東大學;2015年
8 樊慶端;生物調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的建模與動力學行為研究[D];上海大學;2015年
9 王德選;WNK_3對鈉氯協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)運子的調(diào)節(jié)及在胚腎細胞凋亡中的保護作用[D];南方醫(yī)科大學;2015年
10 葉嘉;Nogo-B在急性肺損傷肺泡上皮細胞凋亡中的作用[D];第二軍醫(yī)大學;2015年
相關(guān)碩士學位論文 前10條
1 曹璐璐;2,2’,4,4’-四溴聯(lián)苯醚(BDE-47)對人胚腎細胞(HEK293)的毒理效應(yīng)及作用機制研究[D];中國科學院煙臺海岸帶研究所;2015年
2 張薇;蒜頭果蛋白誘導HepG-2細胞凋亡的研究[D];云南民族大學;2015年
3 唐建國;視黃醇X受體出核抑制對神經(jīng)元細胞凋亡的影響[D];福建醫(yī)科大學;2015年
4 安璐;3-氯-1,2-丙二醇細胞毒性及其誘導HEK293細胞凋亡途徑探究[D];江南大學;2015年
5 楊翔;Procaspase-8的異常表達抑制TRAIL誘導腫瘤細胞凋亡[D];昆明理工大學;2015年
6 張昌明;I3C通過調(diào)控p53泛素化對喉癌Hep-2細胞凋亡的影響[D];延邊大學;2015年
7 彭涵;共軛亞油酸對仔豬脂肪細胞凋亡的影響[D];西南大學;2015年
8 李立輝;ΔFosB通過MMP-9調(diào)控山羊乳腺上皮細胞凋亡的分子機制[D];西北農(nóng)林科技大學;2015年
9 楊鑫鋮;Hedgehog信號通路在大鼠急性胰腺炎腺泡細胞凋亡中的作用[D];河北醫(yī)科大學;2015年
10 賈瓊瓊;MicroRNA-214對H_2O_2損傷L6骨骼肌成肌細胞增殖和凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學;2015年
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本文編號：
2490414
